0 閲覧数 • 2:25 分 • April 30th, 2023
ゼブラフィッシュの胚異種移植片は、がん細胞の浸潤を研究するのに役立ちます。蛍光標識された転移性がん細胞と非がん性細胞を2つのトランスジェニック胚の周縁腔に注入することにより、異種移植モデルを調製します。ペリビテリン腔は、胚の周皮と卵黄嚢との間の空間です。胚を希望の期間成長させます。
この期間中、転移性がん細胞は注射部位で積極的に分裂しますが、非がん細胞は安定しています。インキュベーション後、パスツールピペットを使用して胚をガラス底の懸濁皿に移します。余分な卵水を取り除き、イメージングのために胚を希望の位置に配置します。皿の上にカバースリップを置き、皿を明るい視野顕微鏡の下に置きます。
画像をキャプチャし、両方のタイプの細胞の侵襲的挙動を分析します。転移性がん細胞は、注入部位から血管に浸潤する傾向があります。それらは循環に沿って移動し、その後、周囲の組織に侵入して増殖します。対照的に、非癌性細胞は注射部位に残ります。プロトコル例では、ゼブラフィッシュ異種移植モデルのキュビエのビテリン周囲腔と管に乳がん細胞を注入して、転移を研究します。
転移を可視化するには、パスツールピペットで、注入したゼブラフィッシュの胚をガラス底ポリスチレン皿に移し、余分な卵水分を取り除きます。低倍率に設定された共焦点顕微鏡で胚の全身を画像化し、腫瘍細胞播種の一般的なパターンを取得します。
488ナノメートルのレーザーを使用してゼブラフィッシュの胚の血管系を視覚化し、543ナノメートルのレーザーを使用して、赤色蛍光マーカーで標識された移植された腫瘍細胞を視覚化します。次に、胚を8〜10ステップでスキャンして、高品質の画像を取得します。
本研究では、がん細胞の浸潤を調査するために、ゼブラフィッシュ胚異種移植の利用について検討します。蛍光標識した転移性細胞および非がん細胞をゼブラフィッシュ胚の卵黄嚢周囲腔に注入することで、成長過程におけるこれらの細胞型の異なる挙動を観察することが可能です。
ゼブラフィッシュ胚異種移植片における転移性がん細胞の浸潤性の定量分析は、初期段階の標的検証およびメカニズム的なリスク低減のための迅速なin vivoシステムを提供します。本モデルでは、がん細胞の播種を直接可視化し測定することが可能であり、前臨床腫瘍学パイプラインにおける予測の信頼性を高めます。このアプローチは、ポートフォリオの選別および抗転移候補物質の優先順位付けに情報を供するための戦略的な位置付けにあります。
このゼブラフィッシュ異種移植アッセイは、創薬から前臨床までの継続的なプロセスに組み込まれ、哺乳類を用いた研究に先立ち、早期の仮説検証およびメカニズム的なリスク低減を可能にします。
関連動画
0 再生回数
関連動画
0 再生回数
関連動画
0 再生回数
関連動画
0 再生回数
関連動画
0 再生回数
関連動画
0 再生回数
関連動画
0 再生回数
関連動画
0 再生回数
関連動画
0 再生回数
関連動画
0 再生回数
最終更新:29 8月 2026