JoVE 実験百科事典
がん研究
0 回視聴 • 3:18 分 • April 30th, 2023
- 気管支内送達は、特定の肺に実験薬を投与します。まず、麻酔をかけたマウスをプラスチックボードに仰臥位で固定し、拡張カテーテルで気管をカニューレ抜きします。遠位右肺にカニューレを挿入するには、ボードを30度回転させ、抵抗を感じるまでカテーテルをマウスの正中線と平行にガイドします。
実験薬をカテーテルに投与します。次に、スポイトで空気を分注して、カテーテルから薬剤を取り除きます。カテーテルを抜き、マウスを30秒間所定の位置に保持します。マウスをケージに入れて回復します。
気管内カニューレ挿入後に実験薬を左肺遠位端に送達するには、プラスチックボードをマイナス74度に回転させます。カテーテルを左のメインステム気管支にゆっくりと進めます。ボードをマイナス30度に回転させて、実験薬の投与に重力の補助を与えます。より大きな面積を持つ左肺葉に比例して、より多くの実験薬を送達します。スポイトで空気を分注し、カテーテルを引き抜きます。マウスを30秒間所定の位置に保持してから、ケージに入れて回復させます。
次のプロトコルは、マウス肺の選択的沈着のための気管支内投与によるEvans青色色素の送達を示しています。
- 遠位右肺の選択的葉カニューレ挿入の場合、気管内挿管後、プラスチックボードを30度回転させ、カテーテルのハブをマウスの正中線と平行に適切な重量ベースの深さに導きます 表に示されているように。ゲルローディングチップを使用して、20マイクロリットルの0.3%エバンスブルー染料をカテーテルに供給し、続いてガラススポイトで1〜2 100マイクロリットルの空気を送り込みます。次に、カテーテルを引き出し、マウスを30秒間所定の位置に保持してから、完全に回復するまで動物を監視しながら動物を温めた毛布の上に置きます。
遠位左肺の選択的葉カニューレ挿入の場合、気管内挿管後、プラスチックボードをマイナス 74 度回転させ、カテーテルを左主茎気管支にゆっくりと進め、下方 90 度で適度な圧力をかけてブックエンドに向かって進めます。左下肺セグメントをカニューレした後、プラスチックボードをマイナス30度回転させ、ゲルローディングチップで0.3%エバンスブルー染料を40マイクロリットル供給します。次に、ガラススポイトを介して1〜2 100〜300マイクロリットルのアリコートの空気を送達し、カテーテルを抜いてマウスがデモンストレーションどおりに回復できるようにします。