プレターゲット放射性免疫療法:治療用放射性核種を腫瘍に標的送達する方法

- プレターゲット放射性免疫療法またはPRITは、放射性リガンドに結合しながら腫瘍特異的細胞表面抗原に対して高い親和性を示す免疫複合体または抗体構築物を利用します。プレターゲティングするには、血清アルブミンタンパク質で処理したシリンジでこれらの抗体を所望の濃度で取ります。血清処理は、これらの抗体がシリンジ壁に結合するのを防ぎます。

次に、結腸直腸腫瘍担体マウスモデルをヒートランプの下に置き、尾静脈を拡張します。拡張した静脈に抗体を注入します。これらの免疫複合体が腫瘍部位に到達すると、腫瘍特異的な細胞表面抗原に対する高い親和性により、組織内での蓄積が促進されます。

その後、適切な量の放射性リガンドを服用します。放射性リガンドを、事前に標的としたマウスの拡張尾静脈に投与します。これらの分子が腫瘍部位に到達すると、抗体と結合します。これらのリガンドの放射性崩壊中に放出される高線量の放射線は、正常細胞への曝露を最小限に抑えながら、標的腫瘍を死滅させます。

次のプロトコルでは、結腸直腸癌マウスモデルでトランスシクロオクテン修飾抗体とルテチウム-177標識テトラゼン放射性リガンドを使用したプレターゲット放射線免疫療法を示します。

- 結腸直腸癌異種移植片を持つ女性の胸腺ヌードマウスを選別して、各コホートの平均腫瘍体積がほぼ等しくなるようにします。これを行うには、動物の識別番号、耳のノッチパターン、および腫瘍の体積をスプレッドシートプログラムの3つの別々の列にリストします。腫瘍体積が小さいものから大きいものへとデータを並べ替えます。4 番目の列で、各動物にケージ番号を割り当てます。

すべての動物がケージに割り当てられるまで、ヘビのようなパターンでケージを循環させます。ケージが割り当てられたら、データをケージ番号でソートします。免疫複合体を注射するには、PBS中の1%ウシ血清アルブミンで前処理したシリンジに150マイクロリットルのhuA33-TCO溶液を吸引し、これらのシリンジを氷上に保存します。.放射性リガンドを注入するには、まず、投与されたhuA33-TCOの量に対して放射性標識Tz-PEG7-DOTAの1.1モル相当の0.9%滅菌生理食塩水を150マイクロリットルで投与します。

ノギスを使用して、長方形の腫瘍の最も長い辺と、長さに垂直な幅を測定します。天秤で各マウスの体重を量り、時間の経過に伴う体重増加または体重減少を追跡します。最後に、楕円体の体積の式を使用して体積を計算します。これは、高さが幅とほぼ等しいと仮定します。