化学的に誘発された2段階皮膚発がんモデル:皮膚癌の実験的In vivoマウスモデル

- 実験的ながんマウスモデルでは、動物に誘発されたがんは、表現型がヒトのがんと似ています。これらは、潜在的な治療法の有効性を評価するための効率的なプラットフォームを提供します。2段階の皮膚発がんモデルを誘導するには、まず、免疫不全の麻酔マウスを腹臥位で調製します。毛皮を剃って、下にある皮膚を露出させます。最初のステップでは、露出した背側の皮膚に強力な腫瘍開始剤を塗布します。

休止期または休止期の毛包には、不活性な皮脂腺があります。その結果、皮脂の流れが不足すると、これらの毛包内に化合物が蓄積します。この化合物は周囲の細胞に拡散し、主に毛包幹細胞または初代ケラチノサイト幹細胞で標的遺伝子の突然変異を誘導します。遺伝子発現の変化は、これらの細胞で腫瘍の開始を引き起こします。

第2ステップでは、適切な腫瘍増殖促進剤を背側の皮膚に所望の時間間隔で繰り返し塗布する。この化学物質は、開始された細胞集団の拡大を刺激します。細胞増殖が続くと、乳頭腫と呼ばれる発がん性増殖物が形成されます。

以下のプロトコールでは、変異原物質であるDMBAと成長促進剤であるTPAという化学物質を用いて、2段階の皮膚発がんマウスモデルを作製する様子を示します。

- 実験を開始する前に、攻撃的な7〜9週齢のマウスを別のケージに収容して、戦闘や皮膚病変を避けてください。皮膚乳頭腫誘発術では、まず実験動物の背部皮膚を剃り、マウスの体重を個別に測定します。シェービングの48時間後、ピペットを使用して、200マイクロリットルのアセトンに50マイクログラムのDMBAを麻酔した各マウスの剃毛領域に塗布します。

皮膚乳頭腫のプロモーションのために、DMBA適用の7日後、実験の終わりまで週に2回、200マイクロリットルのアセトンに5マイクログラムのTPAで皮膚を治療します。動物に乳頭腫がないか調べ、毎週、個々の乳頭腫のサイズを地図上に撮影して記録します。

直径1ミリメートルを超える触知可能な腫瘤は、それが1週間以上残っている場合、乳頭腫と見なされます。