Name: 人間の舌から茸（味）乳頭を収集する手法 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-09-18T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 39 s
Description: 学ぶ人間の舌から茸乳頭を収集する生検手法。最小侵襲で味覚組織を採取し、分子・細胞・組織学的研究に利用可能。被験者の安全性を確保しつつ、味覚伝達機構の直接的な解明を可能にする。

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この作品は、NIH R21 DC03969 - 01（国債の）によってサポートされていました。我々は技術支援については、図4Bと氏D.ベイリー氏とS.アラルコンに示すようにRT - PCRを行うための単一味蕾細胞、博士Tauf Huqueを取り込むための博士フリッツリシュカに感謝。 M.ヤペピーノは、医学のNIDAT32 DA07313ワシントン大学、セントルイス、MO（Cottler、LB PI）によってサポートされている仲間です。

<ol><li>Breslin, P. A., Spector, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mammalian+taste+perception%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Mammalian taste perception.</a> Curr Biol. 26 (4), R148-R155 (2008).</li>
<li>Miller, I. Anatomy of the peripheral taste system. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMiller%2C+I+%22Handbook+of+Olfaction+and+Gustation%22">Handbook of Olfaction and Gustation</a>. Doty, R. I., Dekker, M. , Marcel Dekker. New York. 521-547 (1995).</li>
<li>Figure 12.67. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Gray%27s+Anatomy%3A+The+Anatomical+Basis+of+Medicine+and+Surgery%22">Gray's Anatomy: The Anatomical Basis of Medicine and Surgery</a>. , 38th Edition, Churchill Livingstone. New York. (1995).</li>
<li>Huque, T., Cowart, B. J., Dankulich-Nagrudny, L., Pribitkin, E. A., Bayley, D. L., Spielman, A., Feldman, I., S, R., Mackler, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sour+ageusia+in+two+individuals+implicates+ion+channels+of+the+ASIC+and+PKD+families+in+human+sour+taste+perception+at+the+anterior+tongue%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Sour ageusia in two individuals implicates ion channels of the ASIC and PKD families in human sour taste perception at the anterior tongue.</a> PLoS One. 4 (10), e7347-e7347 (2009).</li>
<li>MacDonald, J. F., Mody, I., Salter, M. W., Spielman, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patch-clamping+of+taste+cells+in+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Cell+Biology+of+Taste+and+Olfaction%22%5BJournal%5D)">Patch-clamping of taste cells in mouse.</a> Experimental Cell Biology of Taste and Olfaction. Spielman, A. I., Brand, J. G. , CRC Press. Boca Raton, FL. 329-332 (1995).</li>
</ol>

利害の衝突は宣言されません。

ヒト細胞を使用する1つの顕著な利点は、それらの特異性です。詳細にここで説明する手順は、人間からの味覚受容体細胞の単離のための舌組織を提供します。これらの味細胞は味覚情報の伝達のための重要な分子を発見しようとする、分子の研究に使用し、刺激する味細胞の活動を監視するカルシウムイメージング研究のために。することができますさらに、このプロシージャによって提供される舌の組織は、in situハイブリダイゼーション 、このような免疫組織化学などの様々な手法で分析し、そのようなリアルタイム定量的単一細胞PCRを含むポリメラーゼ連鎖反応（PCR）、などの分子の手順については、個々の細胞を取り込むことができますすることができます。この手順は、その意味で味のpsychophysically生検を施行する前に評価することができる個人に実行できるので、それは（例えば、Huque らを参照してください。2009）味覚異常の責任分子の詳細を明確に把握することが可能です。この生検方法には、味蕾の細胞に富んで生存し、代謝的に無傷の単一細胞調製物の生産、したがって、これらの細胞にパ...

<table><tbody><tr><td>マクファーソン・バナス。湾曲した鋭い切断刃 5mm。コーム、先端幅 0.2 mm 全長 3&quot;</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5603, Roboz</td><td></td></tr><tr><td>小型デュモンピンセット</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-4915, Roboz</td><td></td></tr></tbody></table>

人間の舌から茸（味）乳頭を収集する手法

Technique to Collect Fungiform (Taste) Papillae from Human Tongue

味の感覚は、人間の生活にとって非常に重要です。それは潜在的に摂取される食品の品質について、身体を通知し、消化のために消化管を準備する代謝プロセスを刺激する。着実な進歩は、味覚変換を（確認のため、Breslinさんとスペクター、2008年）の基礎となる初期の生化学的および分子事象の理解に向けて作られている。しかし、現在までの進捗状況は、主に動物モデルに起因している。まだ、受容体の特異性と受容体密度の著しい違いが種間で異なるため、人間の味覚変換は、人間の味覚組織を使用することによって理解されるであろう。ここでは、味蕾を含む直径約0.5mm角の丸いピンクの前部構造など目に見える人間の茸状乳頭に、、収集する生検法を説明します。これらの生検乳頭は、in situハイブリダイゼーション、免疫組織化学で実行可能な味蕾細胞の分離、そして、分子生物学の技法により、味に固有の新規タンパク質の同定を含む、いくつかの目的のために使用されています。

味覚伝達の分子メカニズムの知識は、最近、主な原因動物モデルを使用して、大きな進歩を遂げました。しかしながら、ヒト組織における哺乳類のワラントの研究間の味の感度と特異性の広い多様性。私たちは、人間の舌で乳頭からの生活の味細胞を収集するために生検の手法を説明します。

味覚は人間の生命にとって極めて重要です。味覚は、摂取される可能性のある食物の質について体に知らせ、代謝を刺激し……

本手順の全体的な目的は、舌上のカンジダ菌（human fungi form per pilly）を除去することです。まず、滅菌済みのガーゼパッドを舌の前方4分の1に巻き付け、左手でしっかりと保持します。次に、舌の下から左人差し指をゆっくりと押し上げ、舌を指の上で伸ばすことで、標的となるカンジダ菌（fungi formm per pill）を露出させます。手順の第2ステップでは、採取部位より遠位の舌背部に2%リドカイン麻酔薬を0.25 milliliters注入します。麻酔が効くまで3分間待ちます。手順の第3ステップは乳頭の除去であり、ブレードの分岐点に近い最も内側のセグメントを用いて切除を行います。ハサミの刃を開いた状態で標的のper pillarの上に配置し、周囲の組織を押し下げて標的の乳頭（papilla）が刃の間に突き出るようにします。その後、一度の速い動作で切除します。切除にハサミの先端を使用しないでください。手順の最終ステップとして、切除したper pillarをハサミの刃とストレート鉗子を用いて持ち上げます。切断したper pillarを、適切なバッファーへと慎重に移します。その際、per pillarを挟み込まないように注意してください。この調製物は、in situ hybridization、免疫組織化学、ポリメラーゼ連鎖反応などに使用できます。また、これは単離した個々の味蕾細胞を得るための基質でもあります。この手順の主な利点は、現時点において、新鮮なヒトの味蕾を収集する唯一の方法であることです。菌状乳頭。まず、被験者を歯科用チェアまたはヘッドレスト付きの椅子に座らせます。次に、口腔内の組織の状態を全般的に検査します。ドライマウスや舌病変の兆候がないかを確認し、舌病変やドライマウスを含む口腔疾患の兆候が見られる被験者は、本研究から除外します。被験者に水で口をすすがせ、口腔内の汚れを取り除かせます。この際、操作者は手袋を着用してください。滅菌ガーゼを使用して、口腔外に伸展させた舌の前方4分の1を保持します。麻酔を行う場合は、2%リドカインを用い、28ゲージ・1/2インチ針を装着した1 cc結核用シリンジを使用してください。1:100,000に希釈したエピネフリンを用い、針を背側の直下に挿入します。リドカインがその後の研究に影響を及ぼすのを避けるため、麻酔部位は採取部位よりも遠位にする必要があります。針を挿入した後、麻酔液を注入する前に吸引を行い、血管に刺入していないことを確認してください。ただし、注入部位は背側であるため、その可能性は低いです。舌静脈に伴走する太い舌動脈は、舌の腹側表面に沿って走行しています。麻酔を施した約1 cm四方の領域は、周囲の組織に比べてわずかに蒼白に見えます。これは、組織の腫脹によって細血管が圧迫されることと、エピネフ

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Medicine

医学

我々は人間の茸状乳頭味細胞の長期培養を分離して維持するための再現可能なプロトコルを開発することを目的とした。生検で得られたヒト茸状乳頭由来の細胞が正常に生存率の低下なしに個以上の通路（12ヶ月）培養で維持した。...

人間の茸状の味覚乳頭細胞の単離および培養

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マウスモデルからの環状乳頭(CVP)上皮の単離:マウス舌からCVP上皮を分離するための酵素的手順

脂肪酸及び食事と脂肪食品の嗜好との関連の経口化学受容、肥満の発展とその理由食生活の変化は、多くの個人のために困難な場合があるとの関与するメカニズムの識別を可能にすることができる。...

オーラル脂肪酸しきい値、脂肪知覚、脂肪食品嗜好、およびヒトにおける乳頭密度を測定

ここでは、デジタル写真から茸状乳頭密度を測定するためのプロトコルを提示します。この方法は、ミラー＆リーディ（1990）による茸状乳頭の元の記述の仕事に優先順位付けし、客観的な特性の測定基準を構築します。...

茸乳頭の客観的な分析のためのデンバー乳頭プロトコル

このプロトコルは、人間の味覚応答を測定し、簡単な解剖学的評価、短い味テスト、およびサブジェクトの報告された感覚と味覚受容体遺伝子を使用して、検証メソッドが含まれています。...

味試験: 検証して簡単なテスト

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μTongue:生体内舌用マイクロ流体ベースの機能イメージングプラットフォーム

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部分的に膵臓を摘出された患者からのヒト膵島の単離

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の簡略化手法<em&gt;その場</em人間の眼球から角膜と網膜組織の空洞化の&gt;切除

このビデオの目的は、人間の被験者に対する改良されたBergström骨格筋生検技術を紹介することです。...

変更されたベルイストローム法を用いたヒト骨格筋生検手順

学ぶ人間の舌から茸乳頭を収集する生検手法。最小侵襲で味覚組織を採取し、分子・細胞・組織学的研究に利用可能。被験者の安全性を確保しつつ、味覚伝達機構の直接的な解明を可能にする。

人間の舌から茸（味）乳頭を収集する手法

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