モスキート子育てのためのプロトコル（A. gambiae）
2007年7月4日
このビデオでは、実験室で背面ハマダラカに使用される一般的なテクニックを示しています。実験室での蚊の世話をするための方法は、吸血性の成人に蛹に幼虫から生物のライフサイクルの全段階を経て実証されています。
私の名前はシッシュで、ジョン・ホプキンス公衆衛生大学院のジョージ・OU博士の研究室でポスドクをしています。分子微生物学・免疫学教室では、フィスガンビの蚊の飼育方法を紹介します。実験室では、通常、摂氏27度、湿度80%に維持されるインセクタールームでそれらを維持します。
インセクタールームは、自然条件の条件を模倣できるように、12時間の昼夜のサークルにも維持されています。これが私たちが持っているインセクタールームで、ここの中核施設であり、この昆虫を維持しています。ご覧のとおり、これらには、すべての異なる段階の蚊、卵、幼虫のさまざまな段階、およびのぞき見が入ったさまざまなトレイがあります。
これらのトレイには、生後11日か12日のような幼虫がいますが、これは成虫の蚊を集め、10%のショ糖溶液を維持するケージです。蚊の着用を開始するには、蚊が卵を産むために血液のタンパク質が必要なため、蚊に血液を供給する必要があります。ですから、初日は成虫がケージに集められ、10%のショ糖に維持された後です。
初日は蚊に血液を与えることであり、それが人工膜の血液供給の理由です。これはガラスフィーダーで、蚊の膜供給に使用しています。私たちは、あなたが見ている小さな穴を通して血液を入れ、その中に血液を入れます。
側面の下部には2つのノズルがあり、これらは37度に維持されるウォーターバースに接続されています。血液を37歳で暖かく保つために、給餌のためにフィーダーを準備するために、私たちは危険の小さな部分を取ります。両端から4つの側面すべてから伸ばし、それをガラスフィーダーの開いた側に置いて、皮膚を模倣するような薄い膜のシートを作ります。
これがメンブレンフィーディングと呼ばれるものです。これは循環水浴であり、水を37に維持し、ガラスフィーダーを介して水を循環させて、血液が37で暖かくセメントで固められるようにします。そこで、ガラスフィーダーを小さな毛細管で接続し、それを循環水浴に接続し、水浴をオンにすることで、水が循環し、水と血液が2つの別々のチャンバーにあるため、水と血液が混ざり合うことはありません。
これはフィスガンビの成虫の蚊のケージです。これがガラスフィーダーで、循環バスに接続されており、ケージの上部にクランプを取り付けて、200マイクロリットルの血液を追加します。ケージにはオスとメスの両方の蚊がいます。
血を食べに来るのは女性だけです。給餌は約30分間続きます。給血の2日後、蚊のケージの中に卵カップを入れます。
これが行われている方法です。私たちは小さなものを取り、部分的に蒸留水で満たし、何を取り、紙を充填し、円錐形で包み、蒸留水を含むビーカーに入れ、インダペッパーがmoを得ることを確認します。次に、蚊が出てきないように注意しながら蚊のケージをゆっくりと開き、卵カップを中に入れます。
カップがケージの中に置かれた翌日、つまり4日目に、カップはゆっくりとケージから取り出されます。そして、これらは卵、黒いもので、蚊の死骸もいくつかあります。卵の準備ができたら、プラスチックのトレイに置きます。
以前は、プラスチックトレイは蒸留水で満たされていました。卵と一緒に濾過唐辛子を取り、それらを出します。また、魚のひき肉であるAという食べ物をひとつまみ加えて、トレイをラックに入れます。
トレイを開始する日にトレイを水平にし、また、彼らがここにいる種も何ですか。これはあなたの後であり、これはあなたが卵をトレイに置いた翌日です。つまり、これらは1日前のものですが、実際のプロトコルは蚊の日の5日目です。
これらは黒いもので、卵は卵で、幼虫に孵化するばかりです。そして、これらは蚊の食べ物です。蚊の飼育には、通常3種類のエサを使います。
食品Aは実際には挽いた魚の餌で、これは蚊の培養を開始するとき、つまりX段階にあるときに、ピュリナから購入したキャットフードであるCの食品を毎日2錠追加するものです。8日か9日後、トレイの水を交換して新鮮な水を与えます。そしてその時、食べ物Aの代わりに、挽いた食べ物以外の何物でもない食べ物Bをひとつまみ加え、キャットフードを挽いたCを加え、幼虫に食べ物C、卵、孵化した食べ物Cの2錠を追加します。
そして、幼虫には3つの異なる段階があります。1 番目はインストール中、2 番目はインストール中、3 番目はインストールです。これらは、生後5〜6日経過した幼虫が入ったトレイです。
これらのラヴィは、9〜10日齢のように、はるかに後の段階にあります。その間に水が交換され、新鮮な水と新鮮な食べ物が追加されました。このトレイには、大人用と個人用保護具の両方があります。
ご覧の通り、蚊帳の下を飛んでいる成虫です。そして端には、大人にハッチングする予定のすべての暗い色のPPEを見ることができます。大人が手に入ると、こんな感じのケージに集める準備が整います。
内側にはペーパータオルの裏地があり、10%のスーパー溶液が入った小さなボトルと綿石鹸缶があり、蚊の食料源として機能します。それで、私たちはふたを覆いました、そしてこれは装置、吸引器、そしてそれはこれらのトレイから成虫を集めることを通して真空に接続されています。アスピレーターのこの部分は、ここで接続されており、もう一方の端にあります。
掃除機に接続されています。ケージを入れて、大人をこの小さな箱に集めます。これは吸引器の別の部分で、蚊帳の中に入れる長いチューブがあります。
反対側はケージに接続されます。すべてがきつく締まっていることを確認し、掃除機がうまく機能するようにする必要があります。蓋を閉め、すべてがしっかりと閉まっていることを確認します。
バックエンドをゆっくりと開始します。セットアップの準備ができたら、この長いパイプを蚊帳の内側にゆっくりと入れ、ネットを閉じて蚊が緩まないようにします。そして、ご覧の通り、蚊は小さなケージに集められています。
パイプをゆっくりとあちこちに持って行き、すべての大人を集めます。これでほぼ完了です。すべての成虫が集められ、そして彼らはすべてこのケージに入っています。
その後、ゆっくりと真空を解除し、収集装置を解体します。これがアナガンビの成虫の蚊で、数日間このケージにいます。彼らは10%のスクロースにフィットし、卵を産む必要があるときにのみフィットするように血液が与えられます。
蚊の着方をお見せしました。実験室の条件でFinis mb蚊は、言葉で重要なステップは血液のフィッティングです。次に、卵を追いかけて卵カップを置き、その後、幼虫、PPE、成虫などのさまざまな段階を経ます。
そして最後に、大人を集めます。この技術の重要性は、健康な蚊がいるように、自然条件の外にある条件を模倣し、次にマラリア原虫を感染させ、マラリアに関するさまざまな種類の研究を行う必要があることです。
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概要
このビデオは、実験室でアノフェレス・ガンビアエを飼育する技術を示し、すべての生活段階を通じて蚊の世話をする方法を実演しています。
主要な研究要素
科学の分野
- 昆虫学
- 媒介生物学
- 実験室技術
背景
- アノフェレス・ガンビアエは主要なマラリア媒介者です。
- 蚊の生活サイクルを理解することは、媒介者制御にとって重要です。
- 実験室での飼育は自然条件を模倣しています。
- 温度と湿度は発育にとって重要です。
研究の目的
- アノフェレス・ガンビアエの飼育を実演すること。
- 実験室での蚊の世話に関する洞察を提供すること。
- マラリア伝播の研究を促進すること。
使用された方法
- 管理された昆虫室での蚊の維持。
- 摂氏27度の温度調整。
- 80%の湿度制御。
- 自然条件を模倣する12時間の明暗サイクル。
主な結果
- すべての生活段階を通じての蚊の成功的な飼育。
- 効果的な実験室技術の実演。
- 蚊の発育の視覚的表現。
- アノフェレス・ガンビアエの環境ニーズへの洞察。
結論
- 実験室の条件は蚊の生活サイクルを効果的にサポートできます。
- 適切な世話は研究と媒介者制御の研究にとって重要です。
- これらの方法を理解することはマラリア研究を助けます。
よくある質問
Executive Industry Relevance
Reliable laboratory rearing of Anopheles gambiae is foundational for vector-borne disease research and preclinical model development. Standardized mosquito production enables controlled infection studies, supporting target validation and mechanistic de-risking in malaria research pipelines. Consistent insectary workflows underpin translational continuity from discovery biology to intervention assessment.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Enables reproducible production of disease-relevant mosquito cohorts for infection and transmission studies.
- Supports functional validation of vector-pathogen interactions under controlled conditions.
- Facilitates mechanistic de-risking by providing standardized biological material for hypothesis testing.
Screening & Assay Development
- Provides validated mosquito populations for downstream screening of transmission-blocking compounds.
- Ensures assay reproducibility through environmental and nutritional standardization.
- Enables quantitative assessment of intervention efficacy in vector models.
Translational & Preclinical Research
- Maintains disease-relevant vector systems for preclinical evaluation of candidate interventions.
- Supports continuity from laboratory discovery to translational biomarker studies in vector biology.
- Reduces biological variability, improving predictive confidence in preclinical outcomes.
Pipeline & Workflow Integration
This mosquito rearing protocol anchors the early discovery and preclinical continuum for malaria research, enabling robust infection models and intervention testing.
- Discovery Biology: Supplies standardized vectors for hypothesis-driven studies of malaria transmission.
- Screening: Delivers reproducible mosquito cohorts for compound efficacy assays.
- Analytics: Supports quantitative readouts of infection, transmission, and intervention impact.
- Translational Research: Bridges laboratory findings to preclinical validation in disease-relevant systems.
- Enterprise Reuse: Establishes a scalable, reusable platform for vector-based research across programs.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence and reduces mechanistic ambiguity in vector-pathogen studies.
- Operational Value: Standardizes mosquito production, improving reproducibility and scalability.
- Strategic Value: Enables informed go/no-go decisions for vector-targeted interventions.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted prioritization of malaria research assets.
Implementation Considerations
- Requires entomological expertise and strict environmental control infrastructure.
- Demands consistent access to blood sources and specialized feeding apparatus.
- Necessitates rigorous cross-team standardization for reproducible outputs.
- Adaptation may be needed for different mosquito species or research objectives.
- Operational limitations include biosecurity and ethical sourcing of blood products.
Biopharma FAQs
Chapters in this video
11:44
Day 17-21 - The Cycle Repeats
8:20
Day 14-16 - Adult Mosquitoes Emerge
5:10
Day 4 - Eggs are Collected
12:07
Conclusion
6:22
Day 5-8 - Feed Larvae Every Day
3:43
Day 3 - Mosquitoes Lay Eggs
0:01
Introduction
8:02
Day 13 - From Larvae to Pupae
7:36
Day 9-10 - Late Stage Larvae
1:08
Day 1 - Blood-Feeding Mosquitoes
8:39
Day 16 - Collection of Adult Mosquitoes
