成体マウスの内耳への局所薬物送達のためのカナロストミー

麻

酔をかけたマウスを右側臥位に置くことから始めます。

耳の後ろを切開し、下にある筋肉を解剖して三半規管を露出させます。

後で使用するために小さな筋肉片を切除します。

内耳内の液体で満たされた管である後半規管またはPSCを見つけます。

PSCの真ん中に穴を開け、その部分を清掃します。

シリンジポンプに取り付けられた薬剤で満たされたマイクロシリンジに接続されたカニューレを取ります。

このカニューレをPSCの穴に挿入し、後管が前管と合流する領域であるクリュコミューンに向かって移動して、内耳にアクセスします。

カニューレから内耳に薬液を注入し、局所的な薬物送達を確保します。

分娩後、カニューレを取り外し、切除した筋肉片を穴に入れて漏れを防ぎます。最後に、縫合糸で切開部を閉じます。

まず

、麻酔をかけたマウスを予熱した電気パッドの上に置きます。電気パッドの温度を約37°Cに設定します。動物の目を眼軟膏で覆い、左耳介後領域を電動動物用バリカンで剃り、75%エタノールで皮膚を3回

消毒します。

次に、左耳の手術を容易にするために、動物を右側臥位にします。左耳介後溝から3ミリメートルのところに、1〜1.5センチメートルの耳介後切開を行います。耳介の根元が原点として定義され、頭蓋骨に平行な平面が3時から9時の場合、後半規管と外側半規管は通常、耳介の根元から約3ミリメートルの位置にあります2時から3時の間。

側頭骨を覆う筋肉をマイクロ鉗子で鈍く解剖し、側頭骨の黒い縞模様として縁がはっきりと見える後半規管と外側半規管を露出させます。次に、マイクロ鉗子で筋肉の小片を集め、乾燥させます。

次に、26ゲージの針を使用して後半規管の中央部分に小さな穴を開け、穴からの液体の漏れが後半規管の骨壁への浸透に成功したことを示すようにします。穴をポリアミドチューブの直径よりわずかに大きく拡大します。

次に、綿ペレットを使用して後半規管全体を囲む滲出液を洗浄します。ポリアミドチューブの先端を、クリュコミューンに向かって後半規管に1〜2ミリメートルの深さまでそっと挿入します。

ポンプの「実行」ボタンを押して注入を開始します。注射後、試薬が広がるまで2分間待ちます。次に、注射カニューレを取り外し、すぐに後半規管の穴に筋肉を入れます。

分離した筋肉と皮下組織を一緒に戻します。5-0縫合糸を使用して切開部を縫合します。切開部をポビドンヨードで消毒します。最後に、手術が完了したら、回復のために摂氏37度に予熱された電気パッドの上に動物を右側の位置に置きます。