0 閲覧数 • 2:55 分 • February 2nd, 2026
まずは肺結核を引き起こす病原性細菌である 結核菌の凍結ストックから始めます。
バイアルを解凍し、懸濁液を優しく混ぜて細菌の塊を分散させ、均一な濃度を確保します。
必要な量を無菌バッファーで希釈し、標準化されたエアロゾル接種物を準備します。
マウスをメッシュホルダーで拘束し、動きを制限し、密閉されたエアロゾル露出チャンバーに入れます。
準備済みの接種物を注射器に詰め、チャンバーに取り付けられたネブライザーユニットに注入します。
吸入システムを作動させてください。このシステムは圧縮空気を使って懸濁液を細かく呼吸可能な液滴に霧状化します。
これらの滴は生存可能な 結核菌を含むもので、室内空気中に拡散します。
意識のあるマウスはエアロゾルを吸い込み、生存可能な細菌が肺の奥深くに侵入し感染を開始します。
肺結核のマウスモデルは、さらなる研究の準備が整いました。
まず、既知のCFUタイターを持つ 結核菌 株を温熱します。細胞が解凍されたら、27ゲージの針を装着した1ミリリットルの注射器で、懸濁液を慎重に5回混ぜて細菌の塊を分散させ、エアロゾルの発生を防ぎます。希望する感染用量に応じて、必要な体積のマイコバクテリアストックを無菌PBSを含む50ミリリットルのチューブに移し、最終的な6ミリリットルの体積に移します。次に、実験動物を個別に区画付きのメッシュバスケットに入れます。バスケットを円形エアロゾルチャンバーに入れ、蓋を閉めます。
ベンチュリ・ネブライザーユニットを3つのステンレス製ソケットジョイントに接続します。菌の懸濁液を10ミリリットルの注射器に吸引し、18ゲージの鈍針を装着し、密閉された輸送箱内のエアロゾルチャンバーへ運びます。次にネブライザーのスクリューキャップを外し、マイコバクテリアの懸濁液を慎重にユニット内に注入し、エアロゾル発生を避けます。
注射器を2%のブラトン入りのシャープス容器に捨て、ネブライザーを密封します。
吸入装置を動かせ。
サイクルが完了したら、ミコバクテリアの懸濁液が完全にネブライズされているか確認してください。