慢性緑膿菌皮膚創傷感染のマウスモデル開発

まず、麻酔マウスに背側に全層切除皮膚創2箇所を置き、表皮層と真皮層の両方を外科的に切除します。

創傷を覆う透明なフィルムドレッシングが施され、部位を隔離し外部汚染を防ぎます。

一定期間、マウスが回復するのを待ちます。

この間、さまざまな成分を含む血液が傷口に入ります。これにより血小板が活性化され、フィブリン、フィブロネクチン、プロテオグリカンからなる仮マトリックスの組み立てが促され、血栓形成が始まります。

マウスの再麻酔を施し、両脇腹に生理食塩水を注入して水分補給を続けます。

次に、各傷口に一定量の発光性緑 膿菌(Pseudomonas aeruginosa )をフィルムを通して注入します。

細菌は仮マトリックス内に定着し、それが付着と成長を支えます。

マトリックスとフィルムドレッシングが合わさることでバイオフィルム形成に適した環境が提供され、局所的な慢性感染を引き起こします。

発光を記録して細菌感染を監視してください。

手術後24時間後、再度麻酔したマウスの体重を測定し、両側腹部に250マイクロリットルの予温無菌0.9%塩化ナトリウムを皮下注射します。

次に、発光性 P. aeruginosa 株懸濁液100マイクロリットルを500マイクロリットルのツベルクリン安全キャップシリンジに27ゲージの針を装着し、透明なフィルムドレッシングを通して各創に40マイクロリットルの細菌懸濁液を注入します。

細菌の懸濁液がよく混ざり合い、透明なドレッシングが無傷であることを確認しましょう。透明なドレッシングは、刃取り側を上にして針で一度だけ刺してください。

その後、マウスを温熱パッドの上にケージに戻し、モニタリングしながら、ケージの床にフードペレットの間に挟んで高カロリーの栄養補助ペーストを用意します。