宿主-病原体相互作用研究のための溶血性 黄色ブドウ球 菌培養の準備

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まず、選択的栄養素の寒天プレートに血中赤血球を補足します。

グラム陽性病原性細菌であるストリーク ブドウ球 菌(S.aureus)を寒天に乗せて培養します。

孵化中、細菌は栄養分を利用し、成長し、コロニーを形成します。

S. aureus は溶血毒素を分泌します。これは寒天中の赤血球を溶除し、コロニーの周囲に透明で透明な領域を作り出す溶血を示す毒素です。

溶血性コロニーを選び、栄養ブロスに接種し、細菌の成長を支えるために回転条件下で培養します。

分光光度計を用いて、光学密度(OD)を測定して細菌濃度を測定します。

ODの測定値に基づき、アリコットを新鮮な栄養ブロスに移して細胞を希釈し、振って水浴で培養します。

ODを定期的に測定してください。

ODが0.8付近であれば、細菌が均一な生理構造を持つ指数関数的な成長段階に達したことを示します。

この溶血性 のS. aureus は宿主と病原体の相互作用研究に適しています。

まず Sをストリークすることから始めましょう。注目株のAures 株は、凍結グリセロールストックの血液寒天プレート上で37度Cで16〜24時間培養し、赤血球を溶解し透明なゾーンを形成する能力に基づいて溶血性表現型を確認します。

各株の単一コロニー分離株を、4ミリリットルのトリプティック大豆ブロス(TSB)に無菌ガラス管で接種し、チューブを37度の角度でチューブローラーで約70度の角度で1分あたり70回転させて16〜24時間回転させます。翌朝、分光光度計で600ナノメートル(OD600)の培養物の光学密度を測定し、細胞を125ミリリットルのデロンフラスコで5対1のフラスコと体積比で25ミリリットルの無菌TSBでOD600 の0.05に希釈します。培養物は37度の水浴で、毎分280回転で培養します。

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最終更新:1 8月 2026