細菌バイオセンサーを用いたヒト糞便代謝物の検出

まず培地中に懸浮させた細菌バイオセンサー培養から始めます。

これらの遺伝子操作細菌は転写因子を産生し、特定の糞便代謝物に結合すると蛍光リポーター遺伝子に関連するプロモーターを活性化します。

この培養に、宿主とマイクロバイオームの相互作用に関与する乳酸などの代謝産物を含むろ過されたヒト便サンプルを加えます。

この混合物を新鮮な培地で希釈し、最適な反応容積を保ちます。

人間の腸環境を模倣するために、震えずに孵化させてください。

糞便代謝物は細菌細胞内に拡散し、転写因子に結合します。

この複合体はプロモーターに結合し、リポーター遺伝子発現とタンパク質産生を引き起こします。

溶液を均一分布に混ぜ、バッファーで希釈し、フローサイトメトリーで分析します。

細菌細胞がレーザーを通過する際、リポータータンパク質から発せられる蛍光が特定の糞便代謝物の存在を確認します。