膀胱上皮細胞モデルにおける 腸道細菌 のFimH媒介宿主相互作用

マルチウェルプレートでヒトの膀胱上皮細胞の培養を取ります。

対照菌を野生型 エンテロバクター・クロアカエ(細菌表面に毛状構造を持つ病原性細菌)で培養します。

ピリのFimHサブユニットは宿主細胞受容体に結合し、野生型細菌を宿主細胞に固定します。

実験培養をFimHを欠く変異型 Enterobacter cloacae で培養します。

FimHがないため、変異細菌は宿主細胞に付着できません。

孵化後はバッファーで洗浄し、結合していない細菌を除去します。

溶解バッファーを追加し、攪拌しながら培養して宿主細胞を破壊し、付着した細菌を放出します。

ライサートを連続的に希釈し、栄養培地に盛り付けて培養します。

対照培養からの溶解液はコロニーを生成しますが、実験培養からの溶解液は生じず、FimHが細菌の宿主細胞への接着に不可欠であることが確認されます。