病原性細菌による火傷感染のマウスモデルの確立

まずは背中を剃った麻酔をかけたネズミから始めましょう。

ネズミの腹部の下にペトリ皿の蓋を置いて背中を水平に保ちます。

真鍮のブロックを沸騰したお湯の入ったビーカーに浸し、加熱するまで浸します。

その間に皮下注射で鎮痛剤を投与してください。

そして、加熱した真鍮ブロックをマウスの剃られた背中に押し当てます。

熱は皮膚の最外層である表皮を損傷し、下の組織に広がって火傷を残します。

ブロックを取り外し、脱水を防ぐために皮下で生理食塩水を注射してください。

次に、緩衝液に浮遊した病原性細菌の接種物を散布します。

無菌の綿棒を使って、細菌を傷口全体に均等に広げてください。

細菌は表面タンパク質を使って細胞受容体に付着し、定着を開始し、保護的なバイオフィルムを形成し、局所的な感染を確立します。

このやけど感染のマウスモデルは、宿主と病原体間の相互作用研究に適しています。

麻酔後、テキストプロトコルに従い、50枚のヘアクリッパーで背中のネズミを剃り、できるだけ多くの皮膚を露出させます。次に、35ミリのペトリ皿の蓋をマウスの腹部の下に置き、背中を比較的水平に保ちます。

10インチ×10インチの220VACホットプレートを使って、150ミリリットルのビーカーでお湯を沸騰させます。真鍮製のブロックをビーカーに浸し、水と熱的平衡が取れるまで浸します。火傷を負う前に、痛みを和らげるために予防的鎮痛剤を皮下注射してください。

10分後、サーマルグローブを着用したまま、加熱された真鍮ブロックをネズミの背中の剃られた部分に優しく7秒間押し当て、火傷を誘発します。皮下注射で0.5ミリリットルの滅菌生理食塩水を投与します。熱損傷誘導から5分後、ピペットを使ってPBSの5×10の6番目のCFUを含む細菌懸濁液50マイクロリットルをマウスの火傷に接種します。

次に、滅菌綿棒を皮膚の上でジグザグに動かし、アリコートを火傷部分に塗り、焼けた部分の細菌細胞をできるだけ均等に分布させます。