JoVE 実験百科事典
微生物学
0 回視聴 • 2:52 分 • March 31st, 2026
まず、背中を露出させた麻酔をかけたマウスをペトリ皿の蓋の上に置きます。
マウスは発光性の薬剤耐性菌に感染した火傷傷を負っています。
青色光の過剰曝露を避けるために、マウスの目をアルミホイルで覆いましょう。
マウスを青いLEDデバイスの下に一定距離で置きます。
一定の強度で傷口を照射してください。より高い用量を投与するために曝露時間を延ばしましょう。
光は創傷組織を通り、定着する細菌に到達します。
これらの細菌内で、光に敏感な分子が青色光を吸収し光活性化して活性酸素(ROS)を生成します。
ROSは発光タンパク質を含む細菌成分を損傷し、周囲組織への被害を最小限に抑えつつ細菌細胞の死を引き起こします。
各曝露後は、傷口周辺の細菌の生存率を監視するために生物発光イメージングを実施します。
線量が増加すると、信号もそれに応じて減少します。
この減少は、青色光による酸化ストレスによる抗菌効果を示しています。
マウスに麻酔をかけた後、テキストプロトコルに従い、動物を抗菌ブルーライトまたはaBL処理グループと未処理対照群にランダムに分けます。aBL処理群では、光への過剰曝露を防ぐために目をアルミホイルで覆います。マウスバーンをLEDの真下に置き、35ミリのペトリ皿の蓋をマウス腹部の下に置いて背中を水平に保ちます。
次に、パワーエネルギーメーターを四角いペトリ皿の上のマウスに置き換えます。次に、マウスの高さをLED絞りとマウス燃焼表面の距離が、LEDの開口部とパワーエネルギーメーターの光センサーの距離と同じになる位置に戻します。感染した焼け跡を100ミリワット毎方センチメートルの照射で照射します。
72ジュール毎方センチメートルのアリコット単位でaBLを投与し、合計360ジュール毎方センチメートルの投与量に達するまで続けます。各光照射後、このビデオの前半で示したように、マウスの火傷の生物発光イメージングを行います。未処理の対照群については、aBL処理群と同じ時間間隔でマウスの火傷の生物発光イメージングを行います。