濃縮されたハエサンプルからの食中毒病原体のPCR検出

標的食源性病原体に特異的なPCR対応錠剤を含むポリメラーゼ連鎖反応またはPCRチューブを、冷却したPCRチューブラックに置きます。

各タブレットには標的特異的プライマー、DNAポリメラーゼ、dNTP、PCR反応で使用される蛍光染料が含まれています。

病原菌のDNAを多く含む濃縮ハエ溶解液を加えて反応混合物を形成します。

蒸発を防ぐために光学キャップでチューブを密封してください。

PCRチューブをサーマルサイクラーに積み込み、各標的病原体ごとに病原体特異プログラムを用いて個別のPCRランを実施します。

PCR中、DNAは変性し、プライマーが標的配列に結合し、増幅によって二本鎖DNAが生成され、染料に結合して蛍光を放出します。

繰り返されるサイクルはDNAの指数関数的な増幅と蛍光の増加をもたらします。

この装置は蛍光をリアルタイムで追跡し、サンプル中の標的食中性病原体の存在を検出します。

PCRベースの検出を始めるには、まず冷却ブロックの上でPCRチューブラックを冷却します。次に、対象食源性病原体用のPCR対応錠剤を含む対応するPCRチューブをホルダーに入れます。

デカップツールを使ってPCRチューブのキャップを慎重に外し、捨ててください。各チューブに錠剤が入っているか確認してください。次に、50マイクロリットルの溶解液を適切なPCRチューブに移します。

キャッピングツールを使って新しい光学キャップをPCRチューブに固定します。反応を組み立てた後、PCRチューブをPCRサイクラー検出システムに装填します。その後、プログラムを実行し、メーカーのプロトコルに従って結果を確認します。