クロストリジウム・ディフィシル感染のマウスモデルの確立

まずは抗生物質で事前に処理したマウスから腸内細菌叢を枯渇させます。

ネズミを直立したまま優しく拘束し、食道を伸ばします。

次に、嫌気性細菌病原体である クロストリジウム・ディフィシル由来の胞子接種が入った注射器に口口でガベージ針を接続します。

ガベージ針を口の側面から挿入し、ゆっくりと食道に進めます。

針が食道中央に到達したら、ゆっくりと接種を注ぎ、針を優しく引き抜きます。

投与された胞子は胃を通り小腸に入り、胆汁塩が C. difficile の栄養菌への発芽を引き起こします。

これらの細菌は嫌気性大腸に移動し、そこで競合する微生物叢の減少により上皮表面への付着、増殖、コロニー形成が可能になります。

定着した細菌は上皮接合部を破壊し腸の関門を損傷する毒素を放出します。このバリア破壊は細菌の深部組織への移動を促進し、 クロストリジウム・ディフィシルiの第1種の感染を確立します。

層流フードでは、被験者マウスを首と背中の緩んだ皮膚で優しく固定し、頭部を固定します。

人差し指を使い、動物が鳴いたり苦痛の兆候を見せなかったりしないことを確認することで、動物の頭部をさらに固定し、食道を伸ばします。マウスを直立したままにし、ガベージ針を優しく口の側面に通します。ガベージ針を口蓋に向け、ゆっくりと食道に差し込みます。

針が食道のほぼ半分まで入ったら、25マイクロリットルの胞子接種を注射し、そっと針を抜きます。動物をケージに戻し、誤った気管投与を示す咳や呼吸困難の兆候がないか観察してください。