ショウジョウバエ幼虫における細菌感染の確立

パラフィンフィルムに細菌病原体の一滴を取ってみます。

ショ ウジョウバエ の幼虫を細菌の滴の中に置きます。

立体顕微鏡でタングステン針を使って幼虫を刺し、そのキューティクル、保護層、そしてその下の表皮を刺します。

これにより、細菌が幼虫の血リンパ(循環液)に侵入できるようになります。

感染した幼虫を、酵母ペーストを含む溝のある栄養豊富な寒天プレートに移します。

溝は幼虫の移動を促進し、脱水を防ぎます。

残りの細菌懸濁液をプレートに加え、パラフィンフィルムで密封します。

幼虫の生存率を維持するために、プレートを湿ったチャンバーで孵化させます。

幼虫のヘモリンパ内部では、免疫細胞であるヘモサイトが細菌を検出し、食細胞作用を開始します。

一部の細菌はファゴソームとリソソームの融合後に除去されますが、他の細菌は融合を遅らせたり細胞内ストレスに抵抗して血球内で複製し、持続的な細胞内感染を引き起こします。

感染した ショウジョウバエは現在、宿主と病原体間の相互作用研究の準備が整っています。

イーストペーストをぶどうジュースの寒天プレートに置きます。幼虫が移動できるように寒天に細かい切り込みを入れて乾燥を防ぎましょう。

0.001ミリメートルの尖ったタングステン針を固定鉗子で、パラフィンフィルムを使って組み立てます。高滴価、mCherry発現Cをピペット50マイクロリットルで抽出します。バーネティイをパラフィンフィルムにステレオ顕微鏡で塗り、幼虫を細菌のプールに入れます。幼虫をタングステン針で刺します。

幼虫を寒天プレートに移します。残った病原菌培地を寒天プレートに移し、パラフィンフィルムでプレートを密封します。幼虫は感染後、所望の時間まで湿った空気の中に置いておきましょう。 Cはそのままにしろ。 Burnetii は幼虫を24時間プレート上で感染させました。