Name: ラットにおける急性心筋梗塞 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-02-16T17:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 45 s
Description: 学ぶラットにおける急性心筋梗塞モデルの作成方法。左前下行枝動脈を結紮して虚血・再灌流障害を誘導し、梗塞サイズやリスク領域、細胞死を評価することで、虚血性心疾患の治療戦略を探索するための重要な知見を得ることができます。

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BKM国立衛生研究所（NIH）/国立心臓肺血液研究所（NHLBI）の助成金（R01 - HL085487）によってサポートされています。 MHは、米国心臓協会ナショナル（AHA）科学開発グラント（SDG）及び老年循環器学会でサポートされています。

1。営業エリアの準備<ol><li>操作面は、最初に70％エタノールでエリアを消毒することによって調製される。 </li><li>すべての手術器具は、手術前にホットビーズ滅菌器（および個々のラットの手術との間で）で滅菌することがあります。これらの楽器が含まれます：外科はさみ（2）、ピンセット（1）、湾曲鉗子（1）、ニードルホルダー（2）、および胸のrectractorを。 </li><li>綿のガーゼとアプリケーターが出血を管理するために利用できるようになります。 </li><li> ° C、体温の劇的な低下を防ぐために37℃で± 1の動物の体温を維持するために使用される恒温ブランケットシステム（加熱パッド）の温度を調整し、梗塞の大きさは、依存していますよく体温などの閉塞の持続期間（Tarnavski ら ）。 </li><li>手術の前日、前の麻酔に、各動物はブプレノルフィン（0.1〜2.5 mg / kgのSQ）とカルプロフェン経口錠剤（1錠Rimadyl、Bioserv錠剤）の投与量を受け取ります。手術直前に一度、各動物は再びブプレノルフィン（0.1〜2.5 mg / kgをSQ）の投与量を受け取ります。 </li><li>注：一定期間の心機能と心臓リモデリングの評価対象とした研究では（7 - 28日以降に）、ブプレノルフィン（0.1〜2.5 mg / kgをSQ）の用量を投与される、すべての6時間24〜48時間後に手術とカルプロフェン経口錠剤のための手術後に（"手術後の回復"を参照してください）​​1日1回提供されます。 </li></ol> 2。ラットの作製と挿管<ol><li>前の麻酔導入まで、動物は手術成績を複雑にする可能性のある既存の条件を識別するために検討され、身体検査は目視検査と心拍数、呼吸数、及び体温と体重の測定が含まれます。 </li><li>動物が健康であると判断されれば、250〜300グラムの雄ラット（例えば、スプラーグドーリー）を検討する予定との識別特性が記録されます。 </li><li>ラットは、ペントバルビタール80 mg / kg体重で麻酔、麻酔の適切なレベルは、ラットの爪床の圧力（つま先ピンチ反射）と定期的手続きを通してを適用することにより、四肢の撤退の応答によって確認されます。 </li><li>ブプレノルフィン（0.1〜2.5 mg / kg体重; SQ）は手術時に投与される。 </li><li>電気シェーバーは、毛皮のフォーム首と胸の部分を剃るのに使用されます。注：一定の期間（7 - 28日以降に）上の心機能と心臓リモデリングの評価を対象とした研究では、毛皮は完全に無菌状態を維持するために外科領域から離れて剃毛する必要があります。 </li><li>剃毛の分野では、スクラブと70％アルコールでエリアを拭いて、続いbetadine液で消毒するか、このbetadineとアルコールのスクラブと消毒の手順が3回繰り返されることです。 </li><li>麻酔動物は、体温を維持するために、恒温毛布のシステム上で仰臥位（加熱パッド）に配置されます。 </li><li>気管内挿管は、それから気管の上に5 mmの半ばに首を切開し、筋肉組織の退縮することで、挿管の可視化を強化するためには、まず慎重に気管を露出することによって行われます。 </li><li>チューブが喉頭を介して入口を容易にするためにエッジに面取りされ、これは、気管内チューブ（PE 90ポリエチレンサイズ90）の挿入のためのよりよい視覚化することができます。 </li><li>気管内チューブは、手術用実体顕微鏡を用いて支援可視化と、気管や気管内チューブの入り口を見ながら慎重に舌を操作することによって、気管に挿入されます。 </li><li>機械換気は、ケント科学人工呼吸器（TOPOデュアルモード）80分あたりの呼吸と100グラムの体重当たり1.2 mlの一回換気量でのサイクリングに気管内チューブを接続することによって実現されます。 </li><li>滅菌ドレープは、したがって、動作中に潜在的な汚染を最小限に抑え、露出だけ外科領域を残して、ラットの上に配置されている。 </li><li>動物の外科医とアシスタントは、マスク、ガウン、手袋を着用すること。手袋は、個々のラットの手術の間で変更されていると。 </li></ol> 3。一時的な左前下行（LAD）動脈結紮<ol><li>いったん安定した呼吸が確立されると、胸がスペースを開くには、止血やラウンド終了のはさみを使用して、左第四肋間スペースで開かれているが、組織を切断することなく、出血のリスクを低減することができる。 </li><li>胸のリトラクタは、4番目の肋間スペース内に配置され、左心室（LV）が露出するようにリブを広めるために、肺を傷つけないように最大限の注意を取る。 </li><li>心膜は、その後開いたが、可能であれば場所に残されている。 </li><li>近左前下行（LAD）動脈は、の使用と、（図A - 1）識別されます。urgicalステレオ顕微鏡、およびLADは、一過的に30分間の虚血性周期（図A - 1）については6から0 proleneの縫合糸を使用して（またはスリップノットで接続することができます）ライゲーションが、心の具象化なしている。 </li><li>心臓の再灌流を可能にするために、顕微はさみは、LADの結紮は、次の6から0 prolene縫合、30分で作られた合字（またはスリップノットを解放することによって）、に結び目を切断するために使用されます。 </li><li>シャム対照ラットでは、手順はLADが一時的に結紮されていない場合を除き、同一です。 </li><li>流出は、肺の再膨張を可能にするために人工呼吸器でピンチオフ（1-2秒）簡単にしています。 </li><li>胸のリトラクタが除去され、肋骨を結節縫合パターンを2から0 proleneの縫合糸を使用して一緒に描画されます。 </li><li>リブがクローズされると、人工呼吸器の流出は、適切な呼吸を確保するために、もう一度簡単に（1-2秒）ピンチオフです​​。 </li><li>皮膚は連続縫合パターンを6から0 proleneの縫合糸を使用して閉じられます。 </li></ol> 4。 LADの動脈の成功ライゲーションの確認<ol><li> LADの適切なライゲーションは縫合だけでなく、前壁の機能不全への遠位心筋組織の白化を観察することにより確認される;のような一時的LAD結紮の間に観察。 </li><li>再灌流は心筋組織および前壁の運動のいくつかの回復のデモに赤い色のリターンによって検証されます。のような一時的なLAD結紮直後に観察。 </li><li>注：一定期間の心機能と心臓リモデリングの評価対象とした研究では（7 - 28日以降にして）、心エコー図は、誘導の程度を決定するために、24時間後のLAD結紮を実行されます心筋梗塞。左室内径短縮率（LV FS）&lt;20％、などの心エコー図から決定だけでなく、梗塞と一致して前壁の運動機能障害を持つすべての動物は、心機能およびリモデリングの研究をフォローアップのために特定され、使用されます。シャム対照ラットを40-45％の間で通常のLV FS（デルモンテらを）持つことが期待されています。 </li></ol> 5。手術後の回復<ol><li>手術が完了すると、動物の上に滅菌ドレープが削除されます。体温（直腸温度計による）、呼吸数（目視検査で）、心拍数（動悸によって）、そして痛みの異常な兆候は、動物が歩行可能になるまで監視する必要があります。 </li><li>ラットは、人工呼吸器から削除されますし、動物のケージに入れ、麻酔から回復するために許可される。このケージで、ケージの一端は、ラットが暖かさを追求できるように、加温パッドによって暖められます。また、水は、この観測期間中のラットに利用できるようになります。 </li><li>脱水の兆候が手術後に観察されている場合、滅菌生理食塩水0.5mlを腹腔​​内（IP）に注射されます。 </li><li>ブプレノルフィン（0.1〜2.5 mg / kg体重; SQ）は、その後、手術直後、および手術後の回復中に投与されるであろう。 </li><li>注：一定期間の心機能と心臓リモデリングの評価対象とした研究では（7 - 28日以降に）、ブプレノルフィン（0.1〜2.5 mg / kgをSQ）の用量を投与される、すべての6時間24〜48時間後に手術の手術後。カルプロフェン経口錠剤（Rimadyl、Bioservタブレット）も、少なくとも48時間後の手術のために（1錠毎日）提供されます。 </li></ol> 6。虚血再灌流の組織学的評価<ol><li> 4時間の再灌流期間終了後、ラットをペントバルビタールとLADの80 mg / kgので再び麻酔される（Huangらとカイザーら）（またはスリップノットがretiedすることができます）再び連結されている。 </li><li> 1ミリリットルの5％エバンスブルーは（リン酸緩衝生理食塩水で）、右心室に注入し、2分間灌流することが許可されます。 </li><li> 2分後、飽和塩化カリウム溶液1mlは、拍動から心臓を停止させるために右心室に注入される。 </li><li>心臓はその後、急速に、切り出したアガロースはリン酸緩衝生理食塩水2％に埋め込まれており、1〜2ミリメートルのスライスにして区画されている。 </li><li>生存心筋は、キャプチャされた20分、各スライスの画像を2％トリフェニルテトラゾリウムクロライド（TTC）で染色される。画像は心筋の領域の量を識別するために定量化されています：（1）それはないアットリスク（ブルーセクション）、（2）エリア - アットリスク（AAR、赤と白のセクション）であり、及び（3梗塞された）領域（白"染色"の項）（図-2）。 </li></ol> 7。代表的な結果梗塞サイズと領域アットリスク（AAR）の評価を含む研究については、エバンスブルー色素、トリフェニルテトラゾリウムクロライド（TTC）で、再灌流の4時間以下、LADの適切なライゲーションを確認することができます。として一時的なLADを結紮中に観察された。縫合だけでなく、前壁の機能不全への遠位心筋組織の白化を観察すること。再灌流は心筋組織および前壁の運動のいくつかの回復のデモに赤い色のリターンによって検証することができる、一時的なLAD結紮直後に観察。 （ - 28〜 - 7日以降）、時間の期間にわたって心機能と心臓リモデリングの評価を含む研究の場合は、再灌流に続いて虚血の適切なライゲーションは、前壁の組織、機能不全のブランチングすることにより確認することができる再灌流は、次の壁運動のいくつかの回復と赤の色のとリターン。さらに、心臓機能障害が誘発される心筋梗塞の程度を決定するために、24時間後のLAD結紮を実行される心エコー図によって決定することができる。左室内径短縮率（LV FS）&lt;20％、などの心エコー図から決定だけでなく、梗塞と一致して前壁の運動機能障害を持つすべての動物は、心機能およびリモデリングの研究をフォローアップのために特定され、使用されます。シャム対照ラットを40-45％の間で通常のLV FS（デルモンテ）を持つことが期待されています。 <img src="/files/ftp_upload/2464/2464fig1.jpg" alt="図1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図1"> 図1。心筋梗塞とLADの結紮の模式図。 （1）心筋梗塞と疫病の形成によって引き起こされる心筋梗塞を模倣するために使用される縫合糸を用いて左心室の左前下（LAD）動脈、（2）ライゲーションの模式図。 <img src="/files/ftp_upload/2464/2464fig2.jpg" alt="図2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図2"> 図2。AMIに続いてラット心臓の代表的なイメージ。代表的な青（非閉塞冠状動脈灌流領域）で領域を示すラットの心臓の画像、梗​​塞の領域アットリスク（AAR）を示す赤色（閉塞冠動脈灌流領域の面積、および黄色/白（梗塞ゾーンのエリアAAR以内）。

<ol><li>Hunt, S. A., Baker, D. W., Chin, M. H., Cinquegrani, M. P., Feldmanmd, A. M., Francis, G. S., Ganiats, T. G., Goldstein, S., Gregoratos, G., Jessup, M. L., Noble, R. J., Packer, M., Silver, M. A., Stevenson, L. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SC.ACC%2FAHA+Guidelines+for+the+Evaluation+and+Management+of+Chronic+Heart+Failure+in+the+Adult%3A+Executive+Summary+A+Report+of+the+American+College+of+Cardiology%2FAmerican+Heart+Association+Task+Force+on+Practice+Guidelines+%28Committee+to+Revise+the+1995+Guidelines+for+the+Evaluation+and+Management+of+Heart+Failure%29%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">SC.ACC/AHA Guidelines for the Evaluation and Management of Chronic Heart Failure in the Adult: Executive Summary A Report of the American College of Cardiology/American Heart Association Task Force on Practice Guidelines (Committee to Revise the 1995 Guidelines for the Evaluation and Management of Heart Failure).</a> Circulation. 104, 2996-3007 (2001).</li>
<li>Goldman, S., Raya, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+infarct+model+of+myocardial+infarction+and+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22J+Card+Fail%22%5BJournal%5D)">Rat infarct model of myocardial infarction and heart failure.</a> J Card Fail. 1, 169-177 (1995).</li>
<li>Tarnavski, O., McMullen, J. R., Schinke, M., Nie, Q., Kong, S., &amp, I. zumo, S, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+cardiac+surgery%3A+comprehensive+techniques+for+the+generation+of+mouse+models+of+human+diseases+and+their+application+for+genomic+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Genomics%22%5BJournal%5D)">Mouse cardiac surgery: comprehensive techniques for the generation of mouse models of human diseases and their application for genomic studies.</a> Physiol Genomics. 16, 349-360 (2004).</li>
<li>Thygesen, K., Alpert, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Universal+Definition+of+Myocardial+Infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Universal Definition of Myocardial Infarction.</a> Circulation. 116, 2634-2653 (2007).</li>
<li>Vasilyev, N., Williams, T., Brennan, M. L., Unzek, S., Zhou, X., Heinecke, J. W., Spitz, D. R., Topol, E. J., Hazen, S. L., Penn, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myeloperoxidase-generated+oxidants+modulate+left+ventricular+remodeling+but+not+infarct+size+after+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Myeloperoxidase-generated oxidants modulate left ventricular remodeling but not infarct size after myocardial infarction.</a> Circulation. 112, 2812-2820 (2005).</li>
<li>McConnell, B. K., Popovic, Z., Mal, N., Lee, K., Bautista, J., Forudi, F., Schwartzman, R., Jin, J. P., Penn, M., Bond, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disruption+of+protein+kinase+A+interaction+with+A-kinase-anchoring+proteins+in+the+heart+in+vivo%3A+effects+on+cardiac+contractility%2C+protein+kinase+A+phosphorylation%2C+and+troponin+I+proteolysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Disruption of protein kinase A interaction with A-kinase-anchoring proteins in the heart in vivo: effects on cardiac contractility, protein kinase A phosphorylation, and troponin I proteolysis.</a> J Biol Chem. 284, 1583-1592 (2009).</li>
<li>Monte, D. el, Butler, F., Boecker, K., Gwathmey, W., K, J., Hajjar, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+technique+of+aortic+banding+followed+by+gene+transfer+during+hypertrophy+and+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Genomics%22%5BJournal%5D)">Novel technique of aortic banding followed by gene transfer during hypertrophy and heart failure.</a> Physiol. Genomics. 9, 49-56 (2002).</li>
<li>Huang, M. H., Nguyen, V., Wu, Y., Rastogi, S., McConnell, B. K., Wijaya, C., Uretsky, B. F., Poh, K. K., Tan, H. C., Cheng, J., Perin, E., Fujise, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synergistic+Infarct+Size+Reduction+by+Combination+Therapy+with+Milrinone+and+Esmolol+at+Early+Reperfusion+during+Acute+Myocardial+Infarction%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Synergistic Infarct Size Reduction by Combination Therapy with Milrinone and Esmolol at Early Reperfusion during Acute Myocardial Infarction.</a> American Journal of Physiology. , Forthcoming Forthcoming.</li>
<li>Kaiser, R. A., Bueno, O. F., Lips, D. J., Doevendans, P. A., Jones, F., Kimball, T. F., Molkentin, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+inhibition+of+p38+mitogen-activated+protein+kinase+antagonizes+cardiac+injury+and+cell+death+following+ischemia-reperfusion+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Targeted inhibition of p38 mitogen-activated protein kinase antagonizes cardiac injury and cell death following ischemia-reperfusion in vivo.</a> J Biol Chem. 279, 15524-15530 (2004).</li>
</ol>

利害の衝突は宣言されません。

また、虚血再灌流（IR）と呼ばれるラットの急性心筋梗塞（AMI）は、、一般的に心不全につながる人間の心室リモデリングを模倣するために使用されます。動物モデル（ラット及びマウス）における左室機能不全および心不全の進行は、MIを維持存続し、その後心不全（ゴールド）を開発し、ヒトで観察されたのと似ています。このプロシージャは、このテクニックのあるバージョンを紹介し、また方法論的な変動を説明する追加の注意事項が含まれている。急性心筋梗塞（AMI）プロシージャへの追加のようなバリエーションが虚血の持続時間と再灌流の持続時間が含まれています。また、アクセス権を取得し、LADを連結するために使用される外科的処置についてのバリエーションがあります。 （; MI永久）慢性的に制限され、代わりに、または、虚血期間の長さに関しては、心筋梗塞を誘発するためにLAD結紮の時間は（AMI 60分〜30分）急性制限することができます。心筋梗塞の評価（すなわち、その後の再灌流の期間）にこの初期虚血期間に続く再灌流の持続時間に関しては、梗塞サイズと領域アットリスク（AARを評価するために、（4時間24時間まで）短くすることができます）エバンスブルー色素、トリフェニルテト...

<table><tbody><tr><td>人工呼吸器</td><td>Kent Scientific</td><td>TOPO</td><td>TOPO Dual Mode</td></tr><tr><td>恒温循環装置 E103</td><td>Harvard Apparatus</td><td>732802</td><td></td></tr><tr><td>恒温ブランケットシステム</td><td>Harvard Apparatus</td><td>55-7222F</td><td></td></tr><tr><td>実体顕微鏡</td><td>Nikon Instruments</td><td>MMA36300</td><td>SMZ-645 ズーム実体顕微鏡</td></tr><tr><td>ホットビード滅菌器</td><td>Harvard Apparatus</td><td>610183</td><td></td></tr><tr><td>電気シェーバー</td><td>GE Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ブレードおよびハンドル</td><td>Welch Allyn</td><td>690047-1</td><td>標準（ランプ）喉頭鏡ブレード</td></tr><tr><td>外科用剪刀</td><td>Fine Science Tools</td><td>14014-17</td><td></td></tr><tr><td>外科用剪刀</td><td>Fine Science Tools</td><td>14072-10</td><td></td></tr><tr><td>ピンセット</td><td>Fine Science Tools</td><td>11028-15</td><td></td></tr><tr><td>曲がりピンセット</td><td>Fine Science Tools</td><td>11001-12</td><td></td></tr><tr><td>持針器</td><td>Fine Science Tools</td><td>12004-18</td><td></td></tr><tr><td>持針器</td><td>Fine Science Tools</td><td>91201-13</td><td></td></tr><tr><td>胸部開創器</td><td>Fine Science Tools</td><td>17008-07</td><td></td></tr><tr><td>マスク</td><td>VWR international</td><td>47730-640</td><td></td></tr><tr><td>ガーゼスポンジ</td><td>Dermacea</td><td>441205</td><td></td></tr><tr><td>滅菌手袋</td><td>Cardinal Health</td><td>2D7203I</td><td></td></tr><tr><td>PE 90 チュービング</td><td>BD Biosciences</td><td>427420</td><td></td></tr><tr><td>20 ml シリンジ</td><td>BD Biosciences</td><td>301625</td><td></td></tr><tr><td>6-0 Prolene 縫合糸</td><td>Ethicon Inc.</td><td>8706H</td><td></td></tr><tr><td>2-0 シルク縫合糸</td><td>Ethicon Inc.</td><td>K873H</td><td></td></tr><tr><td>ペントバルビタールナトリウム注射液</td><td>OVATION Pharmaceuticals</td><td>NDC 67386-501-55</td><td></td></tr><tr><td>ポビドンヨード</td><td>NOVAPLUS</td><td>V10-8204</td><td></td></tr><tr><td>ブプレノルフィン</td><td>Pharmaceuticals Inc.</td><td>NDC 12496-0757-1</td><td></td></tr></tbody></table>

ラットにおける急性心筋梗塞

Acute Myocardial Infarction in Rats

米国（ハント）の死因をリードする心不全で、生物医学研究は、心血管疾患の治療を進めるための基本です。このような心不全と同様に（ゴールドマンとTarnavski）心肥大や心不全を誘発する圧力負荷（横大動脈狭窄）を、誘導心筋梗塞（MI）および虚血再灌流（IR）のような人間の心疾患を模倣する動物モデル、心血管疾患を研究するために有用なモデルがあります。特に、心筋虚血（MI）は、動脈硬化や外科的介入（Thygesen）を経由してのトリートメントなどを制御する特定のリスク要因にもかかわらず、心血管疾患の罹患率および死亡の主要原因である。さらに、心筋の急性損失は梗塞境界領域と、リモートの非梗塞心筋の心室リモデリングを誘導増加荷重条件下で心筋虚血（MI）の結果を以下。筋細胞アポトーシス、ネクローシス及び結果の増加血行動態負荷がLVの拡張、肥大、心室形状の歪み、およびコラーゲンの瘢痕形成を開始する複数の生化学的細胞内シグナル伝達を活性化する。この病理学的リモデリングと増加した壁を正規化するために障害が進行性の拡張、瘢痕にボーダーゾーン心筋の採用、および心筋の収縮機能（すなわち、心不全）で最終的には劣化の結果を強調している。ラットの左室機能不全と心不全の進行は、大規模な心筋梗塞を維持存続し、その後心不全（ゴールド）を開発して患者に観察されたものと似ています。ラットにおける急性心筋梗塞（AMI）モデルは、ヒトの心血管疾患を模倣するために使用されている;特に心不全の治療のための治療戦略の貢献度を評価するために心不全と同様に関連付けられている心臓のシグナル伝達機構を研究するために使用。このレポートに記載されている方法は、急性心筋梗塞（AMI）のラットモデルです。このモデルはまた、再灌流（IR）に続いて急性虚血性心筋症や虚血と呼ばれています。によって組織の再灌流に続いて左前下行枝（LAD）の結紮による虚血の急性、30分間によって誘導されるLADの結紮（Vasilyevとマコーネル）をリリース。変更することにより、心機能およびリモデリングの評価に向けて追加のコメント、このプロトコルは、再灌流の4時間以下のエバンスブルー色素、トリフェニルテトラゾリウムクロライド（TTC）による梗塞サイズと領域アットリスク（AAR）の評価に焦点を当てる再灌流の持続時間は、また表示されます。全体的に、このAMIのラットの動物モデルは、心臓の病態生理学的および生理学的機能に関する心筋梗塞の結果を研究するために有用です。

急性心筋梗塞（AMI）のラットモデルでは、心臓の病態生理学的および生理学的機能に関するMIの結果を研究するのに便利です。

米国において心不全が死因の第1位となっており（Hunt）、心血管系の医学的治療を前進させるためには生物医学研究が不可欠である。

本手順の目的は、心筋虚血およびそれに続く再灌流傷害に対する心筋の即時反応に関連する心臓シグナリング機構を研究するため、ラットにおいて急性心筋梗塞モデルを作製することです。これらの反応には、梗塞サイズ、リスク領域（area at risk）、および細胞死が含まれます。まず、胸部左側の第4肋間を小さく切開し、分離した肋骨を広げることで左心室を露出させます。虚血期間後、左前降枝（LAD）を30分間一時的に結紮します。その後、4時間の再灌流期間を経て、LADの結紮を解除し、心臓の再灌流を行います。心臓を摘出して、梗塞心筋領域のリスク領域および非リスク領域のサイズを検討する前に、LADを再度結紮します。最終的に、梗塞した心筋の組織学的評価の結果は、心不全の治療に向けた治療戦略の探索に利用できます。この手法により、虚血に対する即時反応に関連するシグナル伝達メカニズムや、それに続く梗塞サイズ、リスク領域、細胞死などの深刻な損傷に関する知見を得ることができます。このモデルは、虚血性心疾患の治療に向けた新しい治療戦略を評価するために使用できます。手順のデモンストレーションは、テキサス医療センターの加盟機関であるヒューストン大学薬理・製薬科学科のBradley McConnell博士の研究室に所属する、シニアリサーチアソシエイトとシニアポストドクトラルフェローのXが行います。外科的手順を開始する前に、手術台の表面を70% ethanolで消毒する必要があります。個々の手術を行う前に、すべての手術器具をホットビード滅菌器で滅菌してください。必要な器具は、手術用ハサミ2本、ピンセット1本、曲がりピンセット1本、針持2本、および胸部開展器です。恒温ブランケットシステムの温度を調整し、動物の体温を37 ± 1 °Cに維持してください。梗塞の大きさは、閉塞時間および体温に依存します。出血に対処できるよう、綿ガーゼとアプリケーターをすぐに使える状態で準備してください。これらの研究では、外見上の視覚的検査、心拍数、呼吸数、体温、および体重の測定による身体検査に合格した動物のみを使用します。手術の前日に、手術を受ける健康な動物の体重および個体識別特性を記録します。ブプレノルフィンを投与します。処置の全過程を通じてガウンと手袋を着用し、個々の手術ごとに手袋を交換しなければなりません。まずラットに麻酔をかけ、頸部および胸部の被毛を丁寧に剃毛して手術部位を準備します。剃毛した部位をベタジン溶液で消毒し、続いて70% ethanolで消毒します。この手順を3回繰り返してください。体温を適切に維持するため、動物をホメオサーミックブランケットシステムに安置します。動物を右側臥位にします。ポリエチレンチューブの端を斜めにカットすることで、喉頭への挿入が容易になります。手術用実体顕微鏡を用いて、気管内チューブ

Research

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Medicine

医学

最小限の侵襲操作によるマウスの心筋梗塞の再現性の高いモデルが記述されています。モデル化が容易に行えるため、高い再現性と生存率を実現しています。したがって、記載されているモデルは、3Rの原則(Replacement(置換)、Refinement(改良)、Reduction(リペアメント)、Refinement(リファインメント)、Reduction(リダクション)の要求に応じて、必要な動物の数を減らします。...

マウスにおける心筋梗塞を誘発する低侵襲手術手順

心筋梗塞(MI)は、心機能の障害だけでなく、心筋梗塞の行動結果に関与する脳領域である扁桃体のアポトーシスも引き起こします。このプロトコルは、MIを誘発する方法、扁桃体組織を採取する方法、およびアポトーシスのマーカーであるカスパーゼ-3活性を測定する方法を説明しています。...

心筋梗塞後の分光分析により測定したラットの扁桃体におけるカスパーゼ-3活性

げっ歯類の心筋梗塞(MI)の死後評価は、染色された心臓切片の梗塞の定量化に基づいています。本稿では、採取したラットの心臓の基部から頂点までの系統的サンプリングと、三色染色された組織切片の画像解析を用いて、梗塞の大きさを定量化する正確な方法を説明します。...

ラットにおける慢性心筋梗塞の組織学的定量

マウスモデルにおける左前下行動脈(LAD)結紮のための信頼性の高い方法を提供します。この方法は、気管内挿管、左側開胸術、胸腔穿刺術など、他の方法に比べて侵襲性が低いです。この方法は、急性心筋梗塞と慢性心筋梗塞(MI)の両方のモデルとして使用できます。...

マウス左前方降順（LAD）冠動脈結紮：心筋梗塞のための改善と簡略化されたモデル

本明細書では、マウスにおける左前皮下冠動脈の永久的なライゲーションを達成する方法を示す外科的処置について説明する。このモデルは、心筋梗塞の病態生理学とそれに付着した生物学的プロセスを調べるために高い関連性がある。...

左前皮下冠動脈の永久的なライゲーションを用いたマウス心筋梗塞モデル

本稿では、低侵襲アプローチを用いてラットの心筋虚血とその後の慢性再灌流を行う効率的な方法を提示する。さらに、ラットの左心室血力学的機能は、心エコー検査および単離された作業心臓法によって評価される。...

ラットの心筋梗塞を誘導する半最小侵襲法と、単離した働く心臓システムによる心機能の評価

適切な麻酔下で、マウスの心臓を肋間腔から外在化し、ほとんどの検査室で容易に入手できる材料を使用して左前下行動脈(LAD)を結紮することにより、心筋梗塞の誘発に成功しました。...

マウスにおける心筋梗塞の誘導のための改良簡便法

ラット心臓の心筋虚血再灌流モデルは、自作リトラクター、ポリ塩化ビニルチューブ、および独自の結び目法を使用することによって改善される。心電図、トリフェニルテトラゾリウムクロリドおよび組織学的染色、ならびに生存率分析の結果は、改善されたモデル群が既存のモデル群よりも高い成功率および生存率を有することを示した。...

心筋虚血および再灌流傷害の改善されたげっ歯類モデル

ゼブラフィッシュは、脊椎動物の心臓再生のメカニズムを研究する貴重なモデルを表しています。ここでは、cryoinjuryを用いた成体ゼブラフィッシュの心臓梗塞の誘導のためのプロトコルを提示します。哺乳類の脳梗塞で観察されたものと同様の心室壁の20％以内の大規模な細胞死では、このメソッドの結果、。...

Cryoinjuryを使用した大人のゼブラフィッシュにおける心筋梗塞の誘発

マウスの心臓のMRIおよびPETイメージングの実行方法について説明します。このプロトコルは、心筋梗塞と心不全のモデルにおける治療効果を評価するように調整されています。...

心筋梗塞マウスモデルにおけるMRIとPET

学ぶラットにおける急性心筋梗塞モデルの作成方法。左前下行枝動脈を結紮して虚血・再灌流障害を誘導し、梗塞サイズやリスク領域、細胞死を評価することで、虚血性心疾患の治療戦略を探索するための重要な知見を得ることができます。

ラットにおける急性心筋梗塞

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