Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by <em>in vivo</em> Electroporation

Onkar S. Dhande; Michael C. Crair

doi:10.3791/2678

によるマウス網膜神経節細胞のトランスフェクション in vivoでエレクトロポレーション

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Neuroscience

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Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

によるマウス網膜神経節細胞のトランスフェクション in vivoでエレクトロポレーション

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05:26 min

April 17, 2011

DOI: 10.3791/2678-v

Onkar S. Dhande^1,2, Michael C. Crair¹

¹Department of Neurobiology,Yale University, ²Program in Developmental Biology,Baylor College of Medicine

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

我々は、実証

次の実験の全体的な目標は、出生後のマウスでin vivoエレクトロポレーションを使用して網膜神経節細胞の単一または小グループをトランスフェクションし、網膜突起の発達を研究することです。これは、眼球を外科的に露出させ、少量の血漿DNA溶液を網膜に直接注入することによって達成されます。第2のステップとして、電極を眼球の注入部位の真上に置き、電気パルスを印加することで、血漿DNAを網膜ニューロンに転写することを可能にする。

次に、所望の年齢で、エレクトロポレーションされた網膜および脳を採取して、トランスフェクションされた網膜神経節細胞を可視化し、それらのCNSへのそれらの投射結果が得られ、標識された網膜神経節細胞の樹状突起および軸索ARBの両方の蛍光標識がそれらの種々の皮質下標的構造において示される。この技術が子宮内網膜エレクトロポレーションなどの既存の方法よりも優れている主な利点は、この技術が侵襲性が低く、視交叉での交差などの初期の軸索誘導イベントを妨げないことです。また、出生後のマウスの小さな集団または単一の網膜神経節細胞を、正確な空間的および時間的制御で標識することもできます。

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