Name: ネズミ鞭虫感染症：腸内のタイプ2免疫と炎症のモデル (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-05-24T12:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 5 s
Description: 学ぶ Trichuris muris感染モデルによる腸内タイプ2免疫応答の解析方法。マウスを用いたTh1/Th2応答の比較と免疫メカニズムの解明に役立つ技術を紹介します。

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この作品は、カナダ衛生研究所（MSH - 95368、MOP - 89773とCZのMOP - 106623）とイノベーションのためのカナダ財団によってサポートされていました。 SCMは、消化器ポスドクのCIHR /カナダの協会の受信者です。 CZはCIHR新しい研究者でもある。

1。伝播するネズミ鞭虫の卵<ol><li> （または遺伝的に感受性のあるマウスネズミ鞭虫の卵の新しいバッチを生成するには、20〜30免疫不全マウスに感染（）例：NOD.Cg - Prkdc SCID Il2rg tm1Wjl / SzJ（NSG）または129S6/SvEvTac-Rag2 tm1Fwa（RAG2 - - /）例：。経口胃管栄養法により約300ネズミ鞭虫の卵を6〜8週間経過しているAKR / J）。 </li><li> 32から35日後にCO 2窒息によりマウスを犠牲にする。 </li><li>マウスの腹側を露出させ、70％エタノールで腹部を濡らす。 </li><li>鉗子を使用すると、腹部の皮膚をつかんで、はさみを使って小さな切開を行います。腹部の内容を公開するために皮膚を切り取ります。 </li><li>盲腸と近位大腸を識別し、それらを削除します。 </li><li> 500 U / mlペニシリンおよび500μg/ mlのストレプトマイシン（P / S）とダルベッコ改変イーグル培地（DMEM）を含む10cmペトリ皿に盲腸と近位大腸に置きます。ルーメンとワームを公開するオープンな盲腸を切る。リン酸のビーカーに鉗子の場所の盲腸を使用して、緩衝食塩水（PBS）と糞を除去するために振とうする。 </li><li>ペトリ皿に盲腸を返し、ゆっくりとワームを引き出し、DMEM + P / Sの5mlのを含む6ウェルプレートのウェルに配置滑らかな曲面鉗子（Roboz RS - 5047）を使用して</li><li>マウスのすべてに対してこのプロセスを繰り返します。 </li><li> 37℃湿度とインキュベートを維持するために湿らせたペーパータオルで4時間のためのCでタッパーウェアの容器で6ウェルプレートを置く。 </li><li> 4時間は滑らかな曲面鉗子を使用してワームを削除し、5mLのDMEM + P / Sを含む6ウェルプレートの2つの新しい井戸に分割して後15ミリリットルファルコンチューブにオリジナルも、場所の内容を取得する。 4時間の抗原（典型的なタンパク質の収量が20匹あたり10から20ミリグラムであるPBS透析、後の細胞の再刺激のために使用することができる）を再懸濁しますとして3000rpmで取り外しおよび予備清でチューブを回転させて卵を含むオートクレーブした水道水でペレットを。 </li><li> 37℃で一晩戻し、6ウェルプレートを置く。取り外して、ワームを処分。ファルコンチューブ、5分間3000rpmでスピンに井戸の内容を取得する。一晩抗原として上清と予備を削除する（典型的なタンパク質の収量が20匹あたり10から20ミリグラムであるPBS透析、後鞭のAg特異的抗体のアイソタイプELISA法に使用することができる）と懸濁しますのオートクレーブ水道水でペレットを卵を含む。 </li><li> 4時間と一晩卵を結合し、残ったワームを削除するには、70μmストレーナーを通して卵をフィルタリングするには、75 cm 2のフラスコに移す。室温（RT）で6週間のための箔で覆われた暗い場所でフラスコをしてください。 </li><li>オートクレーブした水道水に卵を洗うと50μlの50現実的な卵で懸濁します。これを行うには、〜50ミリリットル滅菌水道水で5分間懸濁し、3000 rpmで卵を遠心する。スライドガラス上に50μlの卵と場所を削除します。 40倍の倍率を使用すると、50μlの実行可能な孵化卵の数を数えます。 50μlの50実行可能な卵を与えるために卵を希釈する。実行可能な卵のイメージのためにコッパーとマンスフィールド16でスタディを参照してください。 </li></ol> 2。 ネズミ鞭虫卵（200卵/マウス）と実験用マウスの急性感染<ol><li>徹底的に再懸卵とは、マウスの数を治療するために十分なボリュームを削除してX 2（例えば10匹に対して200μlのX線写真を撮る10匹× 2 = 4卵のMLS）と14mlのスナップキャップチューブに配置。 </li><li>ミックスに14mlのスナップキャップチューブを反転。適切なサイズの餌針で1mlのシリンジ（25グラムのマウスを、私たちは18ゲージ1 1 / 2を使用する"針）に卵液200μlを立ち上げます。片方の手の首筋には、マウスや他の手を使っての強制経口投与による卵の管理。 </li><li> 21日待ってください。 </li></ol> 3。実験的な収穫<ol><li> 21日目にCO 2を使用してマウスを生け贄に捧げる。 </li><li>心臓穿刺によりマウスから血液を収集し、非ヘパリンシリンジで、そして4℃で保存します。次の日は、-20℃で血清と凍結を分離血清は、ELISAによって鞭特異IgGをおよびIgEの検出に用いることができる。 </li><li>マウスの腹側を露出させ、70％エタノールで腹部を濡らす。 </li><li>鉗子を使用すると、腹部の皮膚をつかんで、はさみを使って小さな切開を行います。皮膚や腹部の内容を公開するために、基礎となる膜を切り取ります。 </li><li>小腸、盲腸および結腸を識別します。ピンセットで盲腸を取得し、腹腔から引き出します。鉗子の別のペアで腸間膜リンパ節（mLNs）を公開し、右に小腸を押してください。メディアの2 MLSを含む15 50mlファルコンの腸と場所にカットしないように注意しながらmLNsを削除します。これらは、必要なら、ELISAおよび細胞内のfでサイトカインの解析のための72時間処理し、in vitro（1μg/ mlのαCD3/CD28付きまたは50μg/ml4H 鞭銀の24ウェルプレートに1 mlの4 × 10 6個 / ml）で再刺激することができますローサイトメトリー。 </li><li>盲腸と大腸を切り取る。 </li><li>鉗子を使用して、2 mlのAxygenチューブの遠位結腸と場所から糞を押し出す。 -20℃で凍結糞は、レジスチン様分子-β（RELM -β）の発現のためのウェスタンブロットによって分析することができます。 </li><li>盲腸（〜0.5 cm）の先端を取り外します。糞便を削除するにはピンセットで盲腸の先端を保持し、PBSはペトリ皿に3 mlのシリンジと22ゲージの針を使用して洗い流してください。 5ミリリットルファルコンのスナップキャップチューブに新鮮な4％パラホルムアルデヒドで場所。 4℃で保存します。これらはパラフィン包埋、切片と組織学的分析のためのスライド上にマウントすることができます。 </li><li> RNAのための近位結腸の一部（〜1 cm）を取り外します。 500μlのRNAlater中で2ml Axygenチューブにサンプルを置く。 4℃で保存します。これらのサンプルは、定量PCRによるmRNAの発現について分析することができる。 </li><li> -20℃でラベルされたペトリ皿や凍結で盲腸の残りの部分を置き</li></ol> 4。盲腸のネズミ鞭虫ワームの列挙<ol><li> 〜5 mlの水を含むペトリ皿で​​冷凍し、場所から盲腸を削除します。 </li><li>はさみを使用して、内腔を公開するオープンな盲腸を切る。 </li><li>鉗子で盲腸を持ち、精力的に糞便の大半を除去するために盲腸を振る。 </li><li>水を含むと優しくIECSの基盤となる組織を掻き滑らかな曲面鉗子を使用して別のシャーレに盲腸を転送する。 </li><li>水を含む新しいペトリ皿に盲腸を移し、精力的に小さい部分にティッシュをリッピング、ピンセットで残りの組織を削る。 </li><li>シャーレのすべての3でワームのすべてをカウントする解剖顕微鏡を使用してください。このワームは、同じワームを確実にするために皿からそれを削除見つけるの倍カウントされません。ワームが損傷している場合（すなわち半分に壊れて）正確なカウントを取得する唯一の厚いまたは薄い端を数える。 </li></ol> 5。代表的な結果 ネズミ鞭虫の感染モデルでは、研究者が寄生虫の負担と全身免疫応答だけでなく、組織学的に調べるために遠位の盲腸内の炎症反応を定量化することができます。収穫盲腸の内腔が露出されると、 鞭のワームは、解剖顕微鏡（図1A - B）を使用して列挙することができます。 鞭への免疫のパラメーターにも影響を受けやすい動物に抵抗性動物のIgG1の（Th2型の免疫に関連する）、およびIgG2a（Th1型の免疫に関連する）に切り替える抗体のアイソタイプ（図1C）が含まれています。杯細胞特異的タンパク質レジスチン様分子-β（RELM -β）の発現は、 鞭のクリアランスに関連付けられており、ウェスタンブロット解析（図2）で検出可能です。盲腸の先端部分は、杯細胞の応答と感染症（図3）に対応して腸の炎症の程度を評価するために過ヨウ素酸シッフ（PAS）で染色することができます。 <img src="/files/ftp_upload/2774/2774fig1.jpg" alt="図1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図1"> 図1。 ネズミ鞭虫への耐性の定量化 。 （A）抵抗性（B6）マウスは、21日後に感染により鞭のムリスを追放。これとは対照的に、影響を受けやすい（AKR / J）マウスは、寄生虫の確立で、その結果、 鞭で慢性的に感染する。各バーは平均±グループごとに4-8のSEMは、動物を表しています。 （B）ワームは、解剖顕微鏡を使ってカウントされます。トップパネルが単独でワームを示し、下部パネルには、IECSと糞の存在下でワームを示しています。 （C） 鞭 -特異的IgG2a力価は、排泄の鞭の抗原（O / N銀、5μgの/でコーティングしたプレートに希釈した血清のELISA（1:2希釈、1:20希釈から始まると1:2560で終わる）によって決定されますml）を。感受性のAKR / Jマウスは抵抗性B6マウスよりも鞭特異的血清IgG2aの特に高いレベルを持っている。 <img src="/files/ftp_upload/2774/2774fig2.jpg" alt="図2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図2"> 図2。 ネズミ鞭虫のクリアランスは、杯細胞特異的タンパク質のRELM -β7の発現に関連付けられています 。 RELMは、-βの生産は、ウェスタンブロット分析によって鞭感染抵抗性（B6）ではなく、影響を受けやすい（AKR / J）マウス由来の糞から検出することができます。各レーンは、（N）=ナイーブ、（TM）= 21日間の鞭感染したマウスの単一動物の代表です。 <img src="/files/ftp_upload/2774/2774fig3.jpg" alt="図3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図3"> 図3。遠位盲腸以下の鞭の感染症の組織学的検査 。遠位盲腸5-7μmのセクションでは、PASで染色。杯細胞の過形成と粘液産生は、耐性（B6）で明らかですが鞭の感染後のマウスを（AKR / J）影響を受けることはありません。

<ol><li>Cliffe, L. J., Grencis, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Trichuris+muris+system%3A+a+paradigm+of+resistance+and+susceptibility+to+intestinal+nematode+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Adv.+Parasitol%22%5BJournal%5D)">The Trichuris muris system: a paradigm of resistance and susceptibility to intestinal nematode infection.</a> Adv. Parasitol. 57, 255-307 (2004).</li>
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<li>Artis, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+weapons+in+the+war+on+worms%3A+identification+of+putative+mechanisms+of+immune-mediated+expulsion+of+gastrointestinal+nematodes%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Parasitol%22%5BJournal%5D)">New weapons in the war on worms: identification of putative mechanisms of immune-mediated expulsion of gastrointestinal nematodes.</a> Int. J. Parasitol. 36, 723-733 (2006).</li>
<li>Finkelman, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokine+regulation+of+host+defense+against+parasitic+gastrointestinal+nematodes%3A+lessons+from+studies+with+rodent+models%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Cytokine regulation of host defense against parasitic gastrointestinal nematodes: lessons from studies with rodent models.</a> Annu. Rev. Immunol. 15, 505-533 (1997).</li>
<li>Grencis, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enteric+helminth+infection%3A+immunopathology+and+resistance+during+intestinal+nematode+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Enteric helminth infection: immunopathology and resistance during intestinal nematode infection.</a> Chem. Immunol. 66, 41-61 (1997).</li>
<li>Khan, W. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+intestinal+muscle+contraction+by+interleukin-9+%28IL-9%29+or+IL-9+neutralization%3A+correlation+with+worm+expulsion+in+murine+nematode+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Modulation of intestinal muscle contraction by interleukin-9 (IL-9) or IL-9 neutralization: correlation with worm expulsion in murine nematode infections.</a> Infect. Immun. 71, 2430-2438 (2003).</li>
<li>Khan, W. I., Blennerhasset, P., Ma, C., Matthaei, K. I., Collins, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stat6+dependent+goblet+cell+hyperplasia+during+intestinal+nematode+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Parasite+Immunol%22%5BJournal%5D)">Stat6 dependent goblet cell hyperplasia during intestinal nematode infection.</a> Parasite Immunol. 23, 39-42 (2001).</li>
<li>Akiho, H., Blennerhassett, P., Deng, Y., Collins, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+IL-4%2C+IL-13%2C+and+STAT6+in+inflammation-induced+hypercontractility+of+murine+smooth+muscle+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Gastrointest.+Liver+Physiol%22%5BJournal%5D)">Role of IL-4, IL-13, and STAT6 in inflammation-induced hypercontractility of murine smooth muscle cells.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 282, 226-2232 (2002).</li>
<li>Kopper, J. J., Mansfield, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+improved+methods+for+delivery+of+Trichuris+muris+to+the+laboratory+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Parasitol.+Res%22%5BJournal%5D)">Development of improved methods for delivery of Trichuris muris to the laboratory mouse.</a> Parasitol. Res. 107, 1103-1113 (2010).</li>
<li>Bancroft, A. J., Else, K. J., Grencis, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-level+infection+with+Trichuris+muris+significantly+affects+the+polarization+of+the+CD4+response%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Low-level infection with Trichuris muris significantly affects the polarization of the CD4 response.</a> Eur. J. Immunol. 24, 3113-3118 (1994).</li>
</ol>

動物実験は、ブリティッシュコロンビア大学で定められたガイドラインおよび規制に準拠して行った。

このプロトコルは、詳細調査員の必要に応じて変更できます標準の高用量急性ネズミ鞭虫の感染を。例えば、マウスを屠殺することができ、組織は別の日に収穫。マウスが正常に完全なワームの負担が確立されていることを決定するために、それらはすべてマウスでは約200ワームの重荷を運ぶ必要のある時点で、14日目に犠牲にすることができます。マウスはまた、検出されたワームが成熟に達しているし、その寿命の間にホストにとどまると32日間感染することができます。さらに、プロトコルは、慢性的なネズミ鞭虫の感染をモデルに適応させることができます。そのためには、投与卵の用量は低用量の感染症（約30卵）に調整することができます。この投与量で、通常は抵抗性のマウスは、保護のTh2応答を誘導するために失敗するのではなく、Th1反応を生成し、約20ワーム17の負担を維持する。 他の感染症のモデルに比べネズミ鞭虫の感染モデルの利点の一つは、一般的に感染したマウスは、任意の罹患率や死亡率を示さないことです。研究者は注意する必要のある実験結果に影響を及ぼす...

<table border="1"><tbody><tr><th>試薬の名前</th><th>会社</th><th>カタログ番号</th><th>コメント</th></tr><tr><td>動物給餌針（18 × 1 ½&quot;） </td><td>ポッパー</td><td> 7912 </td><td></td></tr><tr><td>滑らかな曲面鉗子</td><td> Roboz </td><td> RS - 5047 </td><td></td></tr><tr><td> DMEM </td><td>ギブコ</td><td> 11965 </td><td></td></tr><tr><td> NOD.Cg - Prkdc SCID Il2r gtm1Wjl / SzJ（NSG） </td><td>ジャクソン研究所</td><td> 005557 </td><td>これらは我々が使用したマウスは、しかし、いかなる免疫不全マウスや感受性株は動作するはずです。 </td></tr><tr><td> RNAlaterは</td><td>キアゲン</td><td> 76104 </td><td></td></tr><tr><td> 2 mlのチューブ</td><td> Axygen </td><td> MCT - 200 - C </td><td></td></tr><tr><td> 15 mlチューブ</td><td>ファルコン</td><td> 352096 </td><td></td></tr><tr><td> 6ウェルプレート</td><td>ファルコン</td><td> 353046 </td><td></td></tr><tr><td>パラホルムアルデヒド</td><td>電子顕微鏡の科学</td><td> 15710 </td><td></td></tr><tr><td> α-RELMβ抗体</td><td>ぺプロテック株式会社</td><td> 0694270Rb </td><td></td></tr></tbody></table>

ネズミ鞭虫感染症：腸内のタイプ2免疫と炎症のモデル

Trichuris muris Infection: A Model of Type 2 Immunity and Inflammation in the Gut

ネズミ鞭虫はネズミの天敵病原体であり、ヒトや家畜1を感染させる鞭の種の生物学的および抗原的に類似しています。感染卵を経口胃管栄養法、遠位小腸で孵化によって与えられる、環境1に線が盲腸の陰窩と近位結腸そのと成熟時に腸上皮細胞（IECS）ワームのリリースの卵に侵入する。このモデルは、コントロールのCD4 + Tヘルパー（Th）細胞の活性化だけでなく、腸上皮の変化その要因を調べるために強力なツールです。このようなC57BL / 6およびBALB / cのような耐近交系、で発生する免疫応答が、Th2の偏サイトカイン（IL - 4、IL - 5およびIL - 13）とTh1細胞関連サイトカイン間（ILワームの追放によって特徴付けられる-12、IL - 18、IFN -γ）遺伝的に感受性のAKR / Jマウス2-6の慢性感染を促進する。 Th2サイトカインが急速IECSの売上高、杯細胞の分化、募集およびワームの追放7-15に関与しているすべてが上皮透過性と平滑筋収縮の変化、を含む腸内微小環境における生理学的変化を促進する。ここでは詳細にその後の実験で使用することができるネズミ鞭虫の卵を伝播するためのプロトコルを。我々はまた、感染後の分析のための提案をサンプル実験的な収穫を提供しています。全体的に、このプロトコルは番目の消化管における傾向と同様にIECSの免疫エフェクター機能に関係する質問に対処するために使用することができるネズミ鞭虫のマウス感染モデルを実行するための基本的なツールを研究者に提供します。

ネズミ鞭虫の感染は、抵抗性のマウスは、保護のTh2応答を生成し、影響を受けやすいマウスは、病理学的Th1応答を生成するTh2の免疫の腸のモデルです。

Trichuris murisはマウスの天然の病原体であり、ヒトや家畜に感染するTrichuris属の種と生物学的および抗原的に類似している1。...

この手順の全体的な目的は、自然な海南虫感染モデルを確立し維持することです。まず、マウスにT. currensの卵を経口投与して感染させます。21日後、感染動物を安楽死させ、血液、腸間膜リンパ節、糞便ペレット、結腸、および盲腸を採取します。これらのサンプルを用いて、tricks. Mirrorsに対する免疫応答を解析できます。血清サンプルはELISAで解析し、TRA特異的抗体を検出します。細胞性免疫応答を解析するために、リンパ節細胞のin vitro再刺激を行うことができます。タンパク質含量の評価には糞便ペレットをウェスタンブロットに供し、結腸のQPCR分析によって遺伝子発現解析を行うことができます。最後に、盲腸の先端部は組織学的検査に使用し、盲腸の残りの部分は感染マウスの虫負荷を測定するために使用できます。最終的に、マウスが trais MOUs 感染に対して耐性を持つか感受性を持つかを示す結果を得ることができ、寄生虫に対する免疫応答を特性評価することが可能です。この手法は、どの因子がTヘルパー細胞の活性化を制御しているか、またどのタンパク質がTH2細胞の分化に必要かといった、免疫学分野における重要な疑問を解決するのに役立ちます。Trauss MOUs の卵は、免疫不全マウスまたは KR などの遺伝的感受性系統で増殖させることができ、感染から 35 日後に安楽死させたマウスから卵を回収します。動物の腹側を露出し、滅菌済みピンセットとハサミを用いて、マウスの腹部をエタノールで洗浄します。腹部の皮膚をつかみ、小さく切開します。腹腔内容物を露出し、盲腸と近位結腸を確認した後、それらを取り除きます。臓器を、ペニシリンおよびストレプトマイシンを添加したDMEMを含む10 centimeterのペトリ皿に移します。次に、ピンセットを用いて盲腸と近位結腸を切開し、管腔と虫体を露出させます。切開した臓器をPBSを含むビーカーに入れ、静かに振盪して糞便を洗い流します。盲腸の洗浄後、それを新しいペトリ皿に移し、曲げ鉗子を用いて慎重に虫体を取り出します。各マウスから回収したすべての虫体を、5 mLの抗生物質添加DMEMが入った6ウェルプレートの1ウェルに移します。6ウェルプレートを湿らせたペーパータオルと共にタッパー容器に入れ、37 °Cで4時間インキュベートし、虫体に産卵させます。このインキュベーションの後、ピンセットを用いて元のウェルから虫を取り出し、DMEMが入った2つの新しいウェルに分けて移します。このように虫を分けることで、ピペットによる卵の回収率を最大化できます。元のウェルから、分泌抗原と卵を含む残りの培地を回収し、15 milliliterのFalconチューブに移します。チューブを3000 RPMで5分間遠心分離します。その後、4時間抗原を含む上清を取り出して保存

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動物モデルは、慢性炎症の発展に貢献宿主および病原体特異的なメカニズムを定義する上で非常に貴重なツールであることが分かっている。ここでは、ローカルおよび全身の部位での炎症の進行を評価するために、ヒト病原体ポルフィロモナス·ジンジバリスとディテールの方法論で経口感染のマウスモデルを記述する。...

局所および全身所における病原体により誘導される慢性炎症のためのマウスモデル

ここでは、同系CD4+CD45RB高T細胞をT細胞およびB細胞欠損レシピエントに養子として移すことにより、マウスに結腸炎症を誘発するプロトコールを提示します。臨床的および組織病理学的特徴は、ヒトの炎症性腸疾患を模倣しています。この方法により、結腸性炎症の開始と疾患の進行の研究が可能になります。...

エフェクターCD4の養子移入によるマウス腸の炎症の誘導<sup&gt; +</sup&gt; CD45RB<sup&gt;高い</sup&gt;免疫不全マウスへのT細胞

この抗原駆動型大腸炎モデルでは、赤色蛍光タンパク質を発現するOT-II CD4+...

T細胞への抗原提示細胞による抗原の提示を研究するための抗原駆動性大腸炎モデルの開発

ここで腸の障壁の違反の後細菌由来化合物の入り口を模倣するためのプロトコルが表示されます。リポ多糖の低致死線量は全身投与後 24...

リポ多糖の腸粘膜バリアー違反の後微生物由来製品の入り口を模倣するマウスに注射

マウスの遠位人工肛門は、人間転換大腸炎、糞便のストリームから除外コロン...

マウスの遠位人工肛門、転用 c57bl/6 マウス大腸炎の新たなモデル

このプロトコルは、トランスムラール炎症および線維症を含むクローン病の主要な病理学的特徴に似たサルモネラ駆動腸線維症のマウスモデルを記述する。この方法は、C57Bl/6遺伝的背景に維持された変異マウスを使用して線維性転帰を変化させる宿主因子を評価するために使用することができる。...

慢性サルモネラ感染誘発性腸線維症

このプロトコールでは、腸内微生物叢抗原特異的T細胞養子移入大腸炎モデルが記載されている。CD4+ T細胞は、CBir1...

免疫不全マウスへのCBir1 TCRトランスジェニックCD4+ T細胞の養子移入による腸管炎症の誘導

当社の詳細なプロトコルは、3D構造とさまざまな細胞タイプでヒトの腸粘膜をシミュレートし、微生物のコロニー形成に応答した免疫応答と細胞機能の詳細な分析を可能にする高度な腸オンチップモデルの作成と使用について概説しています。...

腸粘膜免疫応答を解析するための免疫適格腸内チップモデル

学ぶ Trichuris muris感染モデルによる腸内タイプ2免疫応答の解析方法。マウスを用いたTh1/Th2応答の比較と免疫メカニズムの解明に役立つ技術を紹介します。

ネズミ鞭虫感染症：腸内のタイプ2免疫と炎症のモデル

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