Name: マウスにおけるレーザードップラー流量計の指針と虚血性脳卒中に対する腔内中大脳動脈閉塞（MCAO）モデル (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-05-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 1 s
Description: 学ぶマウス虚血性脳卒中のMCAOモデルとレーザードップラー流量計の応用。Longa法による外頸動脈アプローチで共通頸動脈を温存し、脳血流モニタリングと再灌流を可能にする再現性の高い実験手法です。

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このプロトコルは、動物実験によって承認され、フロリダの大学で委員会（IACUC）を使用して、"実験動物のケアの原理"（NIH出版番号86から23まで、1985年改訂）に準拠していますれました。 1。材料<ol><li>動物：手術の時に20〜26グラムの雄C57BL / 6マウス（ハーランラボラトリーズ、インディアナポリス、インディアナ州、米国）。 </li><li>麻酔： <ol><li>麻酔器：VetEquipの吸入麻酔システム（VetEquip社、プレザントン、カリフォルニア州、米国）。 </li><li>吸入麻酔：イソフルラン（バクスターの医薬品、ディアフィールド、イリノイ州）。 </li></ol></li><li>手術器具：SuperCutアイリスはさみ、ストレート（世界の精密機器、（株）、サラソタ、フロリダ州、米国）、Vannasマイクロシザー構造により、ストレート（世界の精密機器、（株）、サラソタ、フロリダ州、米国）、デュモン鉗子（ファインチップ、 45 °曲げのヒント、世界の精密機器、（株）、サラソタ、フロリダ州、米国）、バイポーラ凝固装置（高周波デシケーター900、世界の精密機器、（株）、サラソタ、フロリダ州、米国）、マイクロ血管クリップ（世界の精密機器、 （株）、サラソタ、フロリダ州、米国） </li><li>外科電源：滅菌綿のヒント、ワイプ、ガーゼスポンジ、縫合糸（7-0絹縫合、エチコン社、サマービル、ニュージャージー州、米国）、組織接着剤（Vetbond、3M社、セントポール、ミネソタ州、米国）、手術スクラブ：Bethadine、70％エタノール、および生理食塩水0.9％滅菌、眼軟膏（Puralube獣医軟膏、Pharmaderm、メルヴィル、ニューヨーク州、米国）。 </li><li> MCAOのための咬合縫合の準備： <ol><li> MCA閉塞のためのフィラメント：7から0まで外科ナイロンモノフィラメント縫合糸（エチコン社、サマービル、ニュージャージー州、米国）。 </li><li>縫合糸の先端（熱焼灼装置、世界の精密機器、（株）、サラソタ、フロリダ州）を平滑化するための熱源。 </li><li>液状シリコーンゴム（シリコーンRTV接着剤、世界精密機器、（株）、サラソタ、フロリダ州、米国）。 </li></ol></li><li>顕微鏡を解剖/外科（ライカの実体顕微鏡MZ6）。 <ol><li>光ファイバー照明（光ファイバー照明FO1 - 150、TechniQuip社、リバモア、CA、米国）。 </li></ol></li><li>レーザードップラーフローメトリー（PeriFluxシステム5000、Perimed、ストックホルム、スウェーデン）。 <ol><li>フレキシブルマイクロチップ（MT B500 - 0ストレートマイクロチップ、Perimed、ストックホルム、スウェーデン） </li></ol></li><li>温度パラメータ： <ol><li>直腸温度のモニター（BAT - 12、世界の精密機器、（株）、サラソタ、フロリダ州）。 </li><li>サーマルブランケット（T / PUMP、TP600、Gaymar、NY、米国）。 </li></ol></li><li>染色とボリュームの梗塞の定量的測定： <ol><li> 2％溶液2,3,5 - 塩化トリフェニルテトラゾリウム（2％TTC、シグマ - アルドリッチ社、セントルイス、MO、米国）。 </li><li>マウス脳行列スライサ​​ー（Zivic - ミラーラボ。、（株）、アリソンパーク、PA、米国）。 </li><li>デジタルカメラ（V1253、コダック（株）、ロチェスター、NY、米国）。 </li><li>画像Jソフトウェア（ImageJの1.42qソフトウェア、米国国立衛生研究所、ベセスダ、MA、米国）。 </li></ol></li></ol> 2。術前のステップ<ol><li>手術前に、マウスは、水とげっ歯類の餌への無料アクセスと12：12 /暗サイクル下で飼育されています。 </li><li>先端径、0.20〜0.25ミリメートル; MCAO用縫合糸は、（7-0それは乾燥させること、液状シリコーンゴムとその先端から縫合シャフトの熱とコーティング3〜4ミリメートルと縫合の先端の1 - 2mmを鈍化することによって調製されるコーティングは、長さは、3〜4ミリメートル、縫合糸の長さは11〜13ミリメートル）。無菌性は、前述の手順のすべてで保存されるべきである。 </li><li>フェイスマスクを介してO 2、70％N 2 Oガスの混合物をマウスを秤量した後、麻酔が誘導チャンバ内のイソフルラン4％に誘導され、30％のイソフルラン1.5〜2パーセントと手順の間に維持した。 </li><li>マウスは、温度制御された操作面（​​サーマルブランケット）に横たわっているガーゼのパッド上に腹臥位に配置され、頭の毛を剃毛しています。 </li><li>潤滑剤の眼軟膏は、両眼に適用され、まぶたは、手術過程で目の乾燥を防ぐために閉鎖されています。 </li><li>正中切開（1 cm）を[後]頭骨と皮膚が貼っ柔軟なマイクロチップを（; 0.5ミリメートルの直径MT B500 - 0ストレートマイクロチップ）に横方向に引っ張られるために上項線から頭蓋冠を覆う皮膚に行われます。マイクロチップは、レーザードップラーフローメトリーによってMCA領域の血流を監視するために右頭頂葉の頭蓋骨の表面（ブレグマの後外側1mmと5mm）をするために垂直に配置されます。 </li><li>動物を仰臥位になっている前に、柔軟なマイクロチップがしっかりと頭蓋骨に接続されていることを確認してください。動物の首は柔らかいパッド上に配置され、その鼻は、麻酔装置のノーズコーンに保持されます。これにより、柔軟なマイクロチップのための十分なスペースを持つことになります。 </li><li>直腸温度プローブは、± 0.5 37℃の一定の動物のコア温度を維持するために挿入される</li><li>前足と後足の両方は、オペレーティングプラットフォームの表面にテープで固定されており、尾は直腸チューブにテープで固定されています。 </li> &lt;/ OL&gt; 3。 MCA閉塞の手術： <ol><li>手術用顕微鏡下では、正中首の切開を穏やかたるんだ皮膚を持ち上げて、胸骨柄と顎の間にはさみで作られています。 </li><li>対になった基礎と顎下腺はぶっきらぼうにその場に残された左腺で、分かれています。右顎下腺は頭側で引っ込めと胸鎖乳突筋と一緒に固定されています。 </li><li>頸動脈鞘をカバーする肩甲舌骨筋の露出部門は慎重にピックアップして分かれています。 </li><li>右総頸動脈（CCA）は慎重に迷走神経とその鞘（CCAの横にある）から分離し、分離されています。 </li><li> 以下、MCA閉塞を実行するために頻繁に使用されている2外科的方法は発散していく。 </li></ol>小泉の4方式<ol class="lroman" type="i"><li>三緩い襟縫合糸（7-0絹）は、右CCAの周りに用意されています。 </li><li>外頚動脈（ECA）は、識別分離、および焼灼（2〜3ミリメートル分岐から遠位）されています。それは、その後、マイクロはさみで分割することができます。焼灼部位の不注意な周辺機器の破損を避けるために、電力は、ノブを使用して1に設定する必要があります。これは、すべてのcauterizationsに対して一貫しています。 </li><li>十分な張力が血流（永久結紮）を閉塞するためにCCAの最も近位の襟の縫合糸に適用されます。流れの閉塞は、ベースライン皮質血流値の〜50％の低下によって検証されます。 </li><li>その後、容器のクリップは、動脈切開時の逆流を防ぐためにちょうどCCAの分岐の前に配置されます。 </li><li>動脈切開は、近位結紮縫合糸とマイクロシザー（近いライゲーションまで）とCCAでの船舶のクリップの間で行われます。 </li><li>熱平滑シリコンでコーティングされた7〜0ナイロン縫合糸は、動脈切開を介して導入し、それが血管クリップに達するまで進んでいる。 2残りの緩い襟の縫合はやさしく動脈壁のトラウマがない状態で、CCAを通して流れの漏れをバック避けるために、動脈切開し、血管クリップの間にCCAの周りに締められて、その後、容器のクリップが撤回される。 </li></ol>ガの3方式<ol class="lalpha" type="a"><li> ECAは、識別（舌と上顎動脈にその分岐の近くに）可能な限り解剖し、焼灼（1に設定電源付き）、およびマイクロハサミで分割されています。 </li><li>二つの緩い襟の縫合糸（7-0絹）もCCAの分岐上に近ICAの周りに用意されています。 </li><li> CCAは、一時的に血管クリップで閉じられます。流れの閉塞は、ベースライン皮質血流値の〜50％の低下によって検証されます。 </li><li>その後、ICAは、一時的に動脈切開時の逆流を避けるために2つの緩い襟縫合上記血管クリップで閉じられます。 </li><li>動脈切開は切り株に反映ECAの近くにマイクロはさみを使用して実行されます。 </li><li>それはICAの適用船舶のクリップに達するまで熱平滑シリコンでコーティングされた7〜0ナイロン縫合糸は、ECAと高度に動脈切開を介して導入される。近位ICAの2緩い襟の縫合糸が優しく動脈壁をトラウマに十分注意を払って、ICAを通して逆流の血流を避けるために、近位ICAの周りに締められて、その後、容器のクリップが撤回される。 </li></ol>手順の残りの部分は主に収束する。 <ol><li>軽度の抵抗が感じられるまで遮蔽縫合糸は徐々に頭蓋底に向かって内頸動脈（ICA）によって進められている。ベースラインからの相対割合（= 80％）などの脳血流値の同時低下はレーザードップラーフローメトリーによって確認される。 2カラー縫合糸は、挿入されたフィラメントの周りに締められている。 </li><li>一過性脳虚血実験では、遮蔽縫合糸は、45分後に静かに撤回されている。この時点は、種々の実験目的のために変更することができます。 </li><li>縫合糸のフィラメントを撤回した後、動脈切開部位は手術後の出血を避けるために閉じている。小泉首相の手法では、これはしっかりとCCAの周り襟縫合糸を締めて行います。ガの技法では、ECAのベースにある動脈切開部位を焼灼され、その後、近位ICAで襟縫合糸が緩んと頸動脈の流れを復元するために削除されます。 </li><li>切開を閉じるには、顎下腺およびSCMは、術野を介して配置されます。傷のエッジは、子宮頸部の組織接着剤と頭皮の領域で近似されています。また、吸収性縫合糸または金属主食は、動物の長期生存が意図され、特に傷を閉じるために使用することができる。 </li><li>切開の閉鎖後、動物は、ボリュームの補充として皮下1ミリリットル温かい生理食塩水を受け取ります。適切な鎮痛薬の投与量（0.05〜0.1 mg / kgでつまりブプレノルフィン）は、回復期間中に動物の痛みや不快感を最小限に抑えるために使用する必要があります。魂lが手術室から削除され、柔らかい食べ物と水は自由に、簡単にアクセスして、低体温を防ぐために、暖かいリカバリ領域/ケージに入れています。 </li></ol> 4。術後神経学的評価動物は合計意識を回復した後で3を次のように、神経学的欠損は、単純な尺度（5点尺度）で評価することができます。 <ol start="0"><li>観察可能な赤字ない</li><li>反対側の前足（軽度の局所神経学的赤字）を拡張するために失敗</li><li>梗塞に反対方向に周回し（中等度の神経学的局所の赤字） </li><li>梗塞に対側方向に立（重篤な神経学的局所の赤字） </li><li>自発的な動きのない意識レベルの低下</li></ol> 5。脳梗塞体積の染色と定量的測定<ol><li> MCAの再灌流の24時間後、生き残ったマウスは、4％isofloraneで深く麻酔を秤量し、そして承認されたプロトコールにしたがって犠牲に。 </li><li>脳には、慎重に除去し、マウス脳マトリックススライサーに配置され、全体の大脳は、2mm間隔でcoronally切片です。 </li><li>セクションを2％に浸漬されているリン酸塩のTTCは、37℃緩衝食塩水（PBS）℃で20分間。 TTC染色した後、梗塞領域は赤レンガ（実行可能な）組織（図1）に隣接する白（未染色）組織として示されています。 </li><li>連続切片画像のJのプログラムを使って測定されるデジタルカメラや梗塞の面積を使用して撮影している。 </li><li>梗塞の領域（白、未染色）、同側半球の領域（白と赤レンガ、ステンドグラス）、および対側半球（赤レンガ、ステンドグラス）の面積は、セクションごとに測定されます。ボリュームは、すべてのセクションでは代表的な分野を合計し、スライスの厚さを乗じて計算されます。浮腫のために修正した後、梗塞の体積はFOLLOWS 9として計算されます。 訂正梗塞体積（CIV）、％= [対側半球の体積- （同側半球の体積-梗塞体積）] /対側半球の体積× 100 </li></ol> 6。代表的な結果一過性脳虚血を確立するために、左CCAを介してMCAの閉塞および再潅流後、動物を屠殺していると、そのcoronally切片脳は梗塞（図1）の量を評価するためにTTCで染色されています。 <img src="files/ftp_upload/2879/2879fig1.jpg" alt="図1"> MCA閉塞を受けたマウスから図1。TTC染色シリアル冠状脳切片（2mm）を。 </ol>

<ol><li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+on+stroke+prevention%2C+diagnosis%2C+and+therapy.+Report+of+the+WHO+Task+Force+on+Stroke+and+other+Cerebrovascular+Disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%3B+a+journal+of+cerebral+circulation%22%5BJournal%5D)">Recommendations on stroke prevention, diagnosis, and therapy. Report of the WHO Task Force on Stroke and other Cerebrovascular Disorders.</a> Stroke; a journal of cerebral circulation. 20, 1407-1431 (1989).</li>
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<li>Kapinya, K. J., Prass, K., Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isoflurane+induced+prolonged+protection+against+cerebral+ischemia+in+mice%3A+a+redox+sensitive+mechanism%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreport%22%5BJournal%5D)">Isoflurane induced prolonged protection against cerebral ischemia in mice: a redox sensitive mechanism?</a> Neuroreport. 13, 1431-1435 (2002).</li>
</ol>

著者らは、利害の衝突がないことを宣言します。

MCAOモデルは、マウスの種で脳虚血を複製する確立されたモデルです。このモデルは、最初にラットで使用され、その後マウスに適応されました。血液脳関門透過性と頭蓋内圧上の手術操作の影響を排除するクレイニエクトミを避けることがこの手法の利点です。しかし、このような歪関連の相違点10、閉塞6、体温12、麻酔13の縫合ヒント11、持続時間の大きさ、およびその他の要因など、多くの変数は、このモデルで梗塞体積の矛盾につながることができます。 言及を保証する特定の技術的な詳細があります。 <ol><li>コー​​ティング縫合糸の端が減少穿孔のリスクがMCAを閉塞するため、スムーズで扱いやすい縫合が作成されます。 </li><li>それが誤って襟縫合に限定されないように繊細に隣接する動脈から迷走神経を分離して固定します。吸蔵縫合を昇順ながら、動脈切開を介して逆行性出血を避けるために2つのカラー糸を使用し、動脈壁をtraumatizing避けるために、穏やかにそれらを締めてください。 </li><li>翼口蓋動脈は、CCAの分...

<table border="1"><tbody><tr><th>試薬の名前</th><th>タイプ</th><th>会社</th><th>カタログ番号</th><th>コメント（省略可能） </th></tr><tr><td>雄のC57BL / 6マウス</td><td>動物</td><td>ハーランラボラトリーズ、インディアナポリス、IN、アメリカ合衆国</td><td></td><td> 20から26 GRS </td></tr><tr><td>解剖顕微鏡</td><td>顕微鏡</td><td>ライカ実体顕微鏡MZ6 </td><td></td><td> 6.3:1ズーム</td></tr><tr><td>光ファイバー照明</td><td>照明器</td><td> TechniQuip（株）、リバモア、CA、アメリカ合衆国</td><td></td><td> FO1 - 150 </td></tr><tr><td>イソフルレン</td><td>麻酔</td><td>バクスターの医薬品、ディアフィールド、イリノイ州</td><td> 1001936060 </td><td></td></tr><tr><td>ストレートSuperCutアイリスはさみ、 </td><td>手術道具</td><td>世界プレシジョンインスツルメンツ社、サラソタ、フロリダ州、米国</td><td> 14218 </td><td></td></tr><tr><td> Vannasストレート、マイクロはさみ</td><td>手術道具</td><td>世界プレシジョンインスツルメンツ社、サラソタ、フロリダ州、米国</td><td> 14003 </td><td></td></tr><tr><td>デュモンファインチップの鉗子</td><td>手術道具</td><td>世界プレシジョンインスツルメンツ社、サラソタ、フロリダ州、米国</td><td> 503290 </td><td></td></tr><tr><td>容器のクリップ</td><td>手術道具</td><td>世界プレシジョンインスツルメンツ社、サラソタ、フロリダ州、米国</td><td> 14120 </td><td></td></tr><tr><td>高周波デシケーター900 </td><td>手術道具</td><td>世界プレシジョンインスツルメンツ社、サラソタ、フロリダ州、米国</td><td> 500397 </td><td></td></tr><tr><td> 7から0まで外科ナイロンモノフィラメント縫合糸</td><td>縫合</td><td>エチコン、（株）、サマービル、ニュージャージー州、米国</td><td> 1647G </td><td>閉塞のための縫合</td></tr><tr><td> 7から0まで外科シルク縫合糸</td><td>縫合</td><td>エチコン、（株）、サマービル、ニュージャージー州、米国</td><td> 7733G </td><td>ライゲーションのための縫合</td></tr><tr><td>シリコーンRTV接着剤</td><td>シリコーンゴム</td><td>世界プレシジョンインスツルメンツ社、サラソタ、フロリダ州、米国</td><td> 1571 </td><td></td></tr><tr><td> Vetbond </td><td>組織接着剤</td><td> 3M社、セントポール、MN、アメリカ合衆国</td><td> 70200746587 </td><td></td></tr><tr><td> Puralubeの獣医の軟膏</td><td>眼軟膏</td><td> Pharmaderm、メルヴィル、ニューヨーク、アメリカ合衆国</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ブプレノルフィンhydrochlorode </td><td>鎮痛薬</td><td>ホスピーラ社、レイクフォレスト、IL、アメリカ合衆国</td><td> NDC 0409-2012-32 </td><td></td></tr><tr><td>熱焼灼ユニット</td><td></td><td>世界プレシジョンインスツルメンツ社、サラソタ、フロリダ州、米国</td><td> 501292 </td><td></td></tr><tr><td> PeriFluxシステム5000 </td><td> TCD流量測定法</td><td> Perimed、ストックホルム、Sweeden </td><td></td><td></td></tr><tr><td> BAT - 12 </td><td>直腸温度計</td><td>世界プレシジョンインスツルメンツ社、サラソタ、フロリダ州、米国</td><td> BAT - 12R </td><td></td></tr><tr><td> T / PUMP、TP600 </td><td>サーマルブランケット</td><td> Gaymar、NY、アメリカ合衆国</td><td></td><td></td></tr><tr><td> 2,3,5 - 塩化トリフェニルテトラゾリウム</td><td>試薬</td><td>シグマ - アルドリッチ社、セントルイス、MO、アメリカ合衆国</td><td> T8877 </td><td></td></tr><tr><td>マウス脳行列スライサ​​ー</td><td>脳スライサー</td><td> Zivic - ミラーラボ。、（株）、アリソンパーク、PA、アメリカ合衆国</td><td> BSMAS001 - 1 </td><td></td></tr></tbody></table>

マウスにおけるレーザードップラー流量計の指針と虚血性脳卒中に対する腔内中大脳動脈閉塞（mcao）モデル

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

ストロークは、2009年1,2年に米国で近く700億ドルの推定コストで、死因の第3位と世界で身体障害の主要な原因です。腔内中大脳動脈閉塞（MCAO）モデルは、ラットではこのインパクトのある人間の病理をシミュレートするために1986年に小泉4で開発されました。 MCAOの方法の変更は、後にガ3で発表された。両方の技術が広く虚血性脳卒中との潜在的な治療法5から生じる脳損傷の分子機構を同定するために使用されています。ラットのこの比較的非侵襲的方法は、トランスジェニックおよびノックアウト系統6,7を利用するためにマウスで使用するように拡張されています。局所脳虚血モデルを作成するには、腔内縫合糸は、MCAのベースを閉塞するために内頸動脈を介して進められます。後退、一定時間経過後の縫合糸は、自発的な再灌流を模倣しているが、縫合糸はまた、恒久的に保持することができます。このビデオでは、段階的にマウスの腸管内MCAO手順を実行するための2つの主要な方法をデモンストレーションだけでなく、潜在的な欠点や落とし穴のための洞察を提供する予定。虚血脳組織は、その後、脳梗塞8の程度を評価するために2,3,5 -塩化トリフェニルテトラゾリウム（TTC）で染色されます。

腔内中大脳動脈閉塞（MCAO）モデルは、実験的虚血性脳卒中のモデルの中で最も頻繁に使用されるモデルです。ここでは、レーザードップラーフローメトリー、およびその代表的な結果のガイドで詳細にモデル全体のデモンストレーションを行います。

マウスにおけるレーザードップラー流量計の指針と虚血性脳卒中に対する腔内中大脳動脈閉塞（MCAO）モデル

脳卒中は世界における死因の第3位であり、障害の主要な原因となっており、米国における推定費用は700億ドル近くに達しています。

このビデオ記事では、中大脳動脈閉塞（MCAO）として知られる虚血性脳卒中のマウスモデルを紹介します。コイルを用いた元来のMCA閉塞法では、鈍化した縫合糸を総頸動脈から挿入して中大脳動脈を閉塞させます。この手法では、総頸動脈が永久的に閉塞することになります。Longaによる手法の改良により、外頸動脈経由で中大脳動脈へのアプローチが可能になりました。この手法は、実験的な虚血性脳卒中モデルにおいて、総頸動脈の機能およびその遠位循環を維持します。ラットおよびマウスにおける管内フィラメント法による中大脳動脈閉塞モデルは、ラットで最初に記述されて以来、最も頻繁に用いられているモデルの一つです。初期モデルに対していくつかの改良法が発表されてきましたが、現在はLongaによる改良法が最も著名な変法となっています。このモデルは侵襲性が低く、永続的および一過性の虚血を制御された方法で容易に作製できます。内腔フィラメント法による中大脳動脈閉塞モデルでは、モノフィラメントを内頸動脈に挿入し、中大脳動脈への血流を遮断するまで進めます。このモデルでは、再現性のある中大脳動脈領域の梗塞が誘導され、縫合糸を抜去することで再灌流が可能です。この手法では、縫合糸の直径、シリコンやポリオールリシンのコーティング、あるいはフィラメント自体の挿入長など、多くの特定の要因が梗塞サイズに影響を与えると考えられています。このビデオでは、このモデルの段階的な実施方法に加えて、この手法を用いる際の潜在的なピットフォールや欠点の多くを回避する方法を説明します。MCA閉塞には7.0のナイロンモノフィラメント縫合糸を使用します。ナイロン縫合糸の末端を熱源に近づけて鈍化させます。鈍化した末端は真っ直ぐで滑らかに仕上げ、長さは約1〜2 mmとします。末端を鈍化させた後、縫合糸を全長約11〜13 mmの長さに切断します。縫合糸の鈍端をシリコンに浸し、先端から3〜4 mmまでコーティングして乾燥させます。縫合糸準備のすべての工程は、無菌条件下で行う必要があります。マウスの体重を測定後、導入チャンバー内で4% isof fluorineを用いて麻酔を導入します。マウスを、サーマルブランケットの上に敷いたガーゼパッドの上に腹臥位で配置します。深部体温を37°Cに維持するため、処置中はフェイスマスクを用いて麻酔を維持します。剃毛した頭部をアルコール、ベタジン、そして再度アルコールで洗浄します。bgmaから後方に1 mm、外側に5 mmの位置で皮膚を1 cm切開し、頭蓋冠を露出させます。血流をモニタリングするため、右頭頂骨の表面に垂直に柔軟なマイクロチップを固定します。これはレーザードップラー血流画像法を用いて、MCA領域の血流を測定するためです。動物を仰臥位に戻し、胸骨柄と下顎の間で、はさみを用いて頸部正中切開を行います。対にな

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中大脳動脈の糸状閉塞は、マウスでは虚血性脳卒中を研究するための一般的なモデルです。...

マウスにおけるモデリングのストローク - フィラメントモデルと中大脳動脈閉塞

我々はビデオで腔内モノフィラメントを使用して成体マウスの中大脳動脈閉塞を製造する方法を示しています。我々はまた、2,3,5 -...

中大脳動脈閉塞のマウスモデル

マウスにおける腔内中大脳閉塞モデルは、本明細書に提示されます。脳梗塞の程度は、神経学的スコアとクレジルバイオレット染色は、TTCに代わる染色、並列多くの関心マーカーでテストする大きな利点を提供することによって評価されます。...

腔内MCAOのマウスモデル：クレシルバイオレット染色による脳梗塞の評価

脳虚血の動物モデルは、ストロークの人間の状態をシミュレートするために開発されてきた。このプロトコルは、ラットの虚血性脳卒中のエンドセリン-1（ET-1）誘発中大脳動脈閉塞（MCAO）モデルについて説明します。加えて、重要な考慮事項、利点、およびこのモデルの欠点が議論されている。...

ラットにおけるレーザードップラー血流計の指針と虚血性脳卒中のエンドセリン-1誘発性中大脳動脈閉塞モデル

中大脳動脈閉塞（MCAO）の種々のマウスモデルが広く実験的脳研究において使用される。ここでは、人間の虚血性脳卒中の過半数によって課さ被害に対応する大き​​さの一貫した皮質梗塞を生成し、経頭蓋永久遠位MCAOのモデルを示しています。...

マウスにおけるモデリングのストローク：遠位中大脳動脈の永久的な凝固

脳卒中の病態生理学を理解するためには、信頼性のあるモデルを使用することが重要です。この論文は、マウスにおいて最も頻繁に使用される脳卒中モデルのいずれかを説明する、中大脳動脈閉塞（MCAO）モデルと呼ばれる再潅流と（また腔内フィラメントまたは縫合モデルと呼ばれます）。...

マウスの中大脳動脈閉塞再灌流誘発性の脳卒中のための外科的アプローチ

ここでは、単純な縫合糸とクランプを用いた一過性両側共通頸動脈閉塞によるレチナル虚血のマウスモデルについて述べている。このモデルは、心血管異常によって引き起こされる虚血の病的メカニズムを理解するのに有用である。...

一過性両側性頸動脈閉塞による虚血性筋炎損傷のマウスモデル

中大脳動脈閉塞の異なるモデル(MCAo)は、実験的な脳卒中研究で使用されています。ここでは、外部頸動脈(ECA)を介した一過性MCAoの実験的ストロークモデルについて説明し、これは、自然血栓溶解または治療のために脳血管血栓が除去されるヒトの脳卒中を模倣することを目的とする。...

マウスにおける脳卒中のモデリング:外頸動脈を介した過渡中脳動脈閉塞

このプロトコルは、中型の梗塞と優れた生存率を持つユニークなマウスストロークモデルを示しています。このモデルにより、脳卒中前臨床研究者は虚血期間を延長し、高齢マウスを使用し、長期的な機能的転帰を評価することができます。...

高齢マウスの脳卒中転帰を研究するための修正経頭蓋中大脳動脈閉塞モデル

このプロトコルは中間の大脳の動脈のintraluminal閉塞によってマウスの一時的な焦点の大脳の虚血のモデルを記述する。さらに、磁気共鳴画像法と行動テストを使用した結果評価の例が示されています。...

脳卒中の一過性中大脳動脈閉塞モデル

ここでは、C57BL/6Jマウスの経頭蓋電気凝固術による遠位中大脳動脈閉塞(dMCAO)モデルを確立し、その後の神経学的行動と組織病理学的特徴を評価するためのプロトコルを提示します。...

遠位中動脈閉塞法を用いたマウスにおける急性虚血性脳卒中の誘発

学ぶマウス虚血性脳卒中のMCAOモデルとレーザードップラー流量計の応用。Longa法による外頸動脈アプローチで共通頸動脈を温存し、脳血流モニタリングと再灌流を可能にする再現性の高い実験手法です。

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