診断剖検及びラット及びマウスで選択された組織とサンプル集

この手順の全体的な目標は、基本的なげっ歯類の剖検を行うことです。これは、最初に動物に関する基本情報を記録することによって達成されます。手順の2番目のステップは、内臓を調べることです。

3番目のステップは、臓器や腸間膜リンパ節などのサンプルを収集することです。最終的に、動物の健康状態は、組織病理学または他の技術によって決定することができます。一般的に、剖検を行うことに不慣れな人々は、げっ歯類の解剖学が仕事で学んだため、苦労するでしょう。

これらの方法は、研究コロニー内の動物の健康に関する重要な質問に答えるのに役立ちます。これらの手法を視覚的に示示することは、さまざまな組織の位置や、正常組織と異常組織を区別する方法を学ぶのに時間がかかるため、不可欠です。動物を安楽死させる前に、その歴史に関する情報を収集し、体調、行動、性別、年齢、体重、緊張などの現在の特性を記録します。

この記録は、動物を安楽死させる前に組織を検査する人にとって重要な年齢です。適切な個人用保護具が使用されていることを確認してください。解剖、ボード鉗子、はさみ、容器、固定剤、培地、収集容器のラベルを準備します。

動物を安楽死させた後、その体の状態を評価し、皮膚や被毛の異常、衰弱、脱水症状がないか確認します。また、動物に対する人工的な操作、インプラント、または外科的瘢痕の証拠も探します。次に、解剖顕微鏡を使用して、すべての外部オリフィスを詳細に調べます。

これらには、耳、目、鼻、口、肛門、性器が含まれます。次に、動物を解剖ボードに仰向けで寝かせ、鉗子で皮膚を持ち上げ、はさみを使用して肛門からあごまでの皮膚を切り開きます。次に、皮膚を側面に反射させ、腹壁と胸郭を切開します。

胸郭の両側に横方向に2つの切り込みを入れて、胸部内臓を露出させます。ダイヤフラムをカットします。次に、胸骨の上部を横切って胸郭を取り外します。

次に、露出した胸部と腹部の臓器を調べます。色の変化、異臭、サイズ、違い、臓器の欠落や脱臼を把握します。臓器表面の一貫性を調べ、組織の塊や液体で満たされたポケットに注意してください。

また、どちらのキャビティにも流体が存在することに注意してください。消化管で検査を続けます。腸間膜のリンパ節の肥大または組織腫瘤を調べます。

消化管の内容を説明し、壁の肥厚、腫瘤、または出血がないか注意深く確認してください。腎臓の内部を調べるには、ブレードを使用して、左腎臓の縦断面と右腎臓の断面を正中線の中心から外します。実質に異常がないか確認してください。

次に、男性の泌尿生殖器系を検査します。女性の精嚢、精巣、精巣上体、尿管、および熟膜を特定します。子宮、卵巣、尿管を特定します。

泌尿生殖器系に閉塞、液体ポケット、出血、またはその他の異常がないか調べます。これらの検査が完了したら、さらなる検査のために標的臓器を分離して切除します。通常、心臓、肝臓、腎臓、脾臓は切除時に採取されます。

各臓器を固定剤に浸すか、凍結や免疫組織化学などのこれらの組織を必要とするプロトコルの最初のステップに従って、適切な固定を行います。一般に、組織は10%NBFのような防腐剤に、1つの容量組織に対して20容量の固定剤の割合で沈められます。ラットを扱うときは、鼻の吸引の前に気管支吸引液を採取してください。

まず、頸部から離れた皮下組織の皮膚を反射し、唾液腺と頸部の筋肉組織を露出させます。次に、それらの組織を取り外して気管を露出させます。気管に3ミリメートルの切開を行い、1ミリリットルのサンプリング液をロードしたピペットを四半期ごとに向けられた気管内腔に挿入します。

サンプリング液を気管から肺に3回ゆっくりと洗い流します。次に、サンプリング液を引き出し、ピペットを気管から取り外します。すべての液体がピペットに戻るわけではありません。

したがって、より多くの液体が必要な場合は、このプロセスを繰り返します。マウスでのテスト用。鼻穿刺液または気管支穿刺液のサンプルを採取するには、滅菌されたハサミを使用して鼻咽頭ATUにアクセスします。

側頭下顎関節を切断し、下顎骨を上顎骨から反射させ、鼻咽頭アトゥを露出させて鼻咽喉を拾います。1ミリリットルのサンプリング液を充填したピペットをマウスの鼻咽頭房またはラットの気管内腔に挿入します。ピペットはクランに向けられ、押し込まれるべきです。

そのため、先端が鼻口蓋に接触します。そこに着いたら、サンプリング液をゆっくりと注入します。液体が鼻腔に入ると、鼻口に半月板が形成され、半透明の口腔口蓋からも見えるはずです。

ただし、液体が口から出る場合は、ピペットの向きを変えてください。完全に注入されたら、サンプリング液を鼻腔からピペットに引き出し、次にピペットを取り外します。鉗子で気管をつかむことから始め、鉗子のすぐ上で気管を切り取ります。

次に、気管をゆっくりと上に引っ張り、胸部組織のセット全体が切除できるようになるまで組織の接続を切り取ります。次に、肺を作業台に平らに置き、縫合糸または紐を気管の周りに緩く結びます。結び目を締めないと、針を気管に通すことができなくなります。

次に、シリンジに固定剤を充填し、気管を針に固定しながら針を気管の開口部に挿入します。鉗子を使用して、肺が完全に膨らむまでゆっくりと固定剤で満たします。固定液の量は、動物の年齢、系統、健康状態によって異なります。

膨らませた組織が平らに見える場合、膨らませすぎると、充填された組織から泡状の液体が染み出しますので、気管を囲む縫合材またはひもを締めて、肺から固定剤が逆流するのを防ぎます。次に、膨らませた肺を固定液に入れます。死骸を腹側横臥の清潔な解剖ボードに置き、はさみと鉗子を使用して、子牛の上にある皮膚と筋肉を取り除きます。

次に、小さなハサミを使用して死骸の首を切ります。下部の刃を大孔に挿入し、上向きの動きで子牛の正中線を切り込みます。次に、子牛を引っ張って開いて、鉗子で脳を露出させます。

病理医が頭蓋骨にいる間に脳の一部を切断することを好む場合は、すぐに脳が露出した頭蓋骨を10%NBFに入れます。それ以外の場合は、鉗子または指で鼻の周りの頭をつかみ、頭蓋骨をそっと反転させて、重力が組織が頭蓋骨から落ちるのを助けます。慎重に。嗅葉から始まる脳の外縁に沿ってスライドする曲線鉗子。

同じ鉗子で神経を優しくつまみながら、鉗子を頭蓋骨に沿って小脳に向かってスライドさせ続けます。脳が固定剤に場所を解放すると、腸間膜リンパ節を最初に見つけるために、腸の大きなコミュニケーション型のセカムを見つけます。腸間膜リンパ節は、盲腸に隣接する腸間膜の黄色い卵形または球形の組織の塊です。

それらはしばしば、周囲の腸間膜や脂肪よりもわずかに厚く、食感がしっかりしています。解剖スコープは、最初は組織を区別するのに役立つかもしれませんが、経験を積むと必要なくなります。鉗子とハサミを使用して、腸間膜リンパ節を分離し、培養、PCR、または病理組織学に使用するための保存チューブに移します。

プロトコルを完了した後、病理学者または科学者は、安楽死時の客観的および主観的な状態の書面によるレポートを利用できるようになります。固定前の組織、固定剤内のすべての主要な腹部および胸部臓器、脳および腸間膜リンパ節、および鼻および気管支のサンプルが吸引される前の組織の客観的な説明。一度習得すれば、短縮剖検は30分もかかりません。

この手順を実行するときは、動物とその組織の状態に関する観察を記録することを忘れないでください。このビデオを見た後、灌流肺、腸間膜リンパ節、脳の収集など、完全なげっ歯類剖検を行う方法についてよく理解しているはずです。