皮下ジヒドロテストステロン(DHT)治療:多嚢胞性卵巣症候群(PCOS)のマウスモデル

まず、ペレットを準備するには、事前にカットされたシリコンチューブの一端に医療用接着剤シリコンを注入します。次に、ジヒドロテストステロンまたはDHT結晶粉末をチューブ内にしっかりと詰めます。次に、医療用接着剤シリコンを使用してチューブのもう一方の端をシールします。ペレットは、気泡がなく、両端に同量のシリコンが含まれている必要があります。ペレットを雌マウスに挿入する前に、生理食塩水に入れます。

麻酔をかけたマウスでは、消毒剤を塗った綿棒を使用して、剃った手術領域を洗浄します。首の近くの皮膚を小さく切開します。トロチャーを使用して、マウスの鼻の方向に皮膚の下にトンネルを作ります。ペレットをトンネルに挿入します。最後に、切開部を外科用接着剤で密閉します。ペレットは安定した用量の DHT を放出し、薬物への長期曝露を確実にするために 4 週間ごとに交換されます。

ジヒドロテストステロンまたはDHTペレットの調製には、カミソリの刃を使用して15ミリメートルのシリコンチューブを切断し、鈍い20ゲージ針に装備された3ミリリットルの注射器を使用して、チューブの一端に2〜5ミリメートルの医療用接着剤シリコーンを注入します。チューブを一晩乾燥させ、密閉端に気泡がないか確認します。

適切な個人用保護具を着用し、フローフード付きのプラスチック製計量ボートにDHTパウダーを注ぎます。接着剤で覆われたチューブの開いた端を粉末に押し込みます。まっすぐに伸ばした大きなペーパークリップを使用して、DHTが適切な実験深さに達するまで粉末をチューブに突き固めます。次に、チューブの開いた側をシリコンで一晩

密封します。

翌朝、密閉された各面を切断して、DHTの両面に2mmの長さのシリコンを取得し、DHTコントロールペレットはありません。次に、ペレットをホイルで包んだ 50 ミリリットルの円錐形のチューブに入れて、室温で最長 3 か月間保管します。

PCOSマウスモデル生成では、摂氏37度で24時間、30ミリリットルの0.9%生理食塩水を含む別々の50ミリリットルのコニカルチューブで、最大20DHTまたはコントロールペレットを平衡化します。翌日、麻酔をかけた生後2か月の雌マウスのつま先のつまみに対する反応の欠如を確認し、滅菌ガーゼを使用して、ポビドンヨードと70%エタノールスクラブを手術部位に連続して投与します。

次に、首付近の皮膚を5mm切開し、10ゲージのトロチャーを使用して吻側方向に15mmのトンネルを作ります。トロチャーを使用してペレットをトンネルの背側に挿入し、切開部を外科用接着剤で密閉します。鉗子で創傷端を手動で近似し、穏やかなブラッシングストロークを使用して、並べられた創傷端の両側から1センチメートル外側に液体接着剤の3つの薄膜層を塗布します。

次に、完全に横臥するまで監視しながらヒートパッドの上のケージにマウスを単独で置き、4週間ごとにペレットを交換して、一定レベルのアンドロゲン曝露を維持します。