マウス心エコー検査:心臓の形態を評価するための非侵襲的技術

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まず、心エコー検査ジェルを超音波トランスデューサーと、加温プレートに固定された麻酔をかけたマウスの剃った胸に塗布します。トランスデューサーを首の右側を向いて胸骨の左側に配置して、胸骨傍長軸ビューと呼ばれる心臓を通してのビューを取得します。

トランスデューサーを時計回りに90度回して、胸骨傍短軸ビューを表示します。このビューを使用して、Mモード画像を記録し、心臓の鼓動時の時間の経過に伴う動きをキャプチャします。左心室の寸法を測定するには、記録された画像上の 4 つのランドマーク的な組織液界面を特定します。

これらは、右心室腔と左心室の前壁の間の界面、この壁と左心室腔の間、この腔と左心室の後壁の間、およびこの壁と心膜の間です。

次に、これら 4 つのインターフェイス間の距離を計算します。心臓が拡張期にあるとき、または弛緩しているとき、そして心臓が収縮しているとき、または収縮しているとき、同じ測定を繰り返します。

まず、マウスの尻尾を軽く持ちながら、標準的な実験室の天びんを使用して動物の体重を測定します。テキストプロトコルに従ってマウスを麻酔した後、後足を軽く握り、脚が引っ込められるかどうかを観察します。市販のげっ歯類シェーバーを使用して、胸部の左側と左脇の下を剃ります。

氏40〜42度に設定された暖かいパッドの上に、頭を12時、尾を6時の位置に置き、左側の浅い位置に動物を置きます。次に、テープを使用して左腕、左脚、尻尾を固定します。予め温めた心エコージェルを剃った胸とトランスデューサーの頭に塗布します。

次に、心エコートランスデューサーを胸骨傍左に配置し、首の右側に向けて、乳頭筋のレベルで2次元の胸骨傍長軸ビューを取得します。次に、トランスデューサを時計回りに90度回転させて、短軸ビューを取得します。最小深度設定とズームを設定して、画質とフレームレートを最大化します。スイープ速度を最大に設定します。2Dガイド付きMモード画像を短軸ビューで記録します。動物ごとに3つのハートビートシネループの少なくとも3つのシリーズを記録します。

録音が成功したら、手足と尾からテープを取り外します。マウス胸部、加熱パッド、およびトランスデューサーから心エコー検査ジェルを拭き取ります。マウスが目覚めるまで、不必要な光への曝露や熱損失を避けるために、ティッシュで覆われた温熱パッドの上にマウスを観察したままにします。次に、動物をケージに戻します。

記録されたMモード画像を短軸ビューから分析し、左心室または左心室の寸法と機能を決定します。保存された画像上の組織と血液の界面の識別を使用して、収縮期と拡張期の左室前壁の厚さ、収縮期と拡張期の左室の内部収縮末期と拡張期の直径、および収縮期と拡張期の左室後壁の厚さを測定します。見かけの最大 LV 拡張期寸法の時点での拡張期寸法と、LV 後壁の最も前方の収縮期可動域の終了時に LV 収縮末期寸法を測定します。タッチスクリーンの「分析」アイコンをタップし、「LVAWd」アイコンをタップします。拡張期に右心室腔と左室前壁の間の界面に電子キャリパーを配置します。

次に、電子ノギスを左室前壁と左室腔の間の界面に配置して、左室拡張期前壁の厚さを取得します。左室腔と左室後壁の間の界面にキャリパーを配置して、左室の内径と拡張期の直径を取得します。左室後壁と心膜の間の界面にキャリパーを配置して、左室拡張期後壁の厚さを取得します。

左室収縮期寸法の場合は、「LVAW」アイコンのタッチスクリーンをタップし、収縮期の右心室腔と左室前壁の間の界面に電子ノギスを配置します。電子ノギスを左室前壁と左室腔の間の界面に配置して、左室収縮期前壁の厚さを取得します。キャリパーを左室腔と左室後壁の間の界面に配置して、左室の内径と収縮期の直径を取得します。左室後壁と心膜の間の界面にキャリパーを配置して、左室収縮期後壁の厚さを取得します。