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主に腹膜の大網、腸間膜、子宮、生殖腺、および脾門脈領域に存在する脂肪組織または脂肪貯蔵庫は、転移中のがん細胞のコロニー形成に適した微小環境を提供する可能性があります。
これらの腹膜脂肪貯蔵庫を分離するには、安楽死させた雌マウスを採取することから始めます。腹膜壁を正中線で外科的に切開し、内臓を露出させます。次に、胃と膵臓脾臓複合体に存在する大網脂肪を見つけて抽出します。卵巣を取り巻く性腺脂肪を切除します。さらに、子宮角を包み込んでいる子宮脂肪を取り除きます。続いて、小腸と幽門の接合部を切断し、腸に付着した腸間膜脂肪を放出します。最後に、脾臓の遠位端と膵臓をつなぐ脾門脈脂肪の細い帯を抽出します。
解剖された脂肪組織を適切な冷却バッファーに維持して、組織の生理学を維持します。これらの腹膜脂肪組織を分析して、コロニー形成された転移性がん細胞の存在を評価します。
腹膜脂肪貯蔵庫の採取は内臓の除去を構成するため、腹壁を通して鼠径乳頭の近くに正中線を切開して内臓を露出させます。大網脂肪を切除するには、鉗子で腹腔から脾臓を伸ばして大網膵臓複合体を露出させます。
性腺脂肪については、鉗子を使用して卵巣を取り巻く性腺脂肪を持ち上げ、組織接続を切断して切除します。すぐに組織を氷冷のPBSに入れます。次に、鉗子を使用して子宮角を取り巻く子宮脂肪を持ち上げ、組織接続部を切断して切除して子宮脂肪を除去してから、すぐに組織を氷のように冷たいPBSに入れます。
腸間膜脂肪を得るときは、小腸と幽門の間の接合部を切断します。鉗子を使用して小腸の自由端をしっかりとつかみ、腸間膜脂肪からゆっくりと剥がします。解剖はさみを使用して腸間膜の根から腸間膜脂肪を解放します。次に、すぐに組織を氷冷のPBSに入れます。
最後に、脾門脂肪を除去するには、鉗子を使用して脾臓の遠位端を持ち上げ、脾臓の肺門と膵臓をつなぐ組織の薄い脂肪帯を露出させます。脾門脂肪を最初に膵臓から放出し、次に脾臓から慎重に解剖することにより、脾臓門脈脂肪を切除します。次に、すぐに組織をPBSに入れます。
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