がん細胞の前立腺内注射:同所性前立腺がんモデルを確立するためのがん細胞送達技術

前立腺内同所性腫瘍注射は、前立腺組織の組織型に一致する腫瘍細胞をレシピエント動物の前立腺に直接送達します。

まず、麻酔をかけた雄マウスを仰臥位で準備します。腹部正中線切開を行い、内側の筋肉組織を解剖して腹腔を露出させます。前立腺葉の1つを見つけます。これらの前立腺葉は精嚢の小湾曲に付着し、膀胱の近くにあります。

次に、目的の基底膜マトリックスと混合した前立腺癌細胞の冷やした懸濁液を前立腺葉の長軸に注入します。細胞懸濁液が完全に送達され、針をそっと引っ込めます。マトリックスを固化させ、セルを埋め込みます。

続

いて、前立腺葉を精嚢とともに腹腔に戻します。外科的切開部を縫合します。マウスが回復するまで待ちます。マウスを毎週チェックして、前立腺葉内の同所性腫瘍の増殖を観察します。

つま先をつまんでも反応がないことを確認したら、マウスの目に軟膏を塗り、動物の腹部の毛皮を全て削ります。露出した皮膚を、滅菌非付着パッドを使用して 3 ラウンドの外科用スクラブで滅菌し、続いて滅菌アルコールワイプを使用します。皮膚が乾いたら、マウスを仰臥位で清潔な手術顕微鏡の真下の加熱パッドの上の清潔な表面に置き、腹部に小さな穴を開けた滅菌ドレープで動物を覆います。

陰茎と包皮腺よりも上の腹部の正中線に沿って、外側の皮膚と内側の腹部の筋肉組織に1センチメートルの切開を行います。両側精嚢の1つと、通常は後部、外側、膀胱よりわずかに上にある前前立腺葉の1つを見つけます。アシスタントに、Myc-CaPマトリゲルがん細胞溶液を穏やかなピペッティングで混合し、50マイクロリットルのシリンジに取り付けられた28ゲージの針に30マイクロリットルの細胞をゆっくりと吸引するように依頼します。

次に、Graefe組織鉗子を使用して、1つの精嚢の先端をそっと持ち上げて、小胞に穴を開けずに組織に張力を与え、前立腺葉の長軸に平行に針の斜角を慎重に挿入します。細胞の全量をゆっくりと葉に注入し、続いて漏れを防ぐために針をゆっくりと引っ込めます。

注射の成功は、内前立腺葉の充血によって明らかになります。精嚢と注入された前立腺葉をマウスの外側に約30秒間保持し、マトリゲルが葉内で部分的に固化できるようにします。滅菌ポリエステルチップ付きアプリケーターを使用して、腹部への細胞溶液の漏出を収集し、非同所性腫瘍の発生を防ぎます。

正確な前立腺内注射は、同所性腫瘍の発生にとって重要です。精嚢に穴を開けないように細心の注意を払い、がん細胞懸濁液をゆっくりと注入し、細胞漏出物を収集することで、この手順の成功率が高まります。

次に、精嚢と注入された葉を葉に圧力をかけずにそっと腹部に戻し、外部化された組織を交換します。5-0 ビクリル吸収性逆切断針縫合糸を使用して、内腹部の筋肉組織を連続ステッチで閉じ、続いて 4-0 ナイロン モノフィラメ