腎カプセル腫瘍異種移植:前立腺発がんを評価するための実験動物モデルを生成する技術

腎被膜腫瘍異種移植では、ドナー生物からの癌組織の小片が、異なる種に属する免疫不全レシピエント動物の腎臓に移植されます。

まず、免疫不全の麻酔マウスを腹臥位で準備します。背側正中線を小さく切開し、皮膚を下にある筋肉壁からそっと分離します。

マウスを横方向の位置に移動します。分離された皮膚を引っ張って、筋肉壁を通して腎臓のプロファイルを見て腎臓を見つけます。筋肉壁を小さく切開して体腔を露出させます。切開部を広げて腎臓を外側にします。

次に、腎臓の被膜または腎臓の薄い膜の外側の覆いに小さな切開を行います。丸いエッジのガラスピペットを使用して、腎臓カプセルの切断端から小さなポケットを開きます。前立腺組織移植片をポケットに挿入します。

腎臓を体腔内にそっと押し戻します。傷を縫合し、マウスを回復させます。動物を定期的に監視して異種移植片を観察します。

腎組織の高度に血管新生した微小環境により、酸素と栄養素の一定の供給が保証され、最終的に腫瘍塊の生着と成長が成功します。

外科手術を開始する前に、必要な器具をすべて滅菌し、作業エリアを準備してください。動物が適切に麻酔されたら、ベタジンとアルコールを繰り返し塗布して手術部位を消毒します。

滅

菌ドレープをその領域に適用した後、2〜3センチメートルの背側正中線切開が行われます。次に、下にある真皮を体壁から分離します。両側移植の場合は切開部の両側を分離するか、片側移植の場合は片方のみ分離します。分離したら、マウスを横方向の位置に置き、筋肉壁を通して腎臓のプロファイルを見て腎臓を見つけます。親指と人差し指で軽く押すと、内臓を視覚化するのに役立ちます。

細い虹彩はさみを使用し、主要な血管や脊髄神経を避けるように注意しながら、背骨と平行に体壁に1センチメートルの切開を行います。最初の切開部にハサミを置いた後、ハサミをゆっくりと大きく開き、この切開部を1.5〜2センチメートルに広

げます。

腎臓の両側の筋肉壁の外側に穏やかな圧力を加えることにより、腎臓を外部にします。次に、体壁に乗せる外側の腎臓の下に皮膚の端を押し込みます。他の構造物も存在する場合は、そっと押し込むことができます。腎臓が外側にある間、滅菌生理食塩水を塗布して腎被膜の水分補給を維持します。

腎臓カプセルをそっと持ち上げ、2〜4ミリメートルの切開を行います。切開のサイズは移植片のサイズによって決まりますが、カプセルの完全性を維持するために最小限に抑える必要があります。先ほど準備したピペットの丸みを帯びた閉じた端を、腎臓の表面に接するカプセルの下に挿入します。挿入したら、腎実質を損傷しないように細心の注意を払って、移植片用の小さなポケットをそっと開きます。組織移植片は、外科的切除中に得られた新鮮な前立腺組織から調製されます。

腎臓カプセルの切断端を持ち上げ、ピペットチップを使用し