マウスモデルにおけるがん細胞の粘膜内接種:同所性頭頸部がんマウスモデルを確立するための手順

同所性粘膜内接種中に、粘膜組織の組織型に一致する腫瘍細胞がレシピエント動物の粘膜組織に送達されます。

まず、麻酔をかけたマウスを手術台に首で拘束し、口に簡単にアクセスできるようにします。

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リンジ内の冷却された基底膜マトリックス中の高度に転移するがん細胞の懸濁液を調製します。低温により懸濁液が固まるのを防ぎます。

この懸濁液をマウスの頬の内側または頬側領域に慎重に注入します。頬側領域は頬粘膜で覆われており、頬粘膜は血管とリンパ管のネットワークに囲まれています。

がん細胞懸濁液が完全に送達されるようにし、針をそっと引っ込めます。マトリックスを固化させ、セルを埋め込みます。

マウスが回復するまで待ちます。注射から数日以内に、注射部位に原発腫瘍が発生します。最終的に、転移の可能性が高いこの腫瘍の細胞は、リンパ系を通ってリンパ節に血管外漏出する可能性があります。

これらのがん細胞は、新しい微小環境に適応し、増殖してリンパ節に転移コロニーを確立します。

注射の直前に、氷上で腫瘍細胞懸濁液と基底膜マトリックスの比率を1対1で細胞を混合します。レシピエント動物1匹あたり100マイクロリットルの細胞を含む23G針を備えた0.5ミリリットルの注射器を1本装填します。注射器を氷の上に置き、麻酔をかけたマウスのつま先のつまみに対する反応の欠如を確認します。

次に、口の両側の利用可能な空きスペースから針を右または左の頬側領域に挿入し、口腔内にある間は注射器を頬側領域と平行に保ち、細胞基底膜マトリックス懸濁液の100マイクロリットル容量全体を5秒間にわたって注射しやすくします。シリンジをそっと引き抜く前に、シリンジをさらに 5 秒間固定して、すべての材料が注入されていることを確認します。腫瘍は約1週間で目に見えるようになります。