0 閲覧数 • 3:00 分 • April 30th, 2023
げっ歯類では、腎臓には腎被膜と呼ばれる保護的な繊維状の外側の覆いがあり、その上に腎周囲脂肪の層があります。周囲の層なしでマウス腎臓を抽出するには、安楽死させたマウスを手術ベッドに仰臥位に配置することから始めます。
腹部の皮膚と筋肉層を切開します。腹腔が露出するまで縦方向の切開を続けます。次に、腸を見つけて少し持ち上げます。腸の下を切り取り、マウスの体から取り除き、腎臓を露出させます。
次に、尿管を見つけて、腎臓が腹腔から分離するように下にある結合組織を切断します。両方の腎臓を個別に切除します。抽出した腎臓を氷冷した緩衝液を入れた皿に入れ、解剖顕微鏡で観察します。
次に、腎臓から腎周囲脂肪を取り除き、尿管の漏斗状の拡張部分である腎盂を視覚化します。腎盂の一部を基部から切り取り、尿管の残骸を取り除きます。
最後に、外側の線維性腎被膜を表面的に突き刺します。作成した開口部を使用して、腎臓の表面から腎被膜全体を慎重に剥がします。これは、副腎(腎被膜に付着した内分泌腺)を除去し、無傷の腎臓を得るのに役立ちます。
内部組織鉗子と内部解剖はさみを使用して、腸をつまんで腹壁から持ち上げます。同時に、近位十二指腸と遠位結腸で腸の下側を体から切り取り、腎臓を含む後腹膜腔にアクセスします。
組織鉗子で尿管の遠位端をそっとつまんで持ち上げます。解剖はさみを使用して、挟まれた尿管の下を腎臓に向かって、周囲の結合組織から解放されるまで切ります。腎臓が露出したら、個別に摘出します。
シリコンエラストマーでコーティングされた皿に氷冷のKRB溶液を入れます。腎臓を解剖皿に移し、完全に水没していることを確認します。細いバネはさみと内鉗子を使用して腎臓の基部から脂肪組織を除去し、遠位腎盂またはRPと近位尿管を露出させます。
細いバネはさみと鉗子を使用して、近位尿管と遠位RPの一部をベースから取り除きます。先端の細い鉗子で外側の腎嚢を突き刺し、先端を腎体から遠ざけます。両手で鉗子を使用して、カプセルの緩い端をつまみ、残りの腎被膜が完全に除去されるまで剥
がします。