JoVE 実験百科事典
がん研究
0 回視聴 • 3:32 分 • April 30th, 2023
患者由来の尿路上皮細胞癌またはUCCマウスモデル生成では、免疫不全マウスにヒトUCC細胞を接種して、癌の進行と転移を研究します。
異種移植を開始するには、免疫不全の麻酔をかけた雌マウスを取ります。マウスの背中の下部を剃って骨盤領域を露出させます。次に、マウスを仰臥位に置き、露出した皮膚を接地電極として機能する分散パッドに接触させ、電気刺激中に回路を完成させます。
次に、ガイドワイヤーに取り付けられた細い中空チューブである血管カテーテルを取ります。カテーテルの表面に注油し、マウスの尿道に挿入して膀胱にアクセスします。ガイドワイヤーに活性電極を置き、膀胱壁を刺激します。この処置は、膀胱粘膜の保護バリアであるムコ多糖類層の破壊に役立ち、その後の腫瘍細胞の生着を助けます。
次に、血管カテーテルとガイドワイヤーのアセンブリを尿道からそっと取り外します。UCC細胞懸濁液を含む注射器に取り付けられた2番目の血管カテーテルを取り、マウスの尿道に挿入します。UCC細胞をマウスの膀胱に注入します。がん細胞は膀胱粘膜と相互作用して腫瘍を形成し、最終的には他の組織や臓器に転移する可能性があります。
UCC細胞注射のために動物を準備するには、脱毛クリームを使用して、6〜8週間齢の雌のNOD / SCIDマウスの腰を剃ります。UCC細胞を膀胱に投与するには、まず、4ワットの電力で単極電気焼灼機をセットアップします。マウスを麻酔した後、マウスを仰臥位に置き、鼻をイソフルランノーズコーンに入れ、裸で分散電極にしっかりと接地します。
24ゲージの血管カテーテルを潤滑ゼリーで潤滑し、血管カテーテルをマウス尿道を通して穏やかに、しかししっかりと挿入します。カテーテルが挿入時に曲がる場合は、ガイドワイヤーをカテーテルの半分まで挿入して安定性を確保してください。次に、血管カテーテルの端から 1 mm のところに 0.64 mm の固定コア ストレート ガイドワイヤーを完全に挿入します。
モノポーラピンをガイドワイヤーに1秒間保持し、膀胱粘膜の電気刺激を可能にします。新鮮な滅菌血管カテーテルを1ミリリットルのLuer-Lokシリンジに取り付け、最大200マイクロリットルのUCC細胞を採取します。尿道からガイドワイヤーと血管カテーテルを取り外し、細胞の注射器を取り付けた血管カテーテルを挿入します。
50マイクロリットルの細胞をマウス膀胱に注入し、細胞が膀胱壁に付着するように、血管カテーテルを取り外す前に数秒待ちます。最後に、マウスをイソフルランノーズコーンと接地パッドから取り外し、苦痛の兆候がないか手順後1時間
観察します。