0 閲覧数 • 3:24 分 • April 30th, 2023
軟髄膜疾患では、他の身体臓器からのがん細胞が、脳を囲む薄い組織層である軟髄膜内に含まれる脳脊髄液またはCSFに転移します。
脳室内注射は、血液脳関門を回避して、CSF への直接薬物投与を促進します。
まず、麻酔をかけたマウスを腹臥位で準備します。
頭を切開して頭蓋骨を露出させます。冠状縫合糸と矢状縫合糸の接合点であるブレグマを見つけます。
マイクロドリルを使用して、頭蓋骨から適切な距離で頭蓋骨に穴を開け、緻密な結合組織の最も外側の髄膜層である硬膜にアクセスします。
次に、オマヤ(小さな注入ポート)を穴にそっと挿入します。
完了したら、周囲の皮膚を縫合し、オンマヤを最適な時間固定します。
次に、目的の薬物懸濁液で満たされた注射器をオンマヤに接続します。
適切な流量を設定した後、薬物懸濁液を硬膜に注入します。
オンマヤは、脳の脳室のCSFに直接薬物送達するための無菌経路を提供します。
次に、注射器を取り外し、オンマヤを頭蓋骨にそのまま残して、その後の投与を行います。
マウスが回復するまで待ちます。
時間が経つにつれて、薬物分子はがん部位に向かって移動し、がん細胞の増殖と増殖を防ぎます。
25Gの小型注入ポートと1mmのスペーサーディスクを使用して、Murine Ommaya注入装置を組み立てます。
シアノアクリレート滅菌接着剤を使用して、約2.5ミリメートルの金属カニューレが右大脳半球に浸透し、無菌技術に従って皮膚を準備します。
皮膚を小さく切開し、続いて下にある皮下組織を鈍的に解剖して頭蓋骨を露出させます。過酸化水素を染み込ませた綿の先端のアプリケータースティックを使用して頭蓋骨を乾かします。
頭蓋骨に0.9ミリメートルのバリ穴を開け、ブレグマの後方0.5ミリメートル、外側1.1ミリメートルにドリルで開けて、硬膜を露出させます。
マイクロドリルを脇に動かし、バリ穴のすぐ周りの骨にそっと切り込みを入れます。シアノアクリレート滅菌接着剤を使用して頭蓋骨に注入ポートを貼り付け、約2.5ミリメートルの深さまで挿入します。
断続ステッチパターンまたは巾着縫合糸で4-0非吸収性ナイロン縫合糸を使用して切開部を縫合します。手術後のマウスは、回復のために個々のケージに収容します。
マウスに投与するには、ポート注射アダプターとハミルトン注射器を使用してマウスオマヤにアクセスします。鉗子を使用して、ミニチュア注入ポートの上部を持ち、ポートインジェクターアダプターをポートのセプタムにそっと完全に挿入します。
注入が完了したら、鉗子でMurine Ommayaをポート注入アダプターから取り外します。