0 閲覧数 • 3:09 分 • July 8th, 2025
蛍光分子断層撮影法 (FMT) は、腫瘍内に存在する蛍光タンパク質の分布を決定するのに役立つイメージング技術です。FMTを実行するには、まず麻酔をかけたマウスを服用します。このマウスモデルは、神経膠芽腫細胞(脳の癌細胞)で近赤外蛍光タンパク質を発現するように操作されています。
次に、マウスをイメージングカセットの中央に腹臥位に置きます。カセットの蓋を締めて、FMTイメージャーのドッキングステーションに挿入します。中に入ると、標識された神経膠芽腫細胞を含む適切な腫瘍領域を特定します。近赤外光は脳組織を深く貫通し、標的細胞に到達します。
これらの光波は、腫瘍領域全体を複数のポイントでスキャンします。その結果、神経膠芽腫細胞内の蛍光タンパク質は蛍光発出シグナルを生成します。これらの信号は、上から透過照明システムによって検出され、選択した腫瘍領域内のさまざまな場所から高品質の 2D 画像が生成されます。
最後に、ソフトウェア アルゴリズムを使用してこれらの画像を組み合わせ、脳内の腫瘍の局在を示す 3D 断層撮影モデルを再構築します。スキャン後、イメージングカセットからマウスを取り外し、回復します。
注入された細胞を画像化するには、麻酔したレシピエント動物を蛍光分子断層撮影イメージャーのイメージングカセットに入れます-ヘッドアダプターを最初に腹臥位に置き、ヘッドをカセットの中央に置きます。カセットを閉じた状態で、調整ノブを17mmで締めます。
動物が固定されたら、カセットを内部ドッキングステーションに挿入し、イメージャーとアナライザーのソフトウェアを開きます。「実験タブ」ウィンドウで、適切な「データベース」と「研究グループ」を選択し、「スキャンタブ」ウィンドウを開きます。「被写体の選択」をクリックして画像する被写体を選択し、「レーザーチャンネル」パネルでレーザーチャンネルを選択します。
「キャプチャ」をクリックして画像を取得し、キャプチャした画像のスキャンフィールドをクリックしてドラッグしてソースの場所を特定します。「再構築キューに追加」オプションにチェックを入れ、「スキャン」タブウィンドウで「スキャン」をクリックします。スキャンが完了したら、ドッキングステーションからイメージングカセットを取り出し、完全に回復するまで、監視しながら動物をケージに戻します。
イメージャーおよびアナライザーソフトウェアで画像を分析するには、「分析タブ」ウィンドウを開き、「データセット選択」パネルの「+」記号ボタンをクリックして、分析対象のデータセットと対象をロードします。次に、楕円体アイコンを使用して関心のある領域を選択し、「しきい値」列を右クリックして、「統計データ」パネルでしきい値を 0 に調整します。