小脳解剖とスライス調製:マウス小脳から組織スライスを生成する方法

0 閲覧数5:02 • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

マウスでは、小脳は前脳の基部に位置し、正中線 - 虫部 - で結合された2つの外側半球で構成されています。脳のニューロンの大部分を含む小脳は、神経学的研究に不可欠です。

脳スライスを生成するには、首を切られたマウスの頭から始めます。はさみを孔マグナム(頭蓋底の開口部)に挿入します。頭蓋骨をそっと切開して取り除きます。次に、脳をひっくり返して、視神経と三叉神経を切断します。脳を冷やした解剖培地に背側を上にして放出します。後脳を他の脳部分から分離します。

次に、下にある小脳の脚(小脳と脳幹の間の接続)を切断して、小脳を切り離します。小脳から髄膜を取り除きます。チョッパーブレードに垂直なティッシュチョッパープラットフォームに小脳を慎重に置きます。次に、適切な厚さの組織スライスを解剖します。すぐにスライスを濡らし、解剖培地を含むペトリ皿に戻します。

虫からスライスを分離して識別します。選択したスライスを、適切な増殖培地を含む培養プレートのウェルインサートに移します。さらなる実験のために、解剖された小脳スライスの構造的および機能的完全性を維持するために培養物をインキュベートします。

まず、小さなハサミを大孔にそっと挿入し、横に向かって1つの横方向の切開をして頭蓋骨を切断し、頭蓋骨の周り全体を切断します。頭蓋骨の背側部分を取り出すには、細いまっすぐな鉗子を使用して、頭蓋骨の背側部分を慎重に持ち上げます。

次に、腹側頭蓋骨と脳の間に鉗子を慎重に導入します。脳をそっとひっくり返し、視神経と三叉神経を小さなハサミで切ります。次に、頭または頭蓋骨の背側部分を、氷のように冷たい解剖培地が入った60mmの細胞培養皿のすぐ上で逆さまにして、脳が重力によって落下するのを助けます。

細い鉗子を使用して、背側を上に向けて、腹側を横たわるように脳の向きを合わせます。両眼顕微鏡下で、細いまっすぐな鉗子を使用して、前脳側の脳を固定します。次に、後脳を脳の残りの部分から分離します。小脳の下の小脳の花柄を切断して、小脳を後脳の残りの部分から分離します。

脳が分離されたら、細いまっすぐな鉗子を使用して髄膜を慎重に引き裂きます。細く湾曲した鉗子で小脳をそっと持ち、チョッパーカミソリの刃に垂直なプラスチック製のプラットフォームに背側を上にして置きます。次に、滅菌済みの細い端のピペットチップを1ミリリットルのピペットに取り付けて、小脳の周囲の過剰な解剖培地を吸引します。次に、組織チョッパーで小脳の厚さ300マイクロメートルの矢状切片をスライスします。

次に、スライスした小脳に解剖培地を一滴静かに加えます。次に、1ミリリットルのピペットに取り付けた広口径ピペットチップを使用して、スライスした小脳をゆっくりと吸引し、氷冷した解剖培地を含む60ミリメートルの細胞培養皿に戻します。

次に、2本の細いストレート鉗子を使用して、個々のスライスを分離します。次に、1ミリリットルのピペットに取り付けたワイドボアピペットチップを使用して、虫から最大4つの選択されたスライスを、解剖培地とともに6ウェルプレートの1つの培養インサートに移します。細い端のピペットチップを使用して、スライスの周りの余分な解剖培地を取り除きます。

10:02

チック小脳スライスと顆粒細胞前駆体の空間的にターゲットを絞ったエレクトロポレーション ex vivo培養

関連動画

0 再生回数

13:33

胚性マウス脳の器官型スライス培養における移行ニューロンの経時的共焦点イメージングウテロのエレクトロポレーション

関連動画

0 再生回数

06:31

オルガ鼻記小脳スライス培養におけるプルキンジェ細胞生存

関連動画

0 再生回数

10:41

出生後の脳における神経細胞の移動の高分解能タイムラプスイメージングのための器官型スライスアッセイ

関連動画

0 再生回数

03:47

マウスの子犬の脳からの視床皮質スライスの調製

関連動画

0 再生回数

04:34

胚のひよこの脳からの小脳スライスの取得

関連動画

0 再生回数

03:11

マウス脳からの内側視床-前帯状皮質スライスの生成

関連動画

0 再生回数

03:10

マウス脳皮質スライスにおける自発的およびオンデマンドの発作イベントの生成

関連動画

0 再生回数

09:45

オリゴデンドロサイトダイナミクスと髄鞘形成を研究するための器官型スライス培養

関連動画

0 再生回数

08:02

マイクロダイセクションによる開発小脳とは異なる細胞集団の単離

関連動画

0 再生回数

最終更新:1 8月 2026