心筋梗塞のマウスモデルの生成:マウスモデルにおける左前下行冠動脈の永久結紮術の外科的手技

まず、麻酔をかけたマウスを仰臥位で準備します。首に縦方向の切開を行い、唾液腺を移動させます。次に、筋膜(ストラップの筋肉を取り囲む結合組織層)を分離して、下にある気管を明らかにします。

口から挿管カニューレを挿入し、切開部から正確な気管挿入を確認します。カニューレを、マウスに適切な換気を提供する目的のパラメータに設定された人工呼吸器に接続します。

次に、マウスを右側臥位に配置します。左胸筋の間の皮膚を切開し、筋膜を分離します。人工呼吸器を呼気終末陽圧またはPEEP設定に変更します。

第3肋間腔で左側開胸術を行います - 第3肋骨と第4肋骨の間に行われる切開。PEEP モード中の気道の陽圧は、開胸術中の肺胞虚脱を回避します。

心臓にアクセスした後、心膜を取り除きます。左前下行動脈またはLAD冠状動脈(左冠状動脈から分岐する真っ赤な血管)を特定します。LAD 動脈は、左心室の大部分に血液を供給します。

左心房近位のLAD動脈を外科的に結びます。LAD動脈のこの結紮は、心室の青白さを引き起こします。切開部を閉じます。動物をケージに戻します。永久的な LAD 動脈結紮は、心筋への血流と酸素供給を妨げ、心筋の損傷と死をもたらします。

電気カミソリを使用して、麻酔をかけた25〜30グラムの雄C57BL / 6マウスの喉と胸郭の左側をすばやく剃ります。つま先をつまむことに対する反応の欠如を確認します。動物の目に軟膏を塗ります。マウスを仰臥位で加熱パッドの上に置き、目の過熱を避けるために頭の下に小さなガーゼ湿布を置きます。

手足を粘着テープで固定します。上切歯の下に5-0シルク縫合糸のループを通し、ループの端を加熱パッドに固定して、カニューレ挿入中に口を開いたままにします。剃った部分に脱毛クリームを塗り、綿棒で1分間優しくマッサージします。

余分な毛皮とクリームをガーゼで取り除き、露出した皮膚を0.9%生理食塩水とガーゼの滴できれいにします。剃った喉と胸部に滅菌ガーゼを塗り、ヨードポビドンにガーゼを浸します。人工呼吸器を一回換気量 7 ミリリットル/キログラム、換気量 140 ストローク/分に設定します。

顕微手術用実体顕微鏡下でマウスを動かします。喉の中心に皮膚を持ち、尾側/頭側線に沿って0.5センチメートルの切開を行い、唾液腺の葉を分離します。湾曲した鉗子を使用して、喉頭と気管が見えるまで胸舌筋の筋膜をそっと分離します。次に、ゴムバンドに取り付けられたリトラクターで開口部の端を固定します。

次に、舌をそっと横に引っ張り、鉗子を使用して、16ゲージカニューレの鈍い内針を気管に挿入します。喉の切開部から気管への正しい挿入を視覚化し、カニューレを人工呼吸器に接続します。ヨードポビドンを浸したガーゼを添加した滅菌0.9%生理食塩水を切開部に置き、手術中に組織を湿らせた状態に保

次に、排気チューブを水に入れます。気泡の存在は、挿管が成功したことを示します。左前下行冠動脈またはLADの結紮には、マウスを慎重に右側臥位に動かし、左前肢を新しい位置に再固定します。

左胸筋小筋と大胸筋の間の線を特定し、線に沿って斜めに1センチメートルの皮膚切開を行います。鈍い解剖マイクロハサミを使用して、組織を切開せずに胸筋の筋膜を分離し、ゴムバンドに取り付けられたリトラクターを使用して分離を維持します。

人工呼吸器を呼気終末陽圧3センチメートルの水に設定します。鈍い鉗子を使用して、3 番目の肋骨と 4 番目の肋骨の間の 3 番目の肋間腔で胸腔を開きます。各肋骨に 1 つずつ、2 つのリトラクターを胸郭に配置し、湾曲した細い鉗子を使用して、心臓や肺を傷つけずに心膜を慎重に取り除きます。

LADを、左耳介の端から頂点に向かって伸びる表面的な明るい赤色の線として配置します。ニードルホルダーを使用して、左心房の下2〜3ミリメートルのLADの下に7-0シルク縫合糸を通します。心臓組織を引き裂かないようにシルクをゆっくりと引っ張り、結紮糸を3つの結び目で結びます。左心室の左下部分は、結紮すると即座に青白くなります。

次に、リブリトラクターを解放し、鉗子で3番目のリブを持ち、3番目と4番目のリブの下に6-0シルク縫合糸を2回パスします。摂氏37度、0.9%生理食塩水を3滴開口部に置き、呼気排気管を2〜3回呼吸サイクル閉じて肺を適切に膨ら

縫合糸を 2 回投げて締めて固定し、筋肉を保持しているリトラクターを解放して、筋肉が正しい解剖学的位置に戻るのを助けます。次に、2針と5-0縫合糸シルクの2回のスローで胸部皮膚を閉じます。喉の皮膚を1針、5-0の縫合糸、シルク、2回のスローで閉じます。