マウスからの無傷の卵巣採取:マウスモデルから完全な卵巣を分離するための外科的処置

手術台上の右側臥位の麻酔をかけた雌マウスから始めます。次に、マウスの腹部を剃り、その部分を消毒します。傍腰椎皮膚を切開し、腹筋を解剖して腹腔を露出させます。

次に、卵巣脂肪パッドの1つ、つまり卵巣を取り巻く脂肪組織を見つけます。卵管は卵巣を子宮角と呼ばれる長い管状構造に接続します。さらに、卵巣の脂肪パッドと一緒に卵巣をそっと外側に出し、湿ったガーゼの上に置いて組織の水分を保ちます。

次に、卵巣滑包 - 卵巣と卵管の端をカプセル化する薄い膜を特定します。卵巣と卵巣靭帯の境界を形成する卵巣門の反対側の滑液包を切開します。卵巣靭帯は、卵巣と子宮角を構造的に接続しています。

卵巣を露出させた後、卵巣滑液包からそっと取り除き、卵巣門をクランプして卵巣を切除します。切除した卵巣を冷やした生理食塩水を入れた培養プレートに移します。

機能単位(それぞれに卵母細胞を含む卵胞)で構成される無傷のマウス卵巣を、さらに使用するまで保管してください。

施術を始める前に、つま先をつまんで適切な鎮静レベルを確認し、動物の目に軟膏を塗ります。マウスを仰臥位に置き、加熱したペーパータオルのスタックの上に置き、肋骨のすぐ下から遠位に移動し、40番ブレードバリカンを使用して、動物の両側の正中線の外側に数ミリメートルの2〜3センチメートル四方の毛を取り除き、正中線を覆う1〜2 2センチメートルの髪の毛のストリップ

で。 鎮

痛剤を投与した後、仰臥位で動物を加熱された無菌手術野に移し、2 x 2センチメートルの70%エタノール浸しガーゼを使用し、続いてベタジンスクラブを使用して手術領域を消毒します。次に、手術領域の1つに1〜1.5センチメートルの傍腰椎切開を行い、2本のハサミで下にある筋膜から皮膚を鈍く解剖します。

次に、筋膜をもう一度切開し、腹腔に到達するまで筋膜の下でできるだけ表面的に横方向に鈍く解剖します。切開部の上に2 x 2センチメートルのガーゼ外科用ドレープを置き、ガーゼを滅菌生理食塩水で濡らします。

小さな鉗子を使用して、卵巣を取り囲む脂肪組織を見つけ、脂肪パッドと卵巣をドレープにそっと抽出します。卵巣の脂肪パッドは、周囲の脂肪組織よりも白く見えます。卵巣滑液包を塞がないように注意しながら、1.5インチのブルドッグクランプをファットパッドに置き、処置中に管を所定の位置に保持します。

解剖

顕微鏡を使用して卵巣滑液包を特定します。次に、2つの時計メーカー鉗子で滑液包をつかみ、卵巣門の反対側の滑液包を切開して卵巣を露出させます。

滑液包をどこで引き裂くかを決定する前に、縫合前に新しい卵巣を配置する滑液包のポケットを視覚化してみてください。内因性卵巣を除去するために必要な範囲でのみ滑液包を開きます。

卵巣を滑液包からそっと取り出し、時計メーカーの鉗子で卵巣門をクランプして卵巣を切除し、出血を防ぎます。次に、ドナー卵巣を摂氏4度の滅菌生理食塩水を含む時計ガラスに入れ、ガラスの上に緩いカバーを置きます。