マウスの子犬からの白と茶色の脂肪デポコレクション:マウスの子犬から白い脂肪組織と茶色の脂肪組織を収穫するための外科的処置

哺乳類では、脂肪組織または脂肪貯蔵庫 - 主に脂肪細胞または脂肪細胞で構成される特殊な結合組織は、白色脂肪組織またはWATと褐色脂肪組織またはBATの2つの主要なタイプに分けることができます。

WATは、ミトコンドリアが少なく脂質滴が1つある白色脂肪細胞で構成され、エネルギーを蓄えます。主なWATは、皮下鼠径部WATと内臓WATです。

BATは、多数のミトコンドリアと脂質滴を含む褐色の脂肪細胞で構成され、体温を調節します。この組織は、肩甲骨間、頸部、腋窩領域に見られます。

これらの脂肪組織を単離するには、安楽死させたマウスの子犬を左側臥位にすることから始めます。次に、腹部の皮膚を切開します。皮膚を手足に向かってそっと引っ込めます。

後肢の上肢の前方、皮膚の最内層内にある皮下WATを特定します。皮膚の下から薄くて細長い皮下WATを慎重に切除します。

次に、マウスの子犬をうつ伏せの姿勢に置きます。肩甲骨または肩甲骨間領域から頭に向かって背側皮膚を切開します。肩甲骨間BAT(肩甲骨の間の真っ赤な組織)を見つけます。肩甲骨間BATをそっと取り外します。

採取した脂肪組織を適切な冷却バッファーで洗浄します。脂肪組織を緩衝液を含むチューブに低温でさらに処理するまで保存します。

皮下の白色脂肪組織を採取するには、安楽死させた新生児の腹部の周りの皮膚を切断し、脚の下の皮膚をそっと引っ張ります。皮膚組織を採取せずに、皮膚の内側または大腿四頭筋の上に付着した透明または白の薄くて細長い組織として現れる脂肪貯蔵庫を慎重に採取します。採取したデポをPBSですすぎ、脂肪組織を250マイクロリットルのPBSと200マイクロリットルの2X分離バッファーを含む1.5ミリリットルのチューブに氷上に置きます。

肩甲骨間茶色の脂肪組織を採取するには、肩甲骨から皮膚を頭の上に引き抜き、肩甲骨の間にある深赤色の脂肪組織を持ち上げます。脂肪の周りを慎重に切開して体から切り離し、組織の粘稠度と色を確認します。すすぎ後、250マイクロリットルのPBSと200マイクロリットルの2X分離バッファーを含む2番目の1.5ミリリットルのチューブに組織を氷上に置きます。