レーザードップラープローブの位置決め:マウスモデルにおける血流計測のための中大脳動脈にプローブを埋め込む技術

中大脳動脈 (MCA) は、大脳に酸素を含んだ血液を供給する顕著な脳血管です。

MCA内の血流を測定するには、麻酔をかけたマウスを腹臥位に置きます。左耳と左目の間の頭皮に小さな切開をして、側頭頭蓋骨を見つけます。隣接する筋肉層を切断して引っ込めて、頭蓋骨の下のMCAを視覚化します。

レーザードップラープローブを含むプローブホルダーをMCAの上に配置します。このステップにより、プローブを動脈の近くに埋め込むことができます。外科用接着剤を塗布して、プローブをその位置に拘束します。より多くの接着剤を使用して、移植されたプローブの周りの皮膚を閉じ、創傷部位を覆います。

プローブをレーザードップラー装置に接続します。プローブは、MCAの狭い領域に特定の周波数でレーザービームを集束させます。その後、動脈内を流れる赤血球がレーザービームを吸収します。

動いているこれらの細胞はレーザーを散乱させ、ドップラーシフト(放出された波の周波数の明らかな変化)を引き起こします。検出器はこれらの微細な周波数シフトを捕捉して、動脈内の血流を測定します。

10マイクロリットルのピペットチップの先端を切断して、レーザードップラープローブ用のホルダーを準備します。マウスが完全に麻酔されたら、手術領域で腹臥位に置きます。直腸プローブをそっと挿入して、外科手術中の温度を監視します。手術部位を消毒した後、左耳と目の間の頭皮を切り、頭蓋骨を露出させます。

次に、側頭筋を切断して退治させ、頭蓋骨の下にある複数の大脳動脈またはMCAを視覚化します。レーザードップラープローブまたはファイバーを左のMCAの上に接着剤で保持し、皮膚も接着できるように皮膚を閉じます。硬化剤の接着剤を2〜3滴塗布して、プロセスをスピードアップします。レーザードップラーファイバーが接着されておらず、いつでもチップホルダーから簡単に取り外せることを確認してください。