マウスモデルにおける経子宮胎児気管閉塞のモデリング:妊娠中のマウス内の胎児気管の結紮のための外科的処置

希望する妊娠週数の麻酔をかけた妊娠マウスを仰臥位に置きます。腹部を滅菌します。腹壁を外科的に切開する開腹術を行います。腹筋を解剖して腹腔を露出させます。

子宮角(複数の胎児を収容する長い管状構造)を特定し、同時に発育できるようにします。子宮角を腹腔からそっと外側に出し、横方向に配置します。さらに、候補マウス胚の首を視覚化する。

適切な太さの縫合糸で手術針を、胎盤から離れて子宮角領域を横方向にそっと挿入します。気管がある首の前部まで針をさらに進めます。子宮角の反対側の首から針を出るように向けます。縫合糸を慎重に締めて気管を閉塞し、子宮壁の完全性を確保します。子宮角を腹腔に戻します。

妊娠の進行を促進するために、温かい生理食塩水を腹腔に注入します。外科的切開部を閉じ、マウスが回復するまで待ちます。確立されたマウス胎児気管閉塞モデルを使用して、閉塞した気管が肺の発達に及ぼす影響を研究できます。

腹部表面をアルコールとポビドンヨードで洗浄し、手術中は無菌状態を維持します。妊娠中のダムの開腹術のために垂直切開を行い、すべての層を別々に切断します。両側の子宮角を特定し、手術の候補胎児を決定します。

両側に偶数の胎児がある場合は各子宮角に2人の胎児を手術し、奇数の場合は各子宮角に1人の胎児を手術します。視覚化に 2 倍の拡大鏡を使用して、子宮角を横方向に配置します。目と尻尾をガイドとして使用して、子犬を2本の指の間で上を向いて配置します。

子犬の頭に穏やかな圧力を加えて、頭を伸ばし、首を視覚化できるようにします。非外傷性針と6-0ポリプロピレン縫合糸を使用して、気管閉塞(TO)を実行します。胎盤を針の入口と出口のポイントから横に置き、遠ざけてください。

針

を子宮の側面から横方向に挿入し、胎盤から離れて、首の3分の1の前部に通します。次に、針を首の正中線までゆっくりと動かします。それを前部に向け、次に、気管の間、頸動脈鞘と子宮の反対側の首から出ます。

膜と子宮壁の完全性を維持するように注意しながら、縫合糸を結びます。腹部の子宮角を交換し、閉鎖する前に2ミリリットルの温かい滅菌生理食塩水を腹腔に注入します。

実行中の5-0ポリグラクチン縫合糸を配置して腹壁を閉じ、実行されていないシルク縫合糸で皮膚を閉じます。鎮痛のために0.1 mg / kgのブプレノルフィンを腹腔内に適用し、ダムを温かいインキュベーターで回復させます。手術を受けた動物が自分自身に餌を与え、個々のケージの中でそれを一人で飼うことができることを観察してください。