マウスモデルにおける大腸内視鏡ガイド下ピンチ生検:マウス結腸から組織サンプルを視覚化および抽出する技術

病理学的条件下では、大腸内視鏡検査により、炎症性創傷を詳細に分析するためのピンチ生検による結腸と組織の抽出を視覚化できます。

マウスで大腸内視鏡ガイド下ピンチ生検を行うには、生検アセンブリから始めます。アセンブリには、コネクタユニット、最適な直径の大腸内視鏡が事前に挿入された内視鏡シースが含まれています。大腸内視鏡は、光源、ビデオ光源、ガスポート、生検鉗子用の器具ポート

に接続されています。

次に、大腸内視鏡検査プラットフォーム上で腹臥位の麻酔マウスを準備します。尾を上に引っ張り、強制経口針を使用して肛門に適切な緩衝液を注入し、糞便を洗い流します。次に、大腸内視鏡を肛門に挿入し、直腸に進めます。結腸を膨らませたままにするためにガスを送り込みながら、結腸内視鏡を結腸に向かってさらに動かし続けます。

次に、鉗子を器具ポートから外し、ジョーを開きます。鉗子を直角に回転させて、最適な深さの傷を誘発します。傷が浅すぎるか深すぎるかは、それぞれ表在性創傷または結腸穿孔を引き起こします。その後、生検鉗子を使用して、結腸組織をつまみ取ります。抽出された組織と誘発された創傷をさらに分析して、病態生理学を理解することができます。

手順を開始する前に、1.9 ミリメートルの硬口径内視鏡を内視鏡シースに挿入し、組み立てた内視鏡を製造元の指示に従って光源とビデオ イメージング デバイスに取り付けます。付属のチューブを使用して、シースの左側、作業チャネルの隣にあるガスバルブにエアポンプを取り付けます。

作業チャネルが開いた位置にあることを確認し、作業チャネルに 3 つの Fr 生検鉗子を挿入します。鉗子をシースから突き出さずにシースの端まで進めます。

次に、麻酔をかけたマウスを腹側の内視鏡的病期分類プラットフォームに置き、ペダル反射に対する反応の欠如による適切な鎮静レベルを確認します。眼軟膏を塗布した後、3ミリリットルの注射器にラット強制経口針を付属させ、室温PBSを充填し、マウスの肛門に約1センチメートル針を挿入します。糞便が除去されるまで、PBSを優しく注入します。いくつかの糞便ペレットは、注入されたPBSとともにマウスから排出されるはずです。

組み立てた内視鏡を肛門に0.5センチメートル挿入し、鉗子の完全な「顎」がシースの端を超えるまで、生検鉗子を直腸のクリアされた内腔に進めます。鉗子を90度回転させて顎が東西方向に開くようにし、先端を開いて鉗子を約1センチ進め、鉗子を1回のスムーズな素早い動きで閉じたり引っ込めたりして生検を採取します。生検中に結腸に完全に送気しないように、ガスバルブの右側を開いたままにしてください。