Cisterna Magnaにおけるトレーサー分子送達:ブタにおけるCisterna Magnaの直接カニューレ挿入による蛍光トレーサー分子送達方法

脊椎動物の脳には、リンパ系と呼ばれるリンパ系に類似した特殊な体液交換システムが含まれています。このシステムでは、脳脊髄液または CSF が動脈周囲腔に入り、星状細胞端足に存在する特殊なチャネルを介して溶質交換が可能になります。溶質を運ぶCSFは静脈周囲腔に流れ込み、脳から溶質を洗い流します。この経路は脳生理学にとって重要であり、蛍光トレーサー分子を使用して視覚化できます。

まず、麻酔をかけた豚を腹臥位で準備し、頭を上に曲げます。後頭稜の下に切開します。筋肉を引っ込めて、大脳と延髄の間のくも膜下腔の開口部である大槽を露出させます。

硬膜を通してカニューレを大槽に慎重に挿入します。カニューレの周りに歯科用接着剤を塗布します。固めるのを待ちます。その後、人工CSFに懸濁した蛍光トレーサー分子を適切な速度で注入します。カニューレの基部で目に見えて脈動するトレーサー溶液が、送達の成功を確認します。

注射後、組織層の位置を変更し、切開部を縫合します。熱損失を制限するために、切開部に湿った綿ガーゼを置きます。トレーサー分子を所望の期間循環させます。蛍光顕微鏡で視覚化すると、トレーサー分子はグリンパ系内の CSF 分布を視覚化するのに役立ちます。

一方の人が動物の頭と首を持ち上げて曲げ、もう一方が大貯水槽を触診し、その解剖学的位置をメモします。22ゲージのカニューレを、縦軸に対して斜めの角度で、硬膜を通してゆっくりと慎重に大槽に導入します。次に、カニューレから針を引っ込め、ロックにキャップをかぶ

せます。 瞬間

接着剤とカニューレが組織に入る促進剤を塗布することから始めます。次に、歯科用セメントを塗布します。セメントが固まるまで5分間待ちます。カニューレからキャップを慎重に取り外します。10センチメートルのエクステンションを使用して、トレーサーを使用してカニューレをIVラインタップのオス端に取り付けます。

トレーサーを毎分100マイクロリットルの速度で、手またはマイクロ輸液ポンプを使用してゆっくりと注入します。点滴ラインタップを取り外し、キャップと交換します。トレーサーがカニューレの基部で脈動しているかどうかを確認します。次に、動物の首の下に土のうを置き、屈曲を維持します。

頭を放し、動物を安静にしてうつ伏せの姿勢に置きます。自己保持型レトラクターを解放し、筋肉を交換します。サージカルタオルクランプを使用して、筋肉の上で皮膚をまとめます。最初にガーゼを使用し、次に毛布でタオルクランプと切開部を覆い、熱損失を制限します。トレーサーを希望の時間循環させます。