0 閲覧数 • 3:03 分 • July 8th, 2025
ブタは、胸腔内の心臓を取り囲む多葉の肺(一対の呼吸器官)を持っています。気管は肺への空気の通過を可能にします。それは2つの主要な気道または気管支に分岐し、肺につながります。
肺内では、気管支は徐々に小さな気道に分かれ、気道の最小の末端枝は細気管支と呼ばれます。細気管支は、肺胞と呼ばれる小さな風船状の気嚢につながり、肺内のガス交換の部位です。
細気管支組織切片を分離するには、まず、採取したてのブタの肺を滅菌プラットフォームに置きます。胸膜の腹側表面(肺の内側を覆う薄い膜構造)を熱滅菌して、組織から表面汚染物質を除去します。このステップはまた、後続のステップで胸膜の簡単な切開を容易にします。
肺の長さに沿って切開し、周囲の組織を切除して気管支の軟骨を露出させます。さらに、気管支の最高点に横方向の切開を行い、気管から切り離します。
気管支の自由端を持ち、細気管支と細気管支の長さを周囲の肺胞組織からそっと離します。切除した細気管支切片を適切な培地ですすいでください。細気管支組織切片は、さらなる実験の準備ができています。
屠殺後すぐに肺を入手し、国内のクールボックスに入れて研究所に運ぶ。滅菌された表面と炎の下で作業してください。オートクレーブ滅菌したアルミホイルで覆われた清潔なプラスチック製のまな板の上に肺を置き、細気管支が無傷のままであることを確認します。肺は、食肉処理場や輸送中に損傷があった場合、使用には適していません。
パレットナイフを炎の下で加熱し、細気管支の周囲の肺の領域にナイフを非常に短く触れて、組織の表面を滅菌します。無菌に取り付けられたカミソリの刃を使用して細気管支周囲の表面組織を切り取り、細気管支と平行に切開して損傷を防ぎます。
細気管支が露出したら、目に見える最高点で細気管支を通して断面切開を行います。滅菌鉗子を使用して、細気管支の自由端を軽く持ち、滅菌に取り付けられたカミソリの刃を使用して残っている不要な組織を切り取ります。肺から細気管支を取り除くために、枝分岐が見える前に細気管支を横切って最後の断面切開を行います。
本記事では、豚肺の解剖学的構造を詳述し、細気管支組織切片を単離するためのプロトコルを提供します。この手法により、その後の実験に使用するための組織の完全性が確保されます。
ブタの肺から無傷の細気管支組織を確実に抽出することで、呼吸器疾患の創薬に向けた生理学的に妥当なex vivo感染モデルの開発が可能になります。この手法は、特にPseudomonas aeruginosaやStaphylococcus aureusなどの病原体に関する慢性肺感染症研究において、初期段階のターゲット検証およびメカニズムのデリスク(リスク低減)を支援します。標準化された組織調製により、前臨床ワークフロー全体における予測の信頼性とトランスレーショナルな連続性が向上します。
この組織抽出プロトコルは、初期の探索と前臨床モデル開発の接点に位置し、下流のスクリーニングやトランスレーショナルリサーチに向けた堅牢な感染モデルの構築を可能にします。
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最終更新:22 8月 2026