前眼部郭清:豚の眼から角膜前方眼部を分離する方法

脊椎動物の目は、水晶体の前方に位置する前眼部と、水晶体の後ろに位置する後部に分けられます。前眼部には、角膜、房水、虹彩、毛様体、水晶体が含まれています。後部には硝子体液、網膜、脈絡膜、視神経が含まれています。前眼部を培養して、眼疾患の病態生理学を研究することができます。

動物モデルから前眼部を解剖するには、分離したばかりのブタの目から始めます。眼窩外組織を眼から取り除き、抗生物質を添加した緩衝液で洗浄します。目の汚染を防ぐために、抗生物質を染み込ませた滅菌ガーゼの上に目を置きます。

メスを使用して、赤道領域の近くの目を切開し、角膜強膜の殻(線維層と血管層)を開きます。湾曲したハサミを使用して、前眼部を後眼部から分離します。前眼部を慎重に裏返します。次に、硝子体液をすくい取り、レンズを取り外します。

虹彩を虹彩の根に向かって放射状に切除して、小柱網(房水が目から排出される色素沈着組織)を明らかにします。毛様体の痕跡を取り除き、薄い組織バンドを残します。濡れた綿棒で角膜を拭き、残留色素を取り除きます。前眼セグメントは、さらなる実験のために培養できるようになりました。

眼

窩外組織を除去し、抗生物質-抗真菌剤-PBSで目を洗った後、目を半切開し、抗生物質-抗真菌剤-PBSに浸したガーゼの上に目を置きます。滅菌カミソリの刃またはメスを使用して、目の赤道付近を切開します。次に、湾曲した手術用ハサミを使用して眼を半切開し、前眼を分離します。

マイクロハサミをシャベルとして使用して、前眼部から硝子体液をすくい取り、マイクロハサミで前眼部からレンズを取り除きます。徐々に、小柱網が見えるまで、虹彩を虹彩の根元まで放射状に切ります。カットをアイリスの周囲に 360 度伸ばして、小柱網領域全体を露出させ、必要に応じて小柱網を覆っている残りの虹彩をクリーンアップします。

線状網領域の後方にある毛様体の残骸をトリミングし、組織の1ミリメートルの薄いバンドだけを残します。前眼部をシャーレに入れた後、綿棒を培地に濡らし、角膜の中央を軽くたたいて色素を取り除きます。鉗子で目を持ち、拭いて強膜の周りの余分な色素を取り除きます。