JoVE 実験百科事典
生物学
0 回視聴 • 4:34 分 • July 8th, 2025
まず、麻酔をかけたウサギを仰臥位で準備します。腹部を滅菌し、正中線の皮膚切開を行い、腹筋をつなぐ膠原組織の薄い白い帯である白線を露出させます。次に、白線を解剖し、腹膜(腹腔の内側を覆う漿膜)を切断して、腹腔内臓器にアクセスします。
上部中央腹部の赤褐色の肝臓を見つけます。ウサギの肝臓は、右、左外側、左内側、方形、および尾状葉で構成されています。左内側葉の下外側にある左外側葉を特定します。次に、左外側葉を引き出し、腹腔内に収縮しないように乾いたガーゼの上に置きます。臓器を濡れたガーゼで覆い、水分を保ちます。
一方、腫瘍を有するドナーから得られた目的の腫瘍組織を処理して、適切なサイズの断片を取得します。ブレードを使用して、腫瘍断片移植用の小さなポケットを作成するのに十分な深さで外部の肝被膜に穴を開
けます。処理された腫瘍片をポケット内に移し、ブレードを取り外します。ポケットに止血剤を塗布して出血を止め、腫瘍片の排出を防ぎます。止血後、肝臓を腹腔内に戻します。外科的切開部を縫合し、ウサギが回復するのを待ちます。毎週動物を監視し、肝腫瘍の成長を観察します。
腫瘍の実装のために、まず、ペダル反射に対する反応の欠如を確認します。確認されると、動物被験者は麻酔下に置かれます。適切なレベルの麻酔が確認され、腹部は無菌で準備され、ドレープされます。麻酔後、#15ブレードを使用して、剣状突起から始めて3〜4センチメートルの垂直正中線皮膚切開を行います。
皮膚を引っ込めて、正中線に沿って下部に移動する組織の反射性白い帯である白線を特定し、鈍的および鋭い解剖の両方を使用して線状白線を横断し、腹膜を露出させ、下にある腸組織に穴を開けないように注意します。腹腔組織を慎重に解剖して肝臓を見つけ、止血剤を使用して必要に応じて、皮膚、筋肉、腹膜を通して正中線切開を1〜2センチメートル下に伸ばします。
正中線にある内側葉の下外側にある左葉を特定し、肝臓が腹部に後退するのを防ぐために、切開部の下側に乾いたガーゼを置きます。抽出した肝臓の上に新しい湿ったガーゼを置きます。
鉗子で1〜2立方ミリメートルの腫瘍組織片を選択し、#11ブレードを使用して、肝被膜の背側を貫通しないように注意しながら、0.5センチメートルの深さのポケットに対して45度の角度で肝組織に穿刺します。ブレードを腹側にそっと持ち上げて肝床に小さなポケットを作り、腫瘍をポケットに入れます。
止血を促進し、腫瘍片の排出を防ぐために腫瘍ポケットに止血剤を置き、止血を確認した後、肝臓を腹腔に戻します。次に、テーパー針に3-0ポリジオキサノン縫合糸を使用し、腹壁を閉じるための単純な連続ステッチを使用し、切断針に4-0ポリグラクチン910縫合糸を使用し、皮膚を閉じるための連続皮下ステッチを使用します。
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