馬のドナーの関節からの関節軟骨の採取:馬のドナーの死体関節から血管結合組織を分離するための外科的処置

関節軟骨は、特定の関節の対向する骨の端を覆う高度に特殊化された無血管結合組織であり、下にある軟骨下骨への負荷分散を促進します。滑液に囲まれ、表面を滑らかにして関節の動きをスムーズにします。

関節軟骨を採取するには、無菌プラットフォーム上の無傷の馬の死体関節から始めます。関心のある関節領域を取り巻く皮膚と余分な脂肪組織を取り除きます。関節の角度運動を実行して、関節の位置を特定します。

関節領域の周囲に水平方向と垂直方向の切開を行います。筋肉と腱(筋肉を骨に付着させる結合組織)を取り除き、滑液で満たされた関節腔を明らかにします。関節を固定している結合組織を切開して、関節を完全に露出させます。関節軟骨の光沢があり滑らかな外観を目視検査し、損傷がないことを確認します。

軟骨下骨から関節軟骨をそっと切除し、組織の乾燥を防ぐために適切な緩衝液で軟骨を湿らせます。軟骨スライスを抗生物質を含む緩衝液で洗浄し、微生物汚染を除去します。

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すぎた関節軟骨を液体窒素冷却イソペンタンでスナップ凍結し、超低温に凍結して組織成分の完全性を保ちます。軟骨を凍結乾燥させて、組織から水分を取り除きます。フリーズドライした軟骨スライスは、使用するまで室温で保管してください。

軟骨を分離するために無傷の死体関節を取得し、付属のテキストプロトコルに記載されているように、皮膚、余分な脂肪、および筋肉組織を除去します。次に、関節の伸展と屈曲を行うことで、関節が関節を関節する位置を定義します。関節腔に到達するように水平に切開します。

次に、関節領域を開くために垂直に切開します。関節腔は滑液で満たされており、正しい切開を行うと空洞から滴り落ちる可能性があります。余分な脂肪、筋肉、腱を取り除き、関節をつなぎ合わせている腱を切断して、関節を完全に開き続けます。軟骨に肉眼的な損傷がないか注意深く検査します。

関節軟骨に光沢や滑らかな外観がない場合、または明らかな水ぶくれ、裂け目、または欠損が存在する場合は、軟骨を廃棄して最初からやり直してください。

滅菌メスを使用して骨から軟骨を取り除きます。軟骨下骨まで切り落とし、深部軟骨を除去します。除去した軟骨スライスを、事前に準備した軟骨洗浄液を含む50ミリリットルのチューブに集めます。処理中は、軟骨の乾燥を防ぐために定期的に軟骨洗浄液を軟骨に滴下してください。

関心のあるすべての領域から軟骨を収集した後、軟骨スライスを液体窒素で5分間急速凍結します。次に、軟骨スライスを50ミリリットルのチューブに移し、すぐに冷凍スライスを凍結乾燥機に入れます。軟骨スライスを凍結乾燥機で24時間凍結乾燥します。終わったら、フリーズドライした軟骨スライスを室温の乾燥した場所に保管してください。