パパニコロウ染色:卵管細胞の細胞学的特徴を可視化する技術

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卵管上皮は、栄養豊富な体液を生成する分泌細胞と、液体を浴びた卵子を子宮に向かって推進する繊毛細胞で構成されています。卵管細胞の形態学的変化と機能喪失は、卵管がんと関連しています。

卵管の形態を視覚化するには、組織を塗ったスライドを取り、エタノールに浸して細胞学的特徴を修正します。スライドを水ですすぎ、余分な固定剤を取り除きます。

次に、スライドを負に帯電したDNAに結合するカチオン性色素であるヘマトキシリンに浸し、核を青く染めます。過剰染色を防ぐために、スライドを水で洗い流し、次にエタノールですすぎます。

その後、スライドをエオシンアズール染料(ビスマルクブラウン、エオシンY、およびファストグリーンをリンタングスチン酸に混合した多色溶液)に浸漬します。ビスマルクブラウンは、エオシンYが使用する媒染剤であるホスホタングステン酸とファストグリーンを沈殿させ、非癌性卵管細胞と代謝活性癌細胞を差次的に染色します。

水とアルコールのすすぎステップを繰り返します。最後に、スライドをキシレン(余分な汚れ成分を除去する透明剤)に浸します。その後、スライドを取り付け、顕微鏡で視覚化します。

正常な卵管上皮は、水色に染色された繊毛細胞、および分泌細胞の組織化された層として現れます。対照的に、上皮の悪性細胞は、暗い核を持つ細胞クラスターとして現れます。

細胞を染色する前に、サンプルバイアルを自動プロセッサーにロードしてスライド調製を行います。スライドの準備ができたら、サンプルを95%エタノールに10回、1ディップあたり1秒間浸し、続いて10回水に10

回浸漬します。

次に、スライドをヘマトキシリンに10〜60秒間沈め、続いて2回目の水-エタノール洗浄を行います。最後のエタノール浸漬後、スライドをエオシンアズールに1〜3分間浸し、その後、もう一度水でエタノールをすすぎます。次に、スライドをキシレンに浸します。サンプルが透明になるまで。