0 閲覧数 • 3:12 分 • July 8th, 2025
免疫応答を誘導し、Mtb特異的T細胞を生成する熱死結核菌( Mtb)で事前に免疫された麻酔マウスを取ります。
瞳孔散大のために点眼薬を投与して、光の透過性を高め、目の画像を改善します。角膜の脱水症状を防ぐためにジェルを塗布します。
マウスをガーゼで包んで体温を維持し、光干渉断層撮影法またはOCTシステムに入れます。
目を画像化して、角膜と水晶体を含む前房と網膜を含む後房の断面画像を取得します。
炎症がないことを確認するために検査します。
熱殺したMtbを硝子体腔に注入します。免疫原は目全体に広がり、免疫応答を引き起こし、事前に形成された Mtb 特異的 T 細胞やその他の免疫細胞の浸潤を誘導し、ブドウ膜炎と呼ばれる炎症を引き起こします。
前房のOCTは浸潤した免疫細胞と角膜浮腫を明らかにし、後房のOCTは硝子体の炎症を示します。
ブドウ膜炎の進行を定量化するために、炎症の重症度に基づいて OCT 画像をスコアリングします。
マウスを麻酔した後、2.5%フェニレフリンを1滴垂らして瞳孔を拡張し、過剰な液滴が鼻や口に入るのを防ぎます。2〜3分後、余分な液体を軽くたたき、0.3%ヒプロメロースゲルで目を覆います。次に、マウスを手術用ガーゼの層で包んで体の温かさを維持し、マウスを動物カセットの上に置き、バイトバーで頭を配置します。
光コヒーレンストモグラフィー(OCT画像)を取得するには、OCTイメージングシステムの電源を入れ、イメージングソフトウェアを開きます。後房イメージングの場合は、レンズの表面が目に接触しないように注意しながら、OCT を目の表面に近づ
けます。目が正しく配置されたら、高速スキャンを停止し、ボリュームスキャンプロトコルを選択し、エイムオプションでスキャンをアクティブにします。後眼部画像の場合は、視神経が水平方向の B スキャン アライメント イメージの中心に配置され、網膜が垂直方向のアライメント軸に揃うまで調整します。前眼部画像の場合は、水平方向のB-Scanアライメント画像と垂直方向のB-Scanアライメント画像の両方で角膜の頂点を中央に位置を調整します。最後に、[スナップショット]をクリックしてボリュームスキャンイメージをキャプチャします。次に、「保存」をクリックします。
本研究では、マウスモデルを用いて光干渉断層計(OCT)により眼内の免疫応答を可視化する方法を提示します。この手法では、加熱死滅させた Mycobacterium tuberculosis を注入してぶどう膜炎を誘発し、OCTイメージングを通じて炎症の状態を評価します。
光干渉断層計(OCT)を用いることで、前臨床モデルにおける眼内炎症の非侵襲的な縦断的評価が可能となり、眼科領域の創薬におけるターゲットバリデーションおよびメカニズム面でのリスク低減を支援します。OCTで免疫細胞の浸潤や組織浮腫を定量化することで、ぶどう膜炎治療薬の開発におけるgo/no-go判断を向上させ、後期の開発失敗リスクを低減させる予測的なリードアウトを提供します。このイメージング手法は、客観的で再現性のある炎症スコアリングを通じて、基礎生物学的な発見とトランスレーショナルリサーチを橋渡しします。
OCTイメージングは、ターゲットの検証からリード化合物の同定、そして前臨床有効性試験に至る発見の連続的なプロセスに適合し、各段階におけるデータに基づいた意思決定を可能にします。
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最終更新:22 8月 2026