末梢血採取と血漿単離のためのマウステールスニップ法

マウスを

消毒されたチャンバー内に配置して、尾にアクセスできるようにします。

マウスの動きを最小限に抑えるためにチャンバーを固定します。

尾を滅菌し、麻酔

をかけます。

鋭利な手術用ハサミを使用して、血管のネットワークを含むマウスの尻尾の先端から小さな部分を切り取ります。

この尾切り取りにより、少量の末梢血を採取することができます。

チューブの毛細管作用を利用して、ヘパリン化された毛細血管に血液を集めます。ヘパリン化されたチューブは血液凝固を防ぐのに役立ちます。

バルブシリンジを使用して、血液をEDTAコーティングされたチューブに移します。

抗凝固剤であるEDTAと血液を適切に混合するために、チューブを反転させます。EDTAは血液中のカルシウムイオンと結合し、凝固を防ぎます。

チューブを遠心分離して血球から血漿を分離します。

血漿を含む最上層を収集し、新しいチューブに移します。

プラズマ成分の完全性を維持するために、チューブを低温で保管してください。

末梢血サンプルを採取するには、まず、消毒した小動物拘束装置にマウスをそっと置き、動物の動きを最小限に抑えるようにチューブを固定します。

次に、新鮮なイソプロピルアルコールで尾をこすり、次に局所麻酔クリームを塗布します。

非常に鋭利な手術用ハサミを使用して、尾の先端から約0.5〜1ミリメートルを切り取り、約80マイクロリットルの末梢血をヘパリン化した毛細血管に採取します。

バルブシリンジを使用して血液サンプルを標識されたカリウム-EDTAマイクロテナーチューブに移し、凝固を防ぐためにチューブを20回反転させます。

製造元の指示に従って採血管を遠心分離した後、血漿層を慎重に収集し、アリコートを摂氏マイナス20度で保存し、血漿を摂氏マイナス20度で保存します。