JoVE 実験百科事典
免疫学
0 回視聴 • 5:09 分 • July 8th, 2025
血小板製品をリボフラビンとUV照明の保存袋に入れます。
リボフラビン分子を血小板製品に導入します。
血小板製品に臨床的に関連する細菌を接種し、完全な混合を確保します。
少量のサンプルを取り出し、連続希釈を実行します。
適切な希釈液を適切な寒天培地に広げ、インキュベートして初期細菌負荷を測定します。
血小板製品を紫外線にさらします。
リボフラビンは細菌細胞に吸収され、そこで細菌の核酸と相互作用します。
紫外線への曝露は、リボフラビン-核酸複合体の光分解を引き起こし、鎖の切断を引き起こします。この不可逆的な損傷により細菌が不活性化されます。
血小板は核酸がないため、治療の影響を受けません。
治療後、血小板サンプルを採取します。
連続希釈とスプレッドプレート手順を繰り返して、処理後の細菌負荷を定量化します。
初期と治療後の細菌量を比較して、リボフラビンと紫外線治療の有効性を測定します。
マイクロリットルあたり0.80〜380万血小板の濃度で、90〜360ミリリットルの標準的なアフェレーシスヒト血小板製品を取得します。バッグを摂氏22度の血小板インキュベーターで少なくとも2時間休ませてから、使用するまで60RPMで穏やかに攪拌します。
血小板産物の 2 ミリリットルのサンプルを採取し、摂氏 22 度の血液ガス分析装置を使用して、pH が 6.6 を超えていることを確認します。同じサンプルを使用して、血液分析装置で血小板濃度を測定し、血小板濃度が所望の範囲内にあることを確認します。
次に、血小板バッグを直接白色光源の下にかざして目視検査します。バッグを短く絞り、サンプルの渦巻きパターンを観察します。バッグを絞る前後に濁った均一性が残っている場合は、血小板を使用しないでください。
チューブドッキング装置を使用して、血小板をリボフラビンとUVライトの照明と保存バッグに移します。チューブシーラーを使用して空の血小板バッグを取り出し、バイオハザード廃棄物として廃棄します。
次に、500マイクロモルのリボフラビン原液の遮光アウターラップを取り外します。リボフラビンパウチを治療および保管バッグの入口ラインに滅菌ドッキングし、内容物を血小板ユニットに排出します。次に、リボフラビンポーチからポーチとトリートメントバッグセットを吊るします。残留空気をトリートメントバッグからそっと押し出し、リボフラビンバッグに押し込みます。残留リボフラビンを少量の血小板製品で血小板ポーチにすすぎます。
リボフラビンと血小板溶液を治療バッグに排出します。次に、入口ラインをクランプし、チューブシーラーで空のリボフラビンバッグを取り出し、空のバッグを適切に廃棄します。メスシリンジコネクタを備えた6インチのチューブラインを、照明と保管バッグの入口ラインに滅菌ドッキングします。
10ミリリットルのシリンジバレルを
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