マウスにおける冠動脈結紮のために修飾されたテクニック

この手順の全体的な目的は、マウスに心筋梗塞を作り出すことです。これは、最初に腋窩の中央線に沿って皮膚を切開することによって達成されます。次に、心臓は第3肋骨と第4肋骨の間の左開胸術によって露出します。

次に、左前下行動脈の近位部分で結紮が行われます。最後に、胸部を閉じ、マウスをケージに戻して自然に回復させます。最終的に、心筋梗塞は心電図検査または心エコー検査によって検査することができます。

この方法の視覚的なデモンストレーションは、左に近い冠状動脈の結紮を学ぶのが難しいため、非常に重要です。適切な心筋感染は、結紮を左のオラクルのすぐ下に配置することによって確保されます。しかし、左のAUMに穴を開けると致命的な出血を引き起こす可能性があるため、穴を開けないことが重要です。

手術を開始するには、生後6週齢以上のマウスに2〜5%のフッ素を吸入して麻酔をかけます。つま先をつまんで、動物が十分に麻酔をかけられていることを確認します。マウスが完全に鎮静されたら、手術部位に移して装着します。

暖かいパッドの背中。摂氏37度の一定温度を維持するために、直径0.2cmのチューブと空気中の2%isofフッ素の混合物を使用したisofフッ素フィールドチャンバーを備えた挿管デバイスにマウスを固定します。チューブをマウスの気管に挿入します。

左側の胸部を剃り、次にベタジンでその部分を消毒します。次に、75%エタノールをそれぞれ3回。また、滅菌ハサミを使用してマウスの目に眼軟膏を塗布します。

腋窩の中央線に沿って1.5センチメートルの切開を行います。このアプローチにより、その後の心エコー検査の評価が容易になります。メスではなくハサミを使用して、これらの若いマウスの根底にある組織への損傷を防ぎます。

次に、鈍い先端血管鉗子を使用して、胸壁から前胸筋を解離して引っ込めます。第3肋骨と第4肋骨の間の左開胸術を行い、心臓と左肺の前面を視覚化します。もう。適切なまぶたのリトラクターを使用して胸壁を引っ込めます。

歯の鉗子と鈍い先端のはさみを使用して視覚化とアクセシビリティを向上させるために、心膜を取り除きます。次に、動脈の結紮のためのセブンゼロロン縫合糸と針を準備します。結紮糸と動脈の間に心筋のバンドを挟んで動脈の下に針を置くことにより、左冠状動脈を結紮します。

3番目と4番目の肋骨に2針縫って胸を閉じます。イソフッ素濃度を0.5%に減らし、5つのゼロエチレン縫合糸を使用して3針で皮膚を閉じます。術後鎮痛のために、ブプレノルフィン1キログラムあたり0.05ミリグラムの腹腔内注射を投与します。.

最後に、マウスを温かいケージに入れて自然回復させ、飲料水中にブプレノルフィン1ミリリットルあたり0.6ミリグラムを摂取します。手術後最初の24時間はマウスを注意深く観察し、心筋梗塞の影響を調査します。最も侵襲的な方法は、手術の数日後に心エコー検査で心機能を評価することです。

このプロトコルを使用して、左冠状動脈の結紮は、左心室の約 40% に関与する心筋虚血を誘発します。これにより、結紮前後に測定されたこれらの代表的なECGに示されているように、STセグメントに有意なECG変化が引き起こされます。心筋梗塞の前。

ECGで記録されたQRS群は狭くて短いです。心筋梗塞後、QRS複合体に埋もれる明らかなSTセグメントの上昇があり、QRSは心筋梗塞前に記録されたものよりもはるかに広く、背が高くなっています。心筋梗塞の影響を調べるには、心筋梗塞手術の数日後に心エコー検査で心機能を評価します。

ここに示されているのは、偽の手術マウスから採取した心エコー検査記録です。偽手術マウスに見られる良好な心臓収縮とは対照的です。MIマウスで。

MIの72時間後、収縮期の左自由心室壁に顕著な無動症があります。この動画を見れば、この心筋梗塞のマウスモデルについてよく理解でき、自分の研究室でセットアップできるようになるはずです。