マウスモデルにおけるヒト皮膚移植技術

さまざまな免疫細胞を欠く麻酔をかけた非肥満の糖尿病マウスおよび免疫不全マウスから始めます。

マウスは、好中球表面受容体を遮断し、免疫応答を抑制するために抗体で前処理されます。

結合組織を損傷することなくマウスの背中から皮膚を切除し、移植ベッドを作成します。

表皮と真皮の一部からなるヒトの分割厚さの皮膚を、表皮を上に向けて移植ベッドに置きます。

接着剤で固定し、包帯を巻くことで感染を最小限に抑え、移植組織を拘束します。

回復中、移植片組織はマウスの皮膚から酸素と栄養素を受け取り、その付着を促進します。

時間が経つにつれて、人間の皮膚とマウスの皮膚の間に血管が発達します。

これは、ヒト免疫細胞の循環と浸潤を確立するのに役立ち、マウスモデルでヒト皮膚移植を成功させます。

マウスを手術ステーションに移した後、手術領域を滅菌し、滅菌ラップをマウスにかぶせます。接ぎ木する領域のサイズよりわずかに大きいプラスチックの窓を切り取ります。

鉗子の裏側でドナーの皮膚を所定の位置にしっかりと保持し、鉗子の横に移植するドナーの皮膚の長方形の10 x 10 mmの部分をメスで切り取ります。筋膜に深く食い込まないように、皮膚を体から引き離します。移植ベッドを作成するには、ドナーの皮膚部分のサイズに合わせて、マウスの皮膚の長方形の領域を切り取ります。

次に、表皮側を上にしてドナーの皮膚片を準備した移植ベッドに置きます。鉗子の裏側を使用して、ドナーの皮膚が移植片ベッドに対して完全に平らになるまで前後にスライドさせながら、皮膚を操作します。

ドナーの皮膚がマウスの皮膚と接する場所に外科用接着剤組織接着剤の滴を追加し、接着剤が組織に付着するように鉗子でマウスとドナーの皮膚を1〜2秒間保持します。グラフトの端を完全に密閉し、接着剤を完全に乾かします。

次に、移植片領域を完全に覆うのに十分な大きさのワセリンガーゼをカットします。移植片をワセリンガーゼで覆い、鉗子を使用してガーゼを皮膚に軽く押し付けます。透明なフィルムドレッシングのストリップを縦に切り、幅がマウスの傷を覆うのに十分な大きさになるようにします。

透明フィルムドレッシングを粘着面を下にしてガーゼの上にしっかりと押し付けます。マウスを素早く回転させて包帯を胴体に完全に巻き付け、呼吸を妨げることなくしっかりとフィットし、すべての手足が自由に動くようにします。

マウスを回復ケージに入れた後、マウスが警戒して動き回るまで監視します。回収後、ケージの部分に少なくとも15分間熱源を提供します。